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正文內(nèi)容

高中生物dna重組技術(shù)基本工具教學(xué)設(shè)計(編輯修改稿)

2024-09-11 15:55 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 基因連接后的重組 DNA,互相觀察并比較是否有不同。 (見附圖 7) 提出第三個問題:我們?nèi)绾谓鉀Q目的基因定向插入這個問題呢? 在這個過程中提醒學(xué)生:載體的特點之一是有多個不同的酶切位點。 分發(fā)另一套材料,每組兩個環(huán)狀 DNA,兩個鏈狀 DNA(都帶 EcoRI, BamHI 兩種酶切序列),讓學(xué)生再次模擬操作。 (見附圖 8) (見附圖 9) 給學(xué)生展示 PPT,通過圖片和視頻使學(xué)生發(fā)現(xiàn)載體的特 點中除有多個酶切位點外,還攜帶有標(biāo)記基因(如氨芐青霉素抗性基因),標(biāo)記基因可以參與鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因。 (見附圖 10) 提出第四個問題:前面操作中,載體與載體重組得到的 DNA,載體與目的基因重組得到的 DNA 上都有標(biāo)記基因(如氨芐青霉素抗性基因),如何篩選出含目的基因的重組 DNA 呢?(這個問題難度較高,適合能力較強的同學(xué)) 如果學(xué)生未得到準(zhǔn)確的結(jié)論,提示他們:在基因工程的實際操作中,科學(xué)家選擇的載體往往含兩個或更多的標(biāo)記基因。 后產(chǎn)生的黏性末端只有一種,相同的黏性末端之間可以任意連接。 在這些連 接產(chǎn)物中,我們需要的是載體與目的基因連接而成的重組DNA。 觀察比較。 學(xué)生討論。 模擬操作。 剪切后,學(xué)生們觀察發(fā)現(xiàn),兩種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端是不同的,雖然載體與載體間,目的基因與目的基因間仍會連接,但載體及目的基因自身環(huán)化問題得到解決,根據(jù)堿基互補配對原則,目的基因與載體連接的方向是唯一的。這樣,通過模擬操作,學(xué)生們解決了剛才所提出的問題,得出結(jié)論:載體上含有多個酶切位點,利用雙酶切的方法,可以保證目的基因的定向插入,同時還避免了載體及目的基因的自身環(huán)化,提高DNA 重組率,實現(xiàn)目的基因的正確轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。 觀察,思考。 學(xué)生通過討論,設(shè)計,提出如果將一個標(biāo)記基因放在目的基因的插入位置,當(dāng)目的基因插入時,這個標(biāo)記基因?qū)⒈黄茐亩鵁o法表達(dá),從而達(dá)到篩選的目的。 向 將導(dǎo)致出現(xiàn)不同的基因產(chǎn)物。 通過思考,部分學(xué)生能夠提出用兩種限制酶切割載體,從而使切口處的黏性末端不同的思路。 通過層層深入的問題,逐步突出重點,突破難點,學(xué)生們發(fā)現(xiàn)科
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