【文章內容簡介】 e2+結合后，形成黑色的化合物，使培養(yǎng)基變黑。,方法：將待檢細菌接種到七葉苷培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察結果，培養(yǎng)基變黑色者為陽性，培養(yǎng)基不變色為陰性。,結 果,+,,第四十一頁，共六十八頁。,二、蛋白質和氨基酸的代謝(d224。ixi232。),第三節(jié) 細菌生化鑒定(ji224。nd236。ng)技術,原理：細菌產生色氨酸酶，分解培養(yǎng)基中色氨酸，生成靛基質（吲哚），靛基質與對二甲基氨基苯甲醛作用(zu242。y242。ng)，生成玫瑰靛基質， 是為靛基質試驗陽性。,方法：將待檢菌接種于蛋白胨水中，35℃培養(yǎng)18～24h，取出后沿試管壁加入靛基質試劑數滴，在兩液面觀察結果。,結 果,靛基質（吲哚）試驗,第四十二頁，共六十八頁。,二、蛋白質和氨基酸的代謝(d224。ixi232。),第三節(jié) 細菌(x236。jūn)生化鑒定技術,原理(yu225。nlǐ)：細菌產生酶，分解含硫氨基酸生成硫化氫，硫化氫與培養(yǎng)基中的亞鐵鹽或鉛鹽結合生成黑色化合物。,方法：將細菌穿刺接種到醋酸鉛培養(yǎng)基中， 35℃、18～24h，觀察結果。,結果：黑色管為陽性,硫化氫試驗,第四十三頁，共六十八頁。,二、蛋白質和氨基酸的代謝(d224。ixi232。),第三節(jié) 細菌生化(shēnɡ hu224。)鑒定技術,原理：細菌(x236。jūn)產生脲酶，水解尿素生成氨和二氧化碳，培養(yǎng)基呈堿性反應,方法：將待檢菌接種于尿素培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)18～24h取出觀察。,結 果,尿素酶試驗, +,第四十四頁，共六十八頁。,二、蛋白質和氨基酸的代謝(d224。ixi232。),第三節(jié) 細菌生化(shēnɡ hu224。)鑒定技術,原理：細菌產生苯丙氨酸脫氨酶，使苯丙氨酸脫氨形成(x237。ngch233。ng)苯丙酮酸，苯丙酮酸與三氯化鐵作用，形成(x237。ngch233。ng)綠色化合物,方法：將待檢菌接種于苯丙氨酸微量培養(yǎng)管中（接種量稍大），培養(yǎng)后在培養(yǎng)基上直接滴加10％氯化鐵試劑，出現綠色反應者為陽性。,結 果,苯丙氨酸脫氨酶試驗, +,第四十五頁，共六十八頁。,三、碳源利用(l236。y242。ng)試驗,第三節(jié) 細菌生化(shēnɡ hu224。)鑒定技術,原理：有的細菌能利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一(w233。i yī)的碳源，細菌在生長過程中分解枸櫞酸鹽產生碳酸鹽，使培養(yǎng)基呈堿性反應,方法：將待檢菌接種于枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察結果。培養(yǎng)基由淡綠色變?yōu)樯钏{色者為陽性，培養(yǎng)基中無菌生長、仍為綠色者為陰性。,結 果,枸櫞酸鹽利用試驗,+ ,第四十六頁，共六十八頁。,四、酶類試驗(sh236。y224。n),第三節(jié) 細菌生化(shēnɡ hu224。)鑒定技術,原理：某些(mǒu xiē)細菌具有氧化酶（細胞色素氧化酶），能將二甲基對苯二胺或四甲基對苯二胺氧化生成紅色的醌類化合物。,方法：取潔凈濾紙條，粘取被檢細菌菌落，滴加氧化酶試劑1滴于菌落上。或將試劑直接滴加在被檢細菌的菌落上。陽性者立即出現紅色，繼而變?yōu)樯罴t色至深紫色。,結 果,氧化酶（細胞色素氧化酶）試驗,第四十七頁，共六十八頁。,四、酶類試驗(sh236。y224。n),第三節(jié) 細菌生化鑒定(ji224。nd236。ng)技術,原理：細菌產生的觸酶（過氧化氫酶）能催化過氧化氫放出(f224。nɡ chū)初生態(tài)氧，繼而形成氧分子出現氣泡。,方法： 取待檢細菌少許，置于潔凈的載玻片上，滴加3％H2O2試劑1～2滴，觀察結果。一分鐘內產生大量氣泡者為陽性，不產生氣泡者為陰性。,結 果,觸酶試驗,+ ,第四十八頁，共六十八頁。,四、酶類試驗(sh236。y224。n),第三節(jié) 細菌生化鑒定(ji224。nd236。ng)技術,原理：金黃色葡萄球菌能產生凝固酶，使血漿中的纖維蛋白(xiān w233。i d224。n b225。i)原轉變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白(xiān w233。i d224。n b225。i)。,方法：于3支試管中分別加入1:4稀釋的血漿0.5ml，1支管加入待檢菌肉湯培養(yǎng)物0.5ml,另兩支分別加陰陽性對照菌肉湯培養(yǎng)物0.5ml，35℃培養(yǎng)3～4h后觀察結果。,結 果,凝固酶試驗（試管法）,第四十九頁，共六十八頁。,四、酶類試驗(sh236。y224。n),第三節(jié) 細菌生化鑒定(ji224。nd236。ng)技術,原理：金黃色葡萄球菌能產生凝固(n237。ngg249。)酶，使血漿中的纖維蛋白原轉變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白。,方法：取未稀釋的兔血漿和生理鹽水各一滴分別置于載玻片的兩側，挑取金黃色葡萄球菌少許分別與它們混合，立即觀察結果。細菌在生理鹽水中無自凝，菌液呈均勻混濁狀態(tài)凝固酶試驗為陰性；菌液聚集成團塊或顆粒狀，則血漿凝固酶試驗為陽性。,結 果,凝固酶試驗（玻片法）,第五十頁，共六十八頁。,四、酶類試驗(sh236。y224。n),第三節(jié) 細菌(x236。jūn)生化鑒定技術,原理：某些細菌能還原培養(yǎng)基中的硝酸鹽為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與醋酸(c249。 suān)作用，生成亞硝酸，亞硝酸與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸，再與α萘胺結合，生成Nα萘胺偶氮苯磺酸(紅色化合物)。,方法：將被檢細菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)18～24小時，加入甲液（對氨基苯磺酸0.8g、5mol／L醋酸100ml）和乙液（α萘胺0.5g、5mol／L、醋酸100ml）等量混合液，觀察結果。立即出現紅色者為陽性。若加入試劑不出現紅色，需要檢查硝酸鹽是否被還原，可于培養(yǎng)管內加入少許鋅粉，如無色，說明亞硝酸鹽進一步分解，硝酸鹽還原試驗為陽性。若加鋅粉后出現紅色，說明鋅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，而待