20xx年醫(yī)學專題—第二章-生化制藥基本技術生化制藥技術(編輯修改稿)
2024-11-16 00:43 本頁面
【文章內容簡介】 濃縮、脫鹽、提純、除菌、除病毒和熱原。,第二十頁，共四十八頁。,（2）反滲透：以高分子透過性薄膜為分離介質，在超過溶液滲透壓力的情況下，使溶液中的溶劑透過薄膜，同時使溶質和不溶物阻截在膜前。這一過程類似于滲透,但方向相反，即溶劑從高濃度一側傳遞到濃度低的一側，故稱反滲透。 特點：能耗少，體積小，適應大規(guī)模生產。 （3）微孔濾膜：由高分子材料制成的薄膜過濾介質，可以過濾一般(yībān)介質不能截留的細菌和微粒。膜的孔徑在0.210 μm。 （4）超精密過濾：以聚乙烯醇為主體的中空多孔濾膜，分級性能在超濾膜與微孔濾膜之間。為0.01~0.2 μm。用于水的精制、循環(huán)水的凈化、除懸浮固體粒子以及糖液、酶液的精制。,第二十一頁，共四十八頁。,離子交換層析 采用不溶性高分子化合物作為離子交換劑，分離純化各種生化物質。 基本原理：離子(l237。zǐ)交換樹脂在水中能溶脹，溶脹后，其分子中的極性基團（活性基團），具有可擴散的離子(l237。zǐ)，能與溶液中的離子(l237。zǐ)起交換作用；非極性基團作為樹脂的骨架，使樹脂不溶于水并具有網狀結構，為離子(l237。zǐ)交換的進行及溶液和樹脂的分離創(chuàng)造了條件。離子(l237。zǐ)交換層析包括吸附、吸收、穿透、擴散、離子(l237。zǐ)交換、離子(l237。zǐ)親和力等物理化學過程。,第二十二頁，共四十八頁。,樹脂(sh249。zhī)種類和理化性能： （1）強酸性陽離子交換樹脂：功能團為磺酸基，pH一般沒有限制。 （2）弱酸性陽離子交換樹脂：功能團為羧基、酚基。在酸性溶液中不發(fā)生交換，pH愈大交換能力愈強。 （3）強堿性陰離子交換樹脂：功能團為三甲基季胺基團。pH沒有限制。 （4）弱酸性陰離子交換樹脂：功能團為伯胺基、仲胺基、叔胺基。 pH愈低交換能力愈大。,第二十三頁，共四十八頁。,影響交換速度的因素： （1）樹脂顆粒的大?。侯w粒小，表面積大，能促進內部和外部擴散。 （2）攪拌和流速：加快攪拌速度或加大液體流速，都能減少樹脂外液膜的厚度，從而使液相擴散速度增加。 （3）離子濃度：交換速度隨離子濃度的上升而增加，達到(d225。 d224。o)一定濃度后交換速度不在升高。 （4）離子的水化半徑：水化半徑小的易被吸附。 （5）樹脂酸堿性的強弱和溶液的pH：,第二十四頁，共四十八頁。,（6）交聯(lián)度大小：交聯(lián)度愈小，樹脂愈易膨脹，交換速度愈快。但交聯(lián)度小的樹脂選擇性較差。 （7）有機溶劑的影響：當有有機溶劑存在時，會降低樹脂對有機離子的選擇性，而容易吸附無機離子。 凝膠層析 指化合物隨流動相流經裝有凝膠的固定相的層析柱時，因其各種物質分子大小不同而被分離的技術。又稱凝膠過濾、凝膠滲透過濾、分子篩過濾、阻滯擴散層析、排阻層析。 優(yōu)點：設備簡單，操作方便，分離效果好，回收率高，分離條件緩和，不使活性物質失活變性(bi224。nx236。ng)，凝膠可重復使用，無需再生處理。,第二十五頁，共四十八頁。,缺點：分離速度慢。 廣泛用于分離氨基酸、多肽、蛋白質、酶及多糖等藥物。 幾種常用的凝膠： （1）葡聚糖凝膠：基本骨架是16糖苷鍵。由葡聚糖和甘油以醚橋形式交聯(lián)而成的網狀結構。最著名的商品為Sephadex葡聚糖凝膠，珠狀顆粒物，化學性質穩(wěn)定，不溶于水、弱酸、堿和鹽溶液。低溫時，在0.1mol/L 鹽酸中保持12h不改變性質；室溫時，在 0.01mol/L 鹽酸中放置半年也不改變；在0.25mol/L的 氫氧化鈉(qīnɡ yǎnɡ hu224。 n224。)中， 60℃ 兩個月沒有發(fā)改變。可在120℃ 加熱 30min 滅菌而不破壞，但高于 120℃ 即變黃。濕狀貯存易發(fā)霉，若長期不用，需加防腐劑。,第二十六頁，共四十八頁。,（2）聚丙烯酰胺凝膠：由碳碳骨架構成。完全為惰性。穩(wěn)定性比葡聚糖凝膠好，洗脫時不會有凝膠物質下來。 缺點：不耐酸。遇酸時酰胺鍵會水解為羧基，使凝膠帶有一定的離子交換基團(jī tu225。n)。 （3）瓊脂糖凝膠：天然凝膠，不是共價交聯(lián)，是以氫鍵交聯(lián)。空隙度以契紙?zhí)堑臐舛葋砀淖?，化學穩(wěn)定性不如葡聚糖凝膠。沒有干凝膠，必須在溶脹狀態(tài)保存，遇脫水劑、冷凍和一些有機溶劑即破壞，丙酮和乙醇對它無影響。在pH 4.59,溫度040 ℃ 穩(wěn)定。對硼酸有吸附，不能用硼酸緩沖液。他能分離及萬到幾千萬相對分子質量的物質，彌補了葡聚糖和聚丙烯酰胺凝膠的不足。 瑞典商品名Sepharose，美國稱生物凝膠—A（BioGelA）,英國稱Sagavac.,第二十七頁，共四十八頁。,(4)疏水性凝膠：常用的為聚甲基丙烯酸酯（Polymethacrylate）凝膠、聚苯乙烯凝膠（如Styrogel , BioBeadsS） 親和層析 生物活性物質都有親和作用，如酶與底物、激素與受體、核酸的互補鏈間，多糖與蛋白質復合體。親和層析是利用生物大分子的特異親和力而設計的層析技術。可逆結合的特異性物質稱為配基，與配基結合的層析介質稱為載體。 親和層析能從粗提液中，通過一次簡便處理(chǔlǐ)，便可得到高純度的活性物質，既可分離一些生物材料中含量極微的物質，又能分離一些性質十分相似的物質。,第二十八頁，共四十八頁。,優(yōu)點：設備要求不高，操作簡便，適用范圍廣，特異性強，分離速度快，效果好，條件溫和。 缺點：通用性較差，
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1