【文章內(nèi)容簡介】 中出現(xiàn)差錯(cuò)或被外源因子污染。（5）生產(chǎn)用菌、毒種種子批和細(xì)胞種子庫，至少制備雙份，分別貯存于兩個(gè)適宜貯存條件的專門地方，以防止因低溫冰箱停電或液氮罐內(nèi)液氮干涸造成生產(chǎn)用菌毒種和細(xì)胞等變異和死亡。（6）生物制品生產(chǎn)和檢定用的菌種、毒種建立種子批系統(tǒng)，是確保菌、毒種歷史清楚，來源可以追溯，使生產(chǎn)和檢定用的菌種、毒種工作種子批與主種子批和原始種子批在生物學(xué)特性和遺傳學(xué)特性上保持一致的重要措施。*2215 以人血、人血漿或動(dòng)物臟器、組織為原料生產(chǎn)的制品是否使用專用設(shè)備，是否與其他生物制品的生產(chǎn)嚴(yán)格分開。本項(xiàng)是對以人血、人血漿或動(dòng)物臟器、組織為原材料生產(chǎn)血液制品、細(xì)胞因子及生產(chǎn)藥品等的生產(chǎn)廠房和設(shè)備的要求。1． 由于人血漿有潛在的病毒污染危害，所以不能與其他生物制品共用相同的生產(chǎn)設(shè)備。眾所周知，臨床上廣泛使用的各種血液制品，諸如人學(xué)白蛋白、免疫球蛋白及各種凝血因子、人用血液組分制備的各種細(xì)胞因子等，都是治療和搶救危重病人的重要生物制品，保證其使用安全是首要問題。上述以人血、人血漿為原材料制備的血液制品、細(xì)胞因子都是采用大批量混合人血漿、血液組成成分來制備，而人血液可能被各種病原體所污染，特別是被經(jīng)血液傳播的相關(guān)病毒污染。國內(nèi)外大量檢測資料已確認(rèn)，人血或血液制品可能攜帶并傳播的病毒主要有：乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病病毒（HIV1和HIV2）、人類嗜淋巴細(xì)胞I和II型病毒（HTLV1+2）、丁型肝炎病毒（HDV）、甲型肝炎病毒（HAV）、人類細(xì)小病毒（HPV）以及梅素螺旋體、金氏蟲病、弓形體等病原體等，目前人們重點(diǎn)關(guān)注的主要是HIV（1+2）、HBV和HCV對人血或血液制品的污染，因?yàn)檫@三種病毒感染率高，危害特別嚴(yán)重。2． 人血漿蛋白和動(dòng)物蛋白屬于不用種屬免疫原，如果動(dòng)物蛋白混入人血漿制品，會(huì)造成嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。所以，也不能與其他生物制品共用生產(chǎn)設(shè)備。3． 為加強(qiáng)血液制品管理，預(yù)防和控制經(jīng)血液途徑傳播的疾病，1996年12月30日國務(wù)院頒布的《血液制品管理?xiàng)l例》規(guī)定。（1）國家實(shí)行采血漿站統(tǒng)一規(guī)劃、統(tǒng)一設(shè)置制度，未經(jīng)審核批準(zhǔn)任何單位和個(gè)人不能從事采血漿；（2）必須按國家制定標(biāo)準(zhǔn)，對供血漿者進(jìn)行健康檢查，根據(jù)國家制定的血漿采集技術(shù)操作標(biāo)準(zhǔn)和程序，采用機(jī)械采集血漿，并按單人份冰凍保存，不得混裝。（3）新建、改建或者擴(kuò)建的血液制品生產(chǎn)單位，須經(jīng)國務(wù)院衛(wèi)生行政主管部門進(jìn)行立項(xiàng)審查，依照《藥品管理法》規(guī)定審核批準(zhǔn)；（4）血液制品生產(chǎn)單位必須達(dá)到國家《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)審查合格，方可從事血液制品生產(chǎn)。（5）嚴(yán)禁血液制品生產(chǎn)單位出讓、出租、出借以及與他人共用《藥品生產(chǎn)企業(yè)許可證》和產(chǎn)品批準(zhǔn)文號；（6）血液制品生產(chǎn)單位不得向無《單采血漿可許證》的單采血漿站或者未與其簽訂質(zhì)量責(zé)任書的單采血漿站收集原料血漿；（7）在原漿投生產(chǎn)之前，必須使用有生產(chǎn)批準(zhǔn)文號并經(jīng)國家藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)逐批檢驗(yàn)合格的診斷試劑對每一人份血漿進(jìn)行全面復(fù)檢，復(fù)檢不合格的血漿不得投料生產(chǎn)；（8）血液制品的生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量，必須符合國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，血液制品出廠前必須經(jīng)過質(zhì)量檢定，不符合國家標(biāo)準(zhǔn)的嚴(yán)禁出廠。*2216 使用密封系統(tǒng)生物發(fā)酵罐生產(chǎn)生物制品可以在同一區(qū)域同時(shí)生產(chǎn)（如單克隆抗體和重組DNA制品）1．我國現(xiàn)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和國際上通行的《藥品生產(chǎn)檢查互相承認(rèn)公約（PIC）藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范指南》、歐共體《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》等均明確規(guī)定：使用生物發(fā)酵罐密封系統(tǒng)的一些制品可以在同一區(qū)域或者同時(shí)生產(chǎn)，如單克隆抗體和重組DNA產(chǎn)品。2．采用生物發(fā)酵罐這類密封系統(tǒng)生產(chǎn)的單克隆抗體和DNA重組技術(shù)設(shè)備的產(chǎn)品，從工程菌株或工程細(xì)胞接種入發(fā)酵罐，在生物反應(yīng)器（即發(fā)酵罐）內(nèi)發(fā)酵培養(yǎng)，直到培養(yǎng)過程完成后菌體收集或細(xì)胞收集，發(fā)酵產(chǎn)物通過管道進(jìn)入純化工序等，這一生產(chǎn)制備全過程都是在封閉系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行，正常情況下不會(huì)受到外環(huán)境干擾和污染，不會(huì)滲漏出來污染周圍環(huán)境。因此，可以允許一些產(chǎn)品在同一發(fā)酵車間內(nèi)生產(chǎn)或者同時(shí)在同一發(fā)酵車間的不同密封系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)。3．非密閉系統(tǒng)不得在同一區(qū)域同時(shí)生產(chǎn)。*2217 各種滅活疫苗（包括重組DNA產(chǎn)品）、類毒素及細(xì)胞提取物，在其滅活或消毒后可以與其他無菌制品交替使用同一灌裝間和灌裝、凍干設(shè)施。但在一種制品分裝后，必須進(jìn)行有效的清潔和消毒，清潔消毒效果是否定期驗(yàn)證。各種滅活疫苗、類毒素（脫毒處理后的毒素）及細(xì)胞提取物，均不含有致病性活細(xì)菌或活病毒所具有的致病因子，因此，只要對這些制品制備過程中進(jìn)行有效滅活或消毒，即可以與其他無菌制品交替使用公用的灌裝間、灌裝設(shè)施和凍干設(shè)施。但在一種制品分裝后，必須對使用過的灌封間、灌裝設(shè)備和凍干設(shè)備等進(jìn)行有效的清潔和消毒，其清潔、消毒效果喲阿定期進(jìn)行驗(yàn)證。*2218 操作有致病作用的微生物是否在專門的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，是否保持相對負(fù)壓。1．本項(xiàng)“操作有致病作用的微生物”，是指本《檢查指南》2204項(xiàng)第1款中所用的《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種寶藏管理辦法》中規(guī)定的第一類和第二類的細(xì)菌和病毒。2．對操作上述第一類或第二類有致病作用的活細(xì)菌或活病毒，須在專門區(qū)域 內(nèi)進(jìn)行，該操作區(qū)與相鄰區(qū)域要保持相對負(fù)壓。關(guān)于操作有致病作用微生物的操作區(qū)設(shè)計(jì)、布局、建造及該操作區(qū)空氣凈化及保持相對負(fù)壓的要求，參見2004項(xiàng)第2款。*2219 有菌（毒）操作區(qū)與無菌（毒）操作區(qū)是否有各自獨(dú)立的空氣凈化系統(tǒng)，來自病原體操作區(qū)的空氣是否循環(huán)使用。1．有菌（毒）操作區(qū)與無菌（毒）操作區(qū)，在本《檢查指南》2201項(xiàng)第2款中已論述，是指生產(chǎn)各種滅活疫苗時(shí)，生產(chǎn)過程的兩個(gè)階段：第一階段是采用從自然界分離的毒力強(qiáng)、抗原性好的天然強(qiáng)毒細(xì)菌菌株或病毒株，進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)制備，這一階段制備出的細(xì)菌原液或病毒原液，以及所有使用的培養(yǎng)設(shè)備和器材，有大量活的細(xì)菌或病毒，又稱之謂“活菌”或“活毒”，這些活培養(yǎng)物（生物體）具有致病性，必須在與相鄰區(qū)域保持相對負(fù)壓的有生物安全防護(hù)區(qū)域進(jìn)行生產(chǎn)操作。在第二階段，細(xì)菌原液或病毒原液收獲后，加入一定量甲醛或其他適宜滅火劑，在規(guī)定溫度和規(guī)定時(shí)間內(nèi)將活的細(xì)菌或活得病毒全部殺死，這時(shí)活菌體或活病毒體即變成無活菌或無活病毒了，又稱之謂“死菌”或“死毒”。2． 各種滅活疫苗生產(chǎn)的這來那個(gè)個(gè)階段，是緊密相連的過程，但又是必須嚴(yán)格分開的過程。為了適應(yīng)滅活疫苗的生產(chǎn)工藝流程的連續(xù)性，在設(shè)計(jì)和建造滅活疫苗生產(chǎn)車間時(shí)，必須將該滅活疫苗生產(chǎn)車間，分隔成有菌（毒）操作區(qū)與無菌（毒）操作區(qū)兩個(gè)獨(dú)立的部分，有各自獨(dú)立的空氣凈化系統(tǒng)。有菌（毒）區(qū)域的空氣凈化系統(tǒng)采用直排系統(tǒng)，不得采用部分回風(fēng)循環(huán)系統(tǒng)。詳見2204項(xiàng)第3款的要求。3． 血液制品原料（人血漿）可能被經(jīng)血液傳播的病毒和細(xì)菌污染，因此血漿破袋、合并血漿區(qū)與血漿蛋白分離區(qū)的生產(chǎn)設(shè)施、設(shè)備、用具應(yīng)嚴(yán)格分開。*2220 來自危險(xiǎn)度為二類以上病原體的空氣是否通過除菌過濾器排放，濾器的性能是否定期檢查。使用二類以上病原體強(qiáng)污染性材料進(jìn)行制品生產(chǎn)時(shí)，對其排出污物是否有有效的消毒設(shè)施。來自危險(xiǎn)度二類以上病原體，是指按《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》所規(guī)定的第一類和第二類所列的細(xì)菌或病毒。1． 在操作危險(xiǎn)屬二類以上病原體（包括細(xì)菌或病毒）的活生物體要在防護(hù)操作區(qū)域內(nèi)操作，其通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)為直排系統(tǒng)，不得采用部分回風(fēng)循環(huán)系統(tǒng)，該操作區(qū)通風(fēng)經(jīng)初、中、高三級過濾；操作區(qū)排風(fēng)必須經(jīng)過高效過濾或其他方法處理，以不低于12m/s的速度直接向空氣中排放；生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾得空氣可通過系統(tǒng)排風(fēng)管排至大氣中。2． 該生物安全防護(hù)操作區(qū)，應(yīng)設(shè)有高壓蒸汽菌鍋或化學(xué)消毒裝置來對廢棄物進(jìn)行消毒處理。如需要運(yùn)至生物安全防護(hù)操作區(qū)外進(jìn)行焚燒的污物和廢棄物，應(yīng)裝入密閉容器內(nèi)高壓消毒后運(yùn)至焚燒爐焚燒。*2221 用于加工處理活生物體的生物制品生產(chǎn)操作區(qū)和設(shè)備是否便于清潔和去除污染，能耐受熏蒸消毒。1．加工處理活生物體的生物制品生產(chǎn)操作區(qū)的地面、物體、天棚、應(yīng)光潔、不產(chǎn)生塵粒、易于清潔消毒。因?yàn)榻?jīng)常要進(jìn)行清潔消毒，地面、物體和天棚等應(yīng)采用能耐受消毒劑或熏蒸消毒的材料。2．用于加工處理活生物體的設(shè)備，如發(fā)酵罐、凍干機(jī)、離心杯等應(yīng)能原位消毒清潔。其他用于加工處理活生物體的玻璃器皿和不銹鋼用具等亦應(yīng)在操作區(qū)內(nèi)先經(jīng)過高壓消毒或化學(xué)消毒后才能清洗。3．歐洲共同體《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》對生物制品設(shè)備和生產(chǎn)區(qū)的清潔、消毒推薦使用熏蒸消毒法，因?yàn)樵谏a(chǎn)區(qū)有些地方用化學(xué)消毒方法不能進(jìn)行徹底清潔和消毒。WHO于1994年頒布的《生物制品生產(chǎn)企業(yè)GMP檢查指南》對生物制品生產(chǎn)廠房的設(shè)計(jì)亦要求能進(jìn)行薰蒸消毒。*2802 生物檢定、微生物限度檢查是否分室進(jìn)行。[解釋說明]生物制品不得含有雜菌（有專門規(guī)定者除外），滅活疫苗不得含有活的該菌或活的該病毒。分裝后的制品按規(guī)定要求進(jìn)行無菌試驗(yàn)，作為最終檢定。生物檢定：采用微生物、細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物來檢定或判定制品效價(jià)及安全性的方法稱為生物檢定法。微生物限度檢查：微生物限度檢查法系指檢測非規(guī)定滅菌制劑及其原、輔材料受微生物污染程度的一種檢查方法，包括雜菌量及控制菌的檢查。1． 生物制品無菌試驗(yàn)應(yīng)在專用100級潔凈室或萬級潔凈室中的100級潔凈工作臺進(jìn)行。非無菌試驗(yàn)的其他試驗(yàn)不得在此無菌試驗(yàn)室進(jìn)行。2． 對用于生產(chǎn)的主細(xì)胞庫、工作細(xì)胞庫、病毒種子批、對照細(xì)胞、培養(yǎng)液以及臨床治療用細(xì)胞進(jìn)行支原體檢查時(shí)（包括培養(yǎng)法或DNA染色法）應(yīng)在專用100級的潔凈操作室或萬級潔凈室中的100級潔凈工作臺進(jìn)行。3． 進(jìn)行生物制品的無菌試驗(yàn)和支原體檢測的專用潔凈室，不應(yīng)進(jìn)行無菌試驗(yàn)，培養(yǎng)基和支原體培養(yǎng)基的靈敏度檢測試驗(yàn)，如要做培養(yǎng)基靈敏度測驗(yàn)，必須在其他操作室進(jìn)行。4． 微生物限度檢查時(shí)，其被檢測樣品是非無菌制劑，檢測標(biāo)準(zhǔn)允許有限量的真菌或非致病的雜菌存在，因此，微生物限度檢查與生物制品無菌試驗(yàn)的目的和要求是截然不同的，可在100，000級潔凈室中的100級潔凈工作臺進(jìn)行。為確保制品無菌試驗(yàn)檢測結(jié)果準(zhǔn)確，不受外部環(huán)境的影響，生物制品無菌試驗(yàn)檢測潔凈室，必須要與微生物限度檢測室分開，不可混用。*3302 用于生物制品生產(chǎn)的動(dòng)物室、質(zhì)量檢定動(dòng)物室是否與制品生產(chǎn)區(qū)各自分開。1． 該項(xiàng)規(guī)定，在文字表達(dá)上下不夠準(zhǔn)確合理，易使人造成不必要的疑義和誤解。如現(xiàn)行的人用狂犬病疫苗、腎綜合征出血熱滅活疫苗，乙型腦炎減毒活疫苗，乙型腦炎滅活疫苗、森林腦炎滅活疫苗、猴腎脊髓灰質(zhì)炎活疫苗等，都是將疫苗生產(chǎn)用病毒株接種感染地鼠腎細(xì)胞或沙鼠腎細(xì)胞或猴腎細(xì)胞。這些地鼠、沙鼠和猴腎細(xì)胞均是原代細(xì)胞，只有從活得動(dòng)物體內(nèi)取出鮮活的腎臟，消化制備原代細(xì)胞才能用于疫苗生產(chǎn)，從解剖動(dòng)物取腎、消化制備細(xì)胞等是有關(guān)疫苗生產(chǎn)的不可分開的工藝步驟，只能在疫苗的生產(chǎn)車間內(nèi)進(jìn)行。因此，3002項(xiàng)宜改為“用于生物制品生產(chǎn)的動(dòng)物的繁殖飼養(yǎng)區(qū)、質(zhì)量檢定動(dòng)物室是否與制品生產(chǎn)區(qū)各自分開”。2． 用于生物制品生產(chǎn)的動(dòng)物繁殖飼養(yǎng)區(qū)，必須與做制品質(zhì)量檢查用動(dòng)物室（系指制品異常毒性試驗(yàn)、熱原試驗(yàn)以及效力試驗(yàn)動(dòng)物室）各自分開，更要與制品生產(chǎn)區(qū)分開。*3003 生物制品所使用動(dòng)物的飼養(yǎng)管理要求，是否符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理規(guī)定。國家科技部下設(shè)中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)，各省、直轄市、自治區(qū)的科技廳（局）設(shè)有省級試驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)或試驗(yàn)動(dòng)物管理中心，負(fù)責(zé)制定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測和試驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施評定標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)放實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級合格證書和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件證書。因此，GMP認(rèn)證檢查時(shí)，應(yīng)要求被檢查單位提供省級實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理部門核發(fā)的“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物登記合格證書”和“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件可許證書”。如被檢查單位所用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是外購的，應(yīng)要求被檢查單位提供與出售實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單位簽訂的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供貨合同及相應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并提供動(dòng)物供應(yīng)單位的“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級合格證書”（復(fù)印件）和“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件許可證書”（復(fù)印件）。解釋說明1． 生物制品生產(chǎn)及檢定所用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按其所攜帶的微生物可分為四個(gè)不同等級。（1）普通級動(dòng)物（一級動(dòng)物）：應(yīng)排除人畜共患病及動(dòng)物烈性傳染病病原體；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施為開放系統(tǒng)，要求通風(fēng)良好，保持清潔。（2）清潔級動(dòng)物（二級動(dòng)物）；除應(yīng)排除人畜共患病及動(dòng)物烈性傳染病原體外，還應(yīng)排除影響動(dòng)物健康的動(dòng)物傳染病及對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響大的疾病原體；清潔級動(dòng)物須在有相應(yīng)潔凈級別的亞屏障系統(tǒng)內(nèi)繁殖飼養(yǎng)。（3）SPD動(dòng)物（三級動(dòng)物）：除排除普通級、清潔級動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，還應(yīng)排除動(dòng)物隱性感染的所致干擾動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的病原體；SPD動(dòng)物須在萬級潔凈級別的屏障系統(tǒng)內(nèi)繁殖飼養(yǎng)。（4）無菌動(dòng)物（四級動(dòng)物）：無可檢定的一切微生物體，無菌動(dòng)物必須在規(guī)定潔凈級別的隔離系統(tǒng)內(nèi)繁殖飼養(yǎng)。（5）悉生動(dòng)物（四級動(dòng)物）：無菌動(dòng)物體內(nèi)植入已知微生物的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；悉生動(dòng)物必須如無菌動(dòng)物一樣在隔離系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。上述四個(gè)等級實(shí)驗(yàn)動(dòng)物評定標(biāo)準(zhǔn)，以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施要求，國家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理部門均已制定有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。2．《中國生物制品規(guī)程》要求有關(guān)預(yù)防及治療用制品生產(chǎn)及檢定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠、豚鼠、地鼠及沙鼠為清潔級動(dòng)物；雞胚為SPF雞胚。由于到目前為止，能繁殖和供應(yīng)清潔級以上小鼠、大白鼠和豚鼠的，國內(nèi)只有中檢所等少數(shù)幾家單位。要達(dá)到清潔級以上等級動(dòng)物，不是建造有潔凈級別的動(dòng)物飼養(yǎng)室就能達(dá)到的，其中還要有無特定病原體動(dòng)物種群的選育系統(tǒng)和建立對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病原菌、病毒、寄生蟲等的各種檢定和檢測方法，對動(dòng)物飼養(yǎng)人員、管理人員和檢測人員的系統(tǒng)培訓(xùn)，涉及范圍很多，投資成本較高，不是短時(shí)間內(nèi)就能實(shí)現(xiàn)的。再如日本、歐盟等國家和地區(qū)，到目前為止，對生產(chǎn)用胚數(shù)量巨大的流行性感冒疫苗和水痘疫苗也沒有完全采用SPF雞胚。綜上，國家食品藥品監(jiān)督管理局?jǐn)M在《中國生物制品規(guī)程》（2005年版）中考慮實(shí)施。三、設(shè)備[檢查要點(diǎn)]設(shè)備的設(shè)計(jì)、選型和安裝應(yīng)有利于避免交叉污染、避免差錯(cuò)并便于清潔及日常維護(hù)。3103 生物制品生產(chǎn)使用的管道系統(tǒng)、閥門和通氣過濾是否便于清潔和滅菌，封閉性容器（如發(fā)酵罐）是否用蒸汽滅菌。1．藥品生產(chǎn)檢查淮南國承認(rèn)公約（PIC）1992年頒布的《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范指南》“廠房和設(shè)備”中要求：生物制品生產(chǎn)管路系統(tǒng)、閥門和通風(fēng)口過濾器的設(shè)計(jì)都應(yīng)便于清潔和滅菌。應(yīng)鼓勵(lì)使用“原位清潔”和“原位滅菌”系統(tǒng)。發(fā)酵罐及其閥門應(yīng)采用蒸汽