【文章內(nèi)容簡介】 中出現(xiàn)差錯或被外源因子污染。（5）生產(chǎn)用菌、毒種種子批和細胞種子庫，至少制備雙份，分別貯存于兩個適宜貯存條件的專門地方，以防止因低溫冰箱停電或液氮罐內(nèi)液氮干涸造成生產(chǎn)用菌毒種和細胞等變異和死亡。（6）生物制品生產(chǎn)和檢定用的菌種、毒種建立種子批系統(tǒng)，是確保菌、毒種歷史清楚，來源可以追溯，使生產(chǎn)和檢定用的菌種、毒種工作種子批與主種子批和原始種子批在生物學特性和遺傳學特性上保持一致的重要措施。*2215 以人血、人血漿或動物臟器、組織為原料生產(chǎn)的制品是否使用專用設(shè)備，是否與其他生物制品的生產(chǎn)嚴格分開。本項是對以人血、人血漿或動物臟器、組織為原材料生產(chǎn)血液制品、細胞因子及生產(chǎn)藥品等的生產(chǎn)廠房和設(shè)備的要求。1． 由于人血漿有潛在的病毒污染危害，所以不能與其他生物制品共用相同的生產(chǎn)設(shè)備。眾所周知，臨床上廣泛使用的各種血液制品，諸如人學白蛋白、免疫球蛋白及各種凝血因子、人用血液組分制備的各種細胞因子等，都是治療和搶救危重病人的重要生物制品，保證其使用安全是首要問題。上述以人血、人血漿為原材料制備的血液制品、細胞因子都是采用大批量混合人血漿、血液組成成分來制備，而人血液可能被各種病原體所污染，特別是被經(jīng)血液傳播的相關(guān)病毒污染。國內(nèi)外大量檢測資料已確認，人血或血液制品可能攜帶并傳播的病毒主要有：乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病病毒（HIV1和HIV2）、人類嗜淋巴細胞I和II型病毒（HTLV1+2）、丁型肝炎病毒（HDV）、甲型肝炎病毒（HAV）、人類細小病毒（HPV）以及梅素螺旋體、金氏蟲病、弓形體等病原體等，目前人們重點關(guān)注的主要是HIV（1+2）、HBV和HCV對人血或血液制品的污染，因為這三種病毒感染率高，危害特別嚴重。2． 人血漿蛋白和動物蛋白屬于不用種屬免疫原，如果動物蛋白混入人血漿制品，會造成嚴重的過敏反應(yīng)。所以，也不能與其他生物制品共用生產(chǎn)設(shè)備。3． 為加強血液制品管理，預(yù)防和控制經(jīng)血液途徑傳播的疾病，1996年12月30日國務(wù)院頒布的《血液制品管理條例》規(guī)定。（1）國家實行采血漿站統(tǒng)一規(guī)劃、統(tǒng)一設(shè)置制度，未經(jīng)審核批準任何單位和個人不能從事采血漿；（2）必須按國家制定標準，對供血漿者進行健康檢查，根據(jù)國家制定的血漿采集技術(shù)操作標準和程序，采用機械采集血漿，并按單人份冰凍保存，不得混裝。（3）新建、改建或者擴建的血液制品生產(chǎn)單位，須經(jīng)國務(wù)院衛(wèi)生行政主管部門進行立項審查，依照《藥品管理法》規(guī)定審核批準；（4）血液制品生產(chǎn)單位必須達到國家《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》規(guī)定的標準，經(jīng)審查合格，方可從事血液制品生產(chǎn)。（5）嚴禁血液制品生產(chǎn)單位出讓、出租、出借以及與他人共用《藥品生產(chǎn)企業(yè)許可證》和產(chǎn)品批準文號；（6）血液制品生產(chǎn)單位不得向無《單采血漿可許證》的單采血漿站或者未與其簽訂質(zhì)量責任書的單采血漿站收集原料血漿；（7）在原漿投生產(chǎn)之前，必須使用有生產(chǎn)批準文號并經(jīng)國家藥品檢驗機構(gòu)逐批檢驗合格的診斷試劑對每一人份血漿進行全面復(fù)檢，復(fù)檢不合格的血漿不得投料生產(chǎn)；（8）血液制品的生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量，必須符合國家規(guī)定的標準，血液制品出廠前必須經(jīng)過質(zhì)量檢定，不符合國家標準的嚴禁出廠。*2216 使用密封系統(tǒng)生物發(fā)酵罐生產(chǎn)生物制品可以在同一區(qū)域同時生產(chǎn)（如單克隆抗體和重組DNA制品）1．我國現(xiàn)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和國際上通行的《藥品生產(chǎn)檢查互相承認公約（PIC）藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范指南》、歐共體《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》等均明確規(guī)定：使用生物發(fā)酵罐密封系統(tǒng)的一些制品可以在同一區(qū)域或者同時生產(chǎn)，如單克隆抗體和重組DNA產(chǎn)品。2．采用生物發(fā)酵罐這類密封系統(tǒng)生產(chǎn)的單克隆抗體和DNA重組技術(shù)設(shè)備的產(chǎn)品，從工程菌株或工程細胞接種入發(fā)酵罐，在生物反應(yīng)器（即發(fā)酵罐）內(nèi)發(fā)酵培養(yǎng)，直到培養(yǎng)過程完成后菌體收集或細胞收集，發(fā)酵產(chǎn)物通過管道進入純化工序等，這一生產(chǎn)制備全過程都是在封閉系統(tǒng)內(nèi)進行，正常情況下不會受到外環(huán)境干擾和污染，不會滲漏出來污染周圍環(huán)境。因此，可以允許一些產(chǎn)品在同一發(fā)酵車間內(nèi)生產(chǎn)或者同時在同一發(fā)酵車間的不同密封系統(tǒng)內(nèi)進行生產(chǎn)。3．非密閉系統(tǒng)不得在同一區(qū)域同時生產(chǎn)。*2217 各種滅活疫苗（包括重組DNA產(chǎn)品）、類毒素及細胞提取物，在其滅活或消毒后可以與其他無菌制品交替使用同一灌裝間和灌裝、凍干設(shè)施。但在一種制品分裝后，必須進行有效的清潔和消毒，清潔消毒效果是否定期驗證。各種滅活疫苗、類毒素（脫毒處理后的毒素）及細胞提取物，均不含有致病性活細菌或活病毒所具有的致病因子，因此，只要對這些制品制備過程中進行有效滅活或消毒，即可以與其他無菌制品交替使用公用的灌裝間、灌裝設(shè)施和凍干設(shè)施。但在一種制品分裝后，必須對使用過的灌封間、灌裝設(shè)備和凍干設(shè)備等進行有效的清潔和消毒，其清潔、消毒效果喲阿定期進行驗證。*2218 操作有致病作用的微生物是否在專門的區(qū)域內(nèi)進行，是否保持相對負壓。1．本項“操作有致病作用的微生物”，是指本《檢查指南》2204項第1款中所用的《中國醫(yī)學微生物菌種寶藏管理辦法》中規(guī)定的第一類和第二類的細菌和病毒。2．對操作上述第一類或第二類有致病作用的活細菌或活病毒，須在專門區(qū)域 內(nèi)進行，該操作區(qū)與相鄰區(qū)域要保持相對負壓。關(guān)于操作有致病作用微生物的操作區(qū)設(shè)計、布局、建造及該操作區(qū)空氣凈化及保持相對負壓的要求，參見2004項第2款。*2219 有菌（毒）操作區(qū)與無菌（毒）操作區(qū)是否有各自獨立的空氣凈化系統(tǒng)，來自病原體操作區(qū)的空氣是否循環(huán)使用。1．有菌（毒）操作區(qū)與無菌（毒）操作區(qū)，在本《檢查指南》2201項第2款中已論述，是指生產(chǎn)各種滅活疫苗時，生產(chǎn)過程的兩個階段：第一階段是采用從自然界分離的毒力強、抗原性好的天然強毒細菌菌株或病毒株，進行大規(guī)模培養(yǎng)制備，這一階段制備出的細菌原液或病毒原液，以及所有使用的培養(yǎng)設(shè)備和器材，有大量活的細菌或病毒，又稱之謂“活菌”或“活毒”，這些活培養(yǎng)物（生物體）具有致病性，必須在與相鄰區(qū)域保持相對負壓的有生物安全防護區(qū)域進行生產(chǎn)操作。在第二階段，細菌原液或病毒原液收獲后，加入一定量甲醛或其他適宜滅火劑，在規(guī)定溫度和規(guī)定時間內(nèi)將活的細菌或活得病毒全部殺死，這時活菌體或活病毒體即變成無活菌或無活病毒了，又稱之謂“死菌”或“死毒”。2． 各種滅活疫苗生產(chǎn)的這來那個個階段，是緊密相連的過程，但又是必須嚴格分開的過程。為了適應(yīng)滅活疫苗的生產(chǎn)工藝流程的連續(xù)性，在設(shè)計和建造滅活疫苗生產(chǎn)車間時，必須將該滅活疫苗生產(chǎn)車間，分隔成有菌（毒）操作區(qū)與無菌（毒）操作區(qū)兩個獨立的部分，有各自獨立的空氣凈化系統(tǒng)。有菌（毒）區(qū)域的空氣凈化系統(tǒng)采用直排系統(tǒng)，不得采用部分回風循環(huán)系統(tǒng)。詳見2204項第3款的要求。3． 血液制品原料（人血漿）可能被經(jīng)血液傳播的病毒和細菌污染，因此血漿破袋、合并血漿區(qū)與血漿蛋白分離區(qū)的生產(chǎn)設(shè)施、設(shè)備、用具應(yīng)嚴格分開。*2220 來自危險度為二類以上病原體的空氣是否通過除菌過濾器排放，濾器的性能是否定期檢查。使用二類以上病原體強污染性材料進行制品生產(chǎn)時，對其排出污物是否有有效的消毒設(shè)施。來自危險度二類以上病原體，是指按《中國醫(yī)學微生物菌種保藏管理辦法》所規(guī)定的第一類和第二類所列的細菌或病毒。1． 在操作危險屬二類以上病原體（包括細菌或病毒）的活生物體要在防護操作區(qū)域內(nèi)操作，其通風空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)為直排系統(tǒng)，不得采用部分回風循環(huán)系統(tǒng)，該操作區(qū)通風經(jīng)初、中、高三級過濾；操作區(qū)排風必須經(jīng)過高效過濾或其他方法處理，以不低于12m/s的速度直接向空氣中排放；生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾得空氣可通過系統(tǒng)排風管排至大氣中。2． 該生物安全防護操作區(qū)，應(yīng)設(shè)有高壓蒸汽菌鍋或化學消毒裝置來對廢棄物進行消毒處理。如需要運至生物安全防護操作區(qū)外進行焚燒的污物和廢棄物，應(yīng)裝入密閉容器內(nèi)高壓消毒后運至焚燒爐焚燒。*2221 用于加工處理活生物體的生物制品生產(chǎn)操作區(qū)和設(shè)備是否便于清潔和去除污染，能耐受熏蒸消毒。1．加工處理活生物體的生物制品生產(chǎn)操作區(qū)的地面、物體、天棚、應(yīng)光潔、不產(chǎn)生塵粒、易于清潔消毒。因為經(jīng)常要進行清潔消毒，地面、物體和天棚等應(yīng)采用能耐受消毒劑或熏蒸消毒的材料。2．用于加工處理活生物體的設(shè)備，如發(fā)酵罐、凍干機、離心杯等應(yīng)能原位消毒清潔。其他用于加工處理活生物體的玻璃器皿和不銹鋼用具等亦應(yīng)在操作區(qū)內(nèi)先經(jīng)過高壓消毒或化學消毒后才能清洗。3．歐洲共同體《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》對生物制品設(shè)備和生產(chǎn)區(qū)的清潔、消毒推薦使用熏蒸消毒法，因為在生產(chǎn)區(qū)有些地方用化學消毒方法不能進行徹底清潔和消毒。WHO于1994年頒布的《生物制品生產(chǎn)企業(yè)GMP檢查指南》對生物制品生產(chǎn)廠房的設(shè)計亦要求能進行薰蒸消毒。*2802 生物檢定、微生物限度檢查是否分室進行。[解釋說明]生物制品不得含有雜菌（有專門規(guī)定者除外），滅活疫苗不得含有活的該菌或活的該病毒。分裝后的制品按規(guī)定要求進行無菌試驗，作為最終檢定。生物檢定：采用微生物、細胞或?qū)嶒瀯游飦頇z定或判定制品效價及安全性的方法稱為生物檢定法。微生物限度檢查：微生物限度檢查法系指檢測非規(guī)定滅菌制劑及其原、輔材料受微生物污染程度的一種檢查方法，包括雜菌量及控制菌的檢查。1． 生物制品無菌試驗應(yīng)在專用100級潔凈室或萬級潔凈室中的100級潔凈工作臺進行。非無菌試驗的其他試驗不得在此無菌試驗室進行。2． 對用于生產(chǎn)的主細胞庫、工作細胞庫、病毒種子批、對照細胞、培養(yǎng)液以及臨床治療用細胞進行支原體檢查時（包括培養(yǎng)法或DNA染色法）應(yīng)在專用100級的潔凈操作室或萬級潔凈室中的100級潔凈工作臺進行。3． 進行生物制品的無菌試驗和支原體檢測的專用潔凈室，不應(yīng)進行無菌試驗，培養(yǎng)基和支原體培養(yǎng)基的靈敏度檢測試驗，如要做培養(yǎng)基靈敏度測驗，必須在其他操作室進行。4． 微生物限度檢查時，其被檢測樣品是非無菌制劑，檢測標準允許有限量的真菌或非致病的雜菌存在，因此，微生物限度檢查與生物制品無菌試驗的目的和要求是截然不同的，可在100，000級潔凈室中的100級潔凈工作臺進行。為確保制品無菌試驗檢測結(jié)果準確，不受外部環(huán)境的影響，生物制品無菌試驗檢測潔凈室，必須要與微生物限度檢測室分開，不可混用。*3302 用于生物制品生產(chǎn)的動物室、質(zhì)量檢定動物室是否與制品生產(chǎn)區(qū)各自分開。1． 該項規(guī)定，在文字表達上下不夠準確合理，易使人造成不必要的疑義和誤解。如現(xiàn)行的人用狂犬病疫苗、腎綜合征出血熱滅活疫苗，乙型腦炎減毒活疫苗，乙型腦炎滅活疫苗、森林腦炎滅活疫苗、猴腎脊髓灰質(zhì)炎活疫苗等，都是將疫苗生產(chǎn)用病毒株接種感染地鼠腎細胞或沙鼠腎細胞或猴腎細胞。這些地鼠、沙鼠和猴腎細胞均是原代細胞，只有從活得動物體內(nèi)取出鮮活的腎臟，消化制備原代細胞才能用于疫苗生產(chǎn)，從解剖動物取腎、消化制備細胞等是有關(guān)疫苗生產(chǎn)的不可分開的工藝步驟，只能在疫苗的生產(chǎn)車間內(nèi)進行。因此，3002項宜改為“用于生物制品生產(chǎn)的動物的繁殖飼養(yǎng)區(qū)、質(zhì)量檢定動物室是否與制品生產(chǎn)區(qū)各自分開”。2． 用于生物制品生產(chǎn)的動物繁殖飼養(yǎng)區(qū)，必須與做制品質(zhì)量檢查用動物室（系指制品異常毒性試驗、熱原試驗以及效力試驗動物室）各自分開，更要與制品生產(chǎn)區(qū)分開。*3003 生物制品所使用動物的飼養(yǎng)管理要求，是否符合實驗動物管理規(guī)定。國家科技部下設(shè)中國實驗動物管理委員會，各省、直轄市、自治區(qū)的科技廳（局）設(shè)有省級試驗動物管理委員會或試驗動物管理中心，負責制定實驗動物檢測和試驗動物設(shè)施評定標準，發(fā)放實驗動物等級合格證書和實驗動物飼養(yǎng)條件證書。因此，GMP認證檢查時，應(yīng)要求被檢查單位提供省級實驗動物管理部門核發(fā)的“實驗動物登記合格證書”和“實驗動物飼養(yǎng)條件可許證書”。如被檢查單位所用的實驗動物是外購的，應(yīng)要求被檢查單位提供與出售實驗動物單位簽訂的實驗動物供貨合同及相應(yīng)實驗動物質(zhì)量標準，并提供動物供應(yīng)單位的“實驗動物等級合格證書”（復(fù)印件）和“實驗動物飼養(yǎng)條件許可證書”（復(fù)印件）。解釋說明1． 生物制品生產(chǎn)及檢定所用實驗動物按其所攜帶的微生物可分為四個不同等級。（1）普通級動物（一級動物）：應(yīng)排除人畜共患病及動物烈性傳染病病原體；實驗動物設(shè)施為開放系統(tǒng)，要求通風良好，保持清潔。（2）清潔級動物（二級動物）；除應(yīng)排除人畜共患病及動物烈性傳染病原體外，還應(yīng)排除影響動物健康的動物傳染病及對動物實驗結(jié)果影響大的疾病原體；清潔級動物須在有相應(yīng)潔凈級別的亞屏障系統(tǒng)內(nèi)繁殖飼養(yǎng)。（3）SPD動物（三級動物）：除排除普通級、清潔級動物應(yīng)排除的病原體外，還應(yīng)排除動物隱性感染的所致干擾動物實驗結(jié)果的病原體；SPD動物須在萬級潔凈級別的屏障系統(tǒng)內(nèi)繁殖飼養(yǎng)。（4）無菌動物（四級動物）：無可檢定的一切微生物體，無菌動物必須在規(guī)定潔凈級別的隔離系統(tǒng)內(nèi)繁殖飼養(yǎng)。（5）悉生動物（四級動物）：無菌動物體內(nèi)植入已知微生物的實驗動物；悉生動物必須如無菌動物一樣在隔離系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。上述四個等級實驗動物評定標準，以及實驗動物飼養(yǎng)設(shè)施要求，國家實驗動物管理部門均已制定有相關(guān)標準。2．《中國生物制品規(guī)程》要求有關(guān)預(yù)防及治療用制品生產(chǎn)及檢定實驗動物小鼠、豚鼠、地鼠及沙鼠為清潔級動物；雞胚為SPF雞胚。由于到目前為止，能繁殖和供應(yīng)清潔級以上小鼠、大白鼠和豚鼠的，國內(nèi)只有中檢所等少數(shù)幾家單位。要達到清潔級以上等級動物，不是建造有潔凈級別的動物飼養(yǎng)室就能達到的，其中還要有無特定病原體動物種群的選育系統(tǒng)和建立對實驗動物病原菌、病毒、寄生蟲等的各種檢定和檢測方法，對動物飼養(yǎng)人員、管理人員和檢測人員的系統(tǒng)培訓，涉及范圍很多，投資成本較高，不是短時間內(nèi)就能實現(xiàn)的。再如日本、歐盟等國家和地區(qū)，到目前為止，對生產(chǎn)用胚數(shù)量巨大的流行性感冒疫苗和水痘疫苗也沒有完全采用SPF雞胚。綜上，國家食品藥品監(jiān)督管理局擬在《中國生物制品規(guī)程》（2005年版）中考慮實施。三、設(shè)備[檢查要點]設(shè)備的設(shè)計、選型和安裝應(yīng)有利于避免交叉污染、避免差錯并便于清潔及日常維護。3103 生物制品生產(chǎn)使用的管道系統(tǒng)、閥門和通氣過濾是否便于清潔和滅菌，封閉性容器（如發(fā)酵罐）是否用蒸汽滅菌。1．藥品生產(chǎn)檢查淮南國承認公約（PIC）1992年頒布的《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范指南》“廠房和設(shè)備”中要求：生物制品生產(chǎn)管路系統(tǒng)、閥門和通風口過濾器的設(shè)計都應(yīng)便于清潔和滅菌。應(yīng)鼓勵使用“原位清潔”和“原位滅菌”系統(tǒng)。發(fā)酵罐及其閥門應(yīng)采用蒸汽