20xx年醫(yī)學(xué)專題—參與dna復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)(編輯修改稿)
2024-11-04 07:10 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 加到核心酶上使其二聚化，進(jìn)一步產(chǎn)生pol III※。 γ復(fù)合體參加到pol Ⅲ※，進(jìn)一步形成(x237。ngch233。ng) pol Ⅲ′復(fù)合體。 γ復(fù)合體是由γ，δ，δ′，χ和ψ亞基組成，其作用是固定β亞基這個(gè)“夾子〞的支架。 亞基β：形成夾鉗，保持催化核心和模板鏈的結(jié)合,第二十四頁(yè)，共五十二頁(yè)。,▼聚合酶Ⅲ的活性 聚合活性： DNA復(fù)制時(shí)聚合酶 Ⅲ 全酶十分重要，它可以在DNA模板上的引物的3′OH上以每分鐘約50 000核苷酸的速率逐個(gè)延伸新生的DNA。 3′→5′和5′→3′的外切酶活性： pol Ⅲ的5′→3′外切酶活性與polⅠ的不同，pol Ⅲ的5′→3′外切酶活性只對(duì) 單鏈 DNA有作用(zu242。y242。ng)，因此不能用于缺口翻譯。 DNA聚合酶Ⅲ的作用范圍如圖714所示。,第二十五頁(yè)，共五十二頁(yè)。,第二十六頁(yè)，共五十二頁(yè)。,E. Coli中的DNA聚合酶,第二十七頁(yè)，共五十二頁(yè)。,(4) 真核生物中的DNA聚合酶 所有真核生物中的聚合酶的性質(zhì)根本上同大腸桿菌中的聚合酶相似，它的活性有賴于模板，帶3′OH的引物，四種脫氧核糖核苷磷酸。 目前發(fā)現(xiàn)的真核生物DNA聚合酶有α β γ δ ε 。 DNA聚合酶α： 在迅速增殖的細(xì)胞(x236。bāo)中活力較高。酶分子量在165,000一175,000U之間。最適宜的底物是帶缺口的雙鏈DNA，但是帶引物的變性DNA也是很好的底物。是真核生物的復(fù)制酶。 它同大腸桿菌DNA聚合酶最大不同之處在于不具外切酶活性。,第二十八頁(yè)，共五十二頁(yè)。,DNA聚合酶β(損傷修復(fù))：為分子量較小(43,000U)的聚合酶。在整個(gè)細(xì)胞周期中它的活力沒(méi)有變化，它利用Dnase I 處理(chǔlǐ)過(guò)的天然DNA作模板，對(duì)變性DNA幾乎沒(méi)有活性，不具外切酶的活性。 DNA聚合酶γ〔線粒體〕：是一個(gè)大分子酶，在細(xì)胞內(nèi)含量很低，因此不容易純化。這個(gè)酶可以使用帶缺口的DNA作底物，但以多聚(A)、寡聚(dT)810作為底物，酶活力更高。 DNA聚合酶γ負(fù)責(zé)線粒體DNA的復(fù)制。 DNA聚合酶α和DNA聚合酶δ〔主要復(fù)制酶〕: 是真核生物的復(fù)制酶，主要根據(jù)是聚合酶δ的活性隨細(xì)胞周期而變化。 DNA聚合酶ε：功能不詳。,第二十九頁(yè)，共五十二頁(yè)。,2 DNA連接酶 DNA Ligase DNA連接酶催化一個(gè)DNA鏈的5′磷酸根與另一DNA鏈的3′羥基形成磷酸二酯鍵。 但兩個(gè)鏈都必須與同一另外的鏈互補(bǔ)結(jié)合，而且兩鏈必須相鄰，即只能(zhī n233。nɡ)連接一個(gè)切口(nick)而不能連接一個(gè)豁口(gap)(喪失核苷酸)，如圖715所示。 例子：T4誘導(dǎo)的連接酶不僅能在模板上連接DNA和DNA之間的切口，也能連接RNA和RNA之間的切口，不僅能連接DNA中的單鏈切口或雙鏈的粘性末端，而且能連接平頭雙鏈DNA 。大腸桿菌連接酶那么不行。,第三十頁(yè)，共五十二頁(yè)。,第三十一頁(yè)，共五十二頁(yè)。,3 與解鏈有關(guān)的酶和蛋白質(zhì) DNA是雙螺旋，在復(fù)制中雙螺旋要解開(kāi)，雙螺旋的解開(kāi)使得復(fù)制叉前面產(chǎn)生正超螺旋，如果這些應(yīng)力不以某種方式釋放將阻礙復(fù)制叉前進(jìn)。 現(xiàn)在已找到一些酶和蛋白質(zhì)，它們或者能使DNA雙鏈變得易于解開(kāi)，或者可以使超螺旋分子松弛，以下(yǐxi224。)介紹一些這類(lèi)蛋白質(zhì)。,第三十二頁(yè)，共五十二頁(yè)。,(1) 單鏈結(jié)合(ji233。h233。)蛋白 (SSB蛋白) SSB蛋白：是缺乏酶活性的復(fù)制輔助蛋白，可以在遠(yuǎn)低于Tm的溫度下使雙鏈DNA拆開(kāi)，并牢牢地結(jié)合在單鏈D
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