20xx年醫(yī)學(xué)專題—+參與dna復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)-預(yù)覽頁
【正文】 聚合酶的分類(fēn l232。)生物的聚合酶,第九頁，共五十二頁。ngx236。n du224。n)段/Klenow 片段 〔76KD〕,604個(gè)氨基酸,DNA聚合酶活性 ?? ? 5? 核酸外切酶活性,N 端,C 端,DNApol Ⅰ,第十一頁，共五十二頁。每個(gè)酶分子每分鐘添加1 000個(gè)單核苷酸。i qiē)酶活性： 沒有脫氧核苷三磷酸底物時(shí)， DNA聚合酶 I 能從3′OH開始以3′→5′方向水解DNA，產(chǎn)生5ˊ單核苷酸。,第十五頁，共五十二頁。,第十六頁，共五十二頁。)作用可以進(jìn)行切口翻譯(nicktranslation)，用來制造放射性探針。,339。,④ 內(nèi)切酶活性： DNA聚合酶 I 也具有5ˊ→3ˊ 內(nèi)切酶活性，如圖713所示。ng)DNA聚合酶 I 在大腸桿菌復(fù)制中不是主要的合成酶，而是在除去RNA引物和損傷修復(fù)中起重要作用。)的片段,內(nèi)切酶活性,第二十一頁，共五十二頁。 ① 從5′→3′方向合成DNA ② 具有3ˊ→5ˊ外切酶活性，但沒有5ˊ→3ˊ外切酶活性。 DNA多聚酶Ⅲ相當(dāng)復(fù)雜(f249。→339。 α亞基具有(j249。,τ亞基加到核心酶上使其二聚化，進(jìn)一步產(chǎn)生pol III※。 γ復(fù)合體是由γ，δ，δ′，χ和ψ亞基組成，其作用是固定β亞基這個(gè)“夾子〞的支架。y242。,第二十六頁，共五十二頁。 DNA聚合酶α： 在迅速增殖的細(xì)胞(x236。是真核生物的復(fù)制酶。在整個(gè)細(xì)胞周期中它的活力沒有變化，它利用Dnase I 處理(chǔlǐ)過的天然DNA作模板，對(duì)變性DNA幾乎沒有活性，不具外切酶的活性。 DNA聚合酶α和DNA聚合酶δ〔主要復(fù)制酶〕: 是真核生物的復(fù)制酶，主要根據(jù)是聚合酶δ的活性隨細(xì)胞周期而變化。 但兩個(gè)鏈都必須與同一另外的鏈互補(bǔ)結(jié)合，而且兩鏈必須相鄰，即只能(zhī n233。,第三十頁，共五十二頁。)介紹一些這類蛋白質(zhì)。)蛋白 (SSB蛋白) SSB蛋白：是缺乏酶活性的復(fù)制輔助蛋白，可以在遠(yuǎn)低于Tm的溫度下使雙鏈DNA拆開，并牢牢地結(jié)合在單鏈DNA上，穩(wěn)定單鏈區(qū)域的蛋白質(zhì)。,(2) 解鏈酶〔DNA解旋酶；DNA helicases〕 解鏈酶(解螺旋酶)：是一類能通過水解ATP獲得能量來解開雙鏈DNA的酶稱為DNA解鏈酶。,第三十五頁，共五十二頁。 根據(jù)酶作用的機(jī)理及其介導(dǎo)一條(yī ti225。n li232。 Ⅱ型拓?fù)洚悩?gòu)酶的共同特點(diǎn)是： ①同時(shí)切斷、縫合DNA的兩條鏈。 ch225。 ③完整的全酶是一分子量97 kDa的蛋白。 ②不需要能量輔助因子。,Structure of the Topo I /contact with DNA,第四十一頁，共五十二頁。,拓?fù)洚悩?gòu)酶 I (E. coli)催化負(fù)超螺旋DNA的松弛(sōnɡ ch237。,第四十三頁，共五十二頁。y242。)：TopoⅡ廣泛存在于各種生物中，它是完成復(fù)制所必需的一種酶，可使完成復(fù)制后的兩個(gè)子代環(huán)狀雙鏈DNA互相分開。 ②需要能量輔助因子 [如：ATP NAD(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)]。,拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ可以在水解ATP的同時(shí)使松弛狀態(tài)環(huán)狀DNA轉(zhuǎn)變?yōu)樨?fù)超螺旋DNA，其反響機(jī)制不同于拓?fù)洚悩?gòu)酶I，每次引起的超螺旋數(shù)變化為 2 (見圖718)。,第四十八頁，共五十二頁。,Topo II Reactions,26,①同時(shí)切斷(qiē du224。 z236。,內(nèi)容(n232?！?只能在5ˊP末端一個(gè)接一個(gè)地切除核苷酸。酶分子量在165,000一175,000U
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1