20xx年醫(yī)學(xué)專題—+參與dna復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)-文庫(kù)吧
2024-11-04 07:10 本頁(yè)面
【正文】 苷酸不一定每次都正確，錯(cuò)誤的時(shí)機(jī)不少，有時(shí)甚至加上一個(gè)不與模板配對(duì)的核苷酸，當(dāng)3ˊOH末端的堿基不與模板配對(duì)時(shí)聚合酶就無(wú)聚合活性，此時(shí)它具有的3ˊ→5ˊ外切酶活性可以切除這個(gè)不配對(duì)的核苷酸，這一堿基切除后，外切核酸酶活性終止，聚合酶活性恢復(fù)，如圖710所示。所以聚合酶的3ˊ→5ˊ外切酶活性也叫修補(bǔ)活性。,第十四頁(yè)，共五十二頁(yè)。,第十五頁(yè)，共五十二頁(yè)。,③ 5′→3′外切(w224。i qiē)酶活性： DNA聚合酶I具有5′→3′外切酶活性。 如圖711，其特點(diǎn)是： ▲ 只能在5ˊP末端一個(gè)接一個(gè)地切除核苷酸； ▲ 能連續(xù)地切除多個(gè)核苷酸； ▲ 只切除配對(duì)的5ˊP末端核苷酸，不切除不配對(duì)的單鏈5ˊP末端核苷酸； ▲ 既能切除脫氧核苷酸也能切除核苷酸； ▲ 對(duì)只具有5ˊP末端的切口也有活性〔由于在DNA復(fù)制過(guò)程中一般情況下只在RNA引物處才有缺口，因此5′→3′外切酶活性的主要功能是切除核糖核苷酸引物〕。,第十六頁(yè)，共五十二頁(yè)。,,,第十七頁(yè)，共五十二頁(yè)。,切口翻譯(nicktranslation) DNA聚合酶 I 的5ˊ→3ˊ外切酶活性和聚合活性同時(shí)(t243。ngsh237。)作用可以進(jìn)行切口翻譯(nicktranslation)，用來(lái)制造放射性探針。 在反響物里參加同位素標(biāo)記的脫氧單核苷酸，DNA聚合酶I 首先利用5ˊ→3ˊ外切酶活性，從切口處逐個(gè)切下DNA上的核苷酸，再利用3ˊOH末端聚合作用逐個(gè)將標(biāo)記的核苷酸加上去(圖7—12)。,第十八頁(yè)，共五十二頁(yè)。,539。,339。,539。,339。,第十九頁(yè)，共五十二頁(yè)。,④ 內(nèi)切酶活性： DNA聚合酶 I 也具有5ˊ→3ˊ 內(nèi)切酶活性，如圖713所示。在兩個(gè)堿基之間切開(kāi)產(chǎn)生一個(gè)具有5ˊP 末端的不配對(duì)堿基的片段。 很多實(shí)驗(yàn)證明(zh232。ngm237。ng)DNA聚合酶 I 在大腸桿菌復(fù)制中不是主要的合成酶，而是在除去RNA引物和損傷修復(fù)中起重要作用。,第二十頁(yè)，共五十二頁(yè)。,不配對(duì)(p232。i du236。)的片段,內(nèi)切酶活性,第二十一頁(yè)，共五十二頁(yè)。,〔2〕 大腸桿菌 DNA聚合酶 Ⅱ DNA聚合酶Ⅰ缺陷的突變株仍能生存，這說(shuō)明DNApolⅠ不是DNA復(fù)制的主要(zhǔy224。o)聚合酶。人們開(kāi)始尋找另外的DNA聚合酶，并于1970年發(fā)現(xiàn)了DNApolⅡ。 ① 從5′→3′方向合成DNA ② 具有3ˊ→5ˊ外切酶活性，但沒(méi)有5ˊ→3ˊ外切酶活性。 在體外的合成速率比體內(nèi)的速率要低得多，帶有這個(gè)酶缺陷的大腸桿菌突變株染色體的復(fù)制各方面都正常，它在體內(nèi)的功能可能和DNA聚合酶 I 類似。,第二十二頁(yè)，共五十二頁(yè)。,(3) 大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ ▼聚合酶Ⅲ是體內(nèi)DNA復(fù)制所必需的酶 帶有DNA聚合酶 Ⅲ 的溫度敏感突變 (polc) 的大腸桿菌在限制溫度下是不能存活的，從這種菌株得到的裂解液也不能合成DNA，當(dāng)參加正常細(xì)菌的DNA 聚合酶Ⅲ 時(shí)可以恢復(fù)它的聚合能力，因此不同于DNA聚合酶I和Ⅱ，聚合酶Ⅲ是體內(nèi)DNA復(fù)制所必需的酶。 DNA多聚酶Ⅲ相當(dāng)復(fù)雜(f249。z225。)，其結(jié)構(gòu)和各亞基的功能如圖11－24，25所示。 DNA pol Ⅲ具有539?！?39。聚合功能。,第二十三頁(yè)，共五十二頁(yè)。,DNA聚合酶 Ⅲ的 “核心酶〞由α、ε、θ三種亞基組成。 α亞基具有(j249。yǒu)合成DNA的能力。 ε亞基具有3‘→5’外切酶的功能，起到校正的作用。 θ亞基可能在組裝中發(fā)揮功能。,τ亞基
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1