高二生物dna和蛋白質(zhì)技術(shù)-文庫吧
2024-10-21 06:18 本頁面
【正文】 沒影響 瓦解細胞膜 (破壞膜中的蛋白質(zhì)分 子 ) 二、實驗設(shè)計流程 制備雞血細胞液 (加檸檬酸鈉，靜置或離心 ) ↓ 破碎細胞，釋放 DNA(加蒸餾水，沿同一方向快速攪拌 ) ↓→過濾，除去細胞壁、細胞膜等 溶解核內(nèi) DNA(加入 NaCl至 2 mol/L，同一方向緩慢攪拌 ) ↓ DNA析出 (加蒸餾水至 NaCl濃度為 mol/L，過濾，再溶解到 2 mol/L的 NaCl溶液中 ) ↓→除去細胞質(zhì)中的大部分物質(zhì) DNA初步純化 (與等體積 95%冷卻酒精混合，析出白色絲狀物 ) ↓→除去核蛋白、 RNA、多糖等 DNA鑒定 (二苯胺，沸水浴，呈現(xiàn)藍色 ) NaCl 酒精 (體積分數(shù)為 95%的冷酒精 ) DNA 不溶 蛋白質(zhì) NaCl溶液從 2 mol/L逐漸稀釋的過程中溶解度逐漸增大 某些蛋白質(zhì)可溶 【 例 1】 下表是關(guān)于“ DNA粗提取與鑒定”實驗中所使用的材料、操作及其作用的表述。正確的是 ( ) 試劑 操作 作用 A 檸檬酸鈉溶 液 與雞血混合 防止血液凝固 B 蒸餾水 與雞血細胞混合 保持細胞形狀 C 蒸餾水 加入到溶解有DNA的 NaCl中 加速 DNA的溶解 D 冷卻的酒精 加入到過濾后DNA的 NaCl中 產(chǎn)生特定的顏色 反應 【 解析 】 在“ DNA粗提取與鑒定”實驗中，檸檬酸鈉可防止血液凝固；向雞血中加入蒸餾水可以使細胞膜破裂；DNA在不同的氯化鈉溶液中的溶解度不同，在 mol/L時，溶解度最低，有利于 DNA析出； DNA不溶于酒精，但細胞中的某些物質(zhì)可以溶于酒精，所以加入酒精可以獲得較純的 DNA； DNA遇二苯胺產(chǎn)生藍色反應 (需要水浴加熱 )。 【 答案 】 A 1. 實驗中共 3次過濾。過濾時使用的紗布層數(shù)與取其濾液或黏稠物有關(guān)。第 3次要收集其濾液，使用的紗布為 1～ 2層，第 2次要收集其濾出的黏稠物，使用的紗布為多層。 2. 實驗中有 6層攪拌，除最后一次攪拌外，前 5次攪拌均要朝向一個方向，并且在析出 DNA、 DNA再溶解和提取中，各步攪拌均要輕緩，玻璃棒不要直插燒杯底部，以防止 DNA分子斷裂。 3. 實驗中有兩次使用蒸餾水。第一次加蒸餾水是為了使血細胞吸水膨脹破裂；第二次加蒸餾水是為了稀釋 NaCl溶液使 DNA析出。 4. 用高鹽濃度的溶液溶解 DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度的溶解使 DNA析出，能除去不能溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此，通過反復溶解與析出 DNA，就能夠除去與 DNA溶
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