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20xx年醫(yī)學(xué)專題—參與dna復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)(更新版)

2025-11-08 07:10上一頁面

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【正文】 機(jī)制,23,圖221 拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ的作用機(jī)制,第四十五頁,共五十二頁。)。如:ATP NAD (煙酰胺腺嘌呤二核苷酸) ,最初從大腸桿菌中別離(fēnl237。nɡ ɡǎn jūn)拓?fù)洚悩?gòu)酶I〔屬于Ⅰ型酶〕 概述:拓?fù)洚悩?gòu)酶 Ⅰ (E. coli)催化負(fù)超螺旋DNA的松弛。)和連接。,第三十六頁,共五十二頁?!?SSB保護(hù)復(fù)制中的DNA單鏈局部不被核酸酶降解〕 首先在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn),后來發(fā)現(xiàn)許多種生物中都有這類蛋白質(zhì)。,第三十一頁,共五十二頁。 DNA聚合酶ε:功能不詳。 它同大腸桿菌DNA聚合酶最大不同之處在于不具外切酶活性。,E. Coli中的DNA聚合酶,第二十七頁,共五十二頁。 亞基β:形成夾鉗,保持催化核心和模板鏈的結(jié)合,第二十四頁,共五十二頁。yǒu)合成DNA的能力。z225。,〔2〕 大腸桿菌 DNA聚合酶 Ⅱ DNA聚合酶Ⅰ缺陷的突變株仍能生存,這說明DNApolⅠ不是DNA復(fù)制的主要(zhǔy224。在兩個堿基之間切開產(chǎn)生一個具有5ˊP 末端的不配對堿基的片段。 在反響物里參加同位素標(biāo)記的脫氧單核苷酸,DNA聚合酶I 首先利用5ˊ→3ˊ外切酶活性,從切口處逐個切下DNA上的核苷酸,再利用3ˊOH末端聚合作用逐個將標(biāo)記的核苷酸加上去(圖7—12)。,③ 5′→3′外切(w224。 聚合酶催化的DNA的合成需要以下條件: ▲ 模板 ▲ 四種脫氧核苷酸 ▲必須有一 3′OH末端的引物,且此引物必須與模板正確形成氫鍵 ▲合成從5ˊ→3ˊ方向進(jìn)行,如圖78和圖79所示,第十二頁,共五十二頁。n)〔34KD〕,5? ? ??核酸(h233。,(1) 大腸桿菌DNA聚合酶I (Pol Ⅰ) 純的DNA聚合酶I由分子量109 000U (109KD),含928個氨基酸殘基的一條肽鏈構(gòu)成,每個大腸桿菌細(xì)胞(x236。,能識別錯配的堿基對,并將其水解。,所有DNA聚合酶的作用方式根本相似。nb225。zh236。,現(xiàn)在已經(jīng)知道約20多種蛋白質(zhì)參與復(fù)制(f249。,Rep蛋白(d224。 suān)外切酶活性,第五頁,共五十二頁。n)的 DNA片段和RNA引物。)生物的聚合酶,第九頁,共五十二頁。n du224。每個酶分子每分鐘添加1 000個單核苷酸。,第十五頁,共五十二頁。)作用可以進(jìn)行切口翻譯(nicktranslation),用來制造放射性探針。,④ 內(nèi)切酶活性: DNA聚合酶 I 也具有5ˊ→3ˊ 內(nèi)切酶活性,如圖713所示。)的片段,內(nèi)切酶活性,第二十一頁,共五十二頁。 DNA多聚酶Ⅲ相當(dāng)復(fù)雜(f249。 α亞基具有(j249。 γ復(fù)合體是由γ,δ,δ′,χ和ψ亞基組成,其作用是固定β亞基這個“夾子〞的支架。,第二十六頁,共五十二頁。是真核生物的復(fù)制酶。 DNA聚合酶α和DNA聚合酶δ〔主要復(fù)制酶〕: 是真核生物的復(fù)制酶,主要根據(jù)是聚合酶δ的活性隨細(xì)胞周期而變化。,第三十頁,共五十二頁。)蛋白 (SSB蛋白) SSB蛋白:是缺乏酶活性的復(fù)制輔助蛋白,可以在遠(yuǎn)低于Tm的溫度下使雙鏈DNA拆開,并牢牢地結(jié)合在單鏈DNA上,穩(wěn)定單鏈區(qū)域的蛋白質(zhì)。,第三十五頁,共五十二頁。n li232。 ch225。 ②不需要能量輔助因子。,拓?fù)洚悩?gòu)酶 I (E. coli)催化負(fù)超螺旋DNA的松弛(sōnɡ ch237。y242。 ②需要能量輔助因子 [如:ATP NAD(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)]。,第四十八頁,共五十二頁。 z236?!?只能在5ˊP末端一個接一個地切除核
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