【正文】 ▲ 只能在5ˊP末端一個接一個地切除核苷酸。,第四十八頁，共五十二頁。y242。 ②不需要能量輔助因子。n li232。)蛋白 (SSB蛋白) SSB蛋白：是缺乏酶活性的復(fù)制輔助蛋白，可以在遠(yuǎn)低于Tm的溫度下使雙鏈DNA拆開，并牢牢地結(jié)合在單鏈DNA上，穩(wěn)定單鏈區(qū)域的蛋白質(zhì)。 DNA聚合酶α和DNA聚合酶δ〔主要復(fù)制酶〕: 是真核生物的復(fù)制酶，主要根據(jù)是聚合酶δ的活性隨細(xì)胞周期而變化。,第二十六頁，共五十二頁。 α亞基具有(j249。)的片段,內(nèi)切酶活性,第二十一頁，共五十二頁。)作用可以進(jìn)行切口翻譯(nicktranslation)，用來制造放射性探針。每個酶分子每分鐘添加1 000個單核苷酸。)生物的聚合酶,第九頁，共五十二頁。 suān)外切酶活性,第五頁，共五十二頁。,現(xiàn)在已經(jīng)知道約20多種蛋白質(zhì)參與復(fù)制(f249。nb225。,能識別錯配的堿基對，并將其水解。n)〔34KD〕,5? ? ??核酸(h233。,③ 5′→3′外切(w224。在兩個堿基之間切開產(chǎn)生一個具有5ˊP 末端的不配對堿基的片段。z225。 亞基β：形成夾鉗，保持催化核心和模板鏈的結(jié)合,第二十四頁，共五十二頁。 它同大腸桿菌DNA聚合酶最大不同之處在于不具外切酶活性。,第三十一頁，共五十二頁。,第三十六頁，共五十二頁。nɡ ɡǎn jūn)拓?fù)洚悩?gòu)酶I〔屬于Ⅰ型酶〕 概述：拓?fù)洚悩?gòu)酶 Ⅰ (E. coli)催化負(fù)超螺旋DNA的松弛。)。 ③拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ沒有DNA特異性。mǔ)讀法,α Α 阿拉法 β Β 北塔 γ Γ 咖嗎 δ Δ 德兒塔 ε Ε 易普塞龍 ζ Ζ 賊塔 η Η 姨塔 θ Θ 習(xí)塔 ι Ι 哎歐塔 κ Κ 卡怕 λ Λ 藍(lán)母達(dá) μ Μ 謬,ν Ν 拗 ξ Ξ 可賽 ο Ο 歐麥克龍 π Π 派 ρ Ρ 漏 σ Σ 西格馬 τ Τ 掏 υ Υ 優(yōu)普塞龍 φ Φ fai〔夫愛切〕 χ Χ 開〔去聲(q249。希臘字母讀法,第五十二頁，共五十二頁。,希臘字母(Xīl224。)為負(fù)超螺旋DNA。,第四十二頁，共五十二頁。,大腸桿菌(d224。因此在復(fù)制時rep蛋白和某DNA解鏈酶分別在DNA的兩條母鏈上協(xié)同作用以解開雙鏈DNA〔圖716〕,第三十四頁，共五十二頁。大腸桿菌連接酶那么不行。最適宜的底物是帶缺口的雙鏈DNA，但是帶引物的變性DNA也是很好的底物。ng) pol Ⅲ′復(fù)合體。,(3) 大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ ▼聚合酶Ⅲ是體內(nèi)DNA復(fù)制所必需的酶 帶有DNA聚合酶 Ⅲ 的溫度敏感突變 (polc) 的大腸桿菌在限制溫度下是不能存活的，從這種菌株得到的裂解液也不能合成DNA，當(dāng)參加正常細(xì)菌的DNA 聚合酶Ⅲ 時可以恢復(fù)它的聚合能力，因此不同于DNA聚合酶I和Ⅱ，聚合酶Ⅲ是體內(nèi)DNA復(fù)制所必需的酶。,第十九頁，共五十二頁。,第十四頁，共五十二頁。,323個氨基酸,小片段(pi224。i qiē)酶活性,?,能切除突變(tūbi224。)有關(guān)的蛋白質(zhì),接下頁,BACK,第三頁，共五十二頁。)。它們催化(cuī hu224。bāo)中大約含400個酶分子。,第十三頁，共五十二頁。,第十八頁，共五十二頁。o)聚合酶。 ε亞基具有3‘→5’外切酶的功能，起到校正的作用。,(4) 真核生物中的DNA聚合酶 所有真核生物中的聚合酶的性質(zhì)根本上同大腸桿菌中的聚合酶相似，它的活性有賴于模板，帶3′OH的引物，四種脫氧核糖核苷磷酸。,第二十九頁，共五十二頁。在文