【文章內(nèi)容簡介】 hler和Milstein 首創(chuàng)了B淋巴細胞雜交瘤細胞和單克隆抗體技術(shù)。其基本原理是：使小鼠免疫脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞，每一個雜交瘤是用一個B細胞融合而產(chǎn)生的克隆。這種細胞既保持了骨髓瘤細胞大量無限增殖的特性，又繼承了免疫B細胞合成分泌特異性抗體的能力。將這種融合成功的雜交瘤細胞株體外擴增或接種于小鼠腹腔內(nèi)，則可從上清液或腹水中獲得單克隆抗體。用這種方法制備的抗體具有結(jié)構(gòu)高度均一，特異性強，無交叉反應(yīng)等特點。(1)概念：見名詞解釋1。(2)補體系統(tǒng)由30多種成分構(gòu)成，按其生物學功能分為三類：：存在于體液中、參與活化級聯(lián)反應(yīng)的補體成分，包括C1～CMBL、B因子、D因子。：以可溶性或膜結(jié)合形式存在。包括備解素、C1抑制物、I因子、C4結(jié)合蛋白、H因子、S蛋白、Sp40/促衰變因子、膜輔助因子等。：包括CR1～CRC3aR、C4aR、CaR等。簡述補體系統(tǒng)的生物學功能。（1）溶菌和溶細胞作用：補體系統(tǒng)激活后，在靶細胞表面形成MAC，從而導致靶細胞溶解。（2）調(diào)理作用：補體激活過程中產(chǎn)生的C3b、C4b、iC3b都是重要的調(diào)理素，可結(jié)合中性粒細胞或巨噬細胞表面相應(yīng)受體，因此，在微生物細胞表面發(fā)生的補體激活，可促進微生物與吞噬細胞的結(jié)合，并被吞噬及殺傷。（3）引起炎癥反應(yīng)：在補體活化過程中產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)C3a、C4a、C5a。它們又稱為過敏毒素，與相應(yīng)細胞表面的受體結(jié)合，激發(fā)細胞脫顆粒，釋放組胺之類的血管活性物質(zhì)，從而增強血管的通透性并刺激內(nèi)臟平滑肌收縮。C5a還是一種有效的中性粒細胞趨化因子。（4）清除免疫復合物：機制為：①補體與Ig的結(jié)合在空間上干擾Fc段之間的作用，抑制新的IC形成或使已形成的IC解離。②循環(huán)IC可激活補體，產(chǎn)生的C3b與抗體共價結(jié)合。IC借助C3b與表達CR1和CR3的細胞結(jié)合而被肝細胞清除。（5）免疫調(diào)節(jié)作用：①C3可參與捕捉固定抗原，使抗原易被APC處理與遞呈。②補體可與免疫細胞相互作用，調(diào)節(jié)細胞的增殖與分化。③參與調(diào)節(jié)多種免疫細胞的功能。①細胞因子通常為低相對分子質(zhì)量(15～30kD)的分泌性糖蛋白；②天然的細胞因子是由抗原、絲裂原或其他刺激物活化的細胞分泌；③多數(shù)細胞因子以單體形式存在，少數(shù)可為雙體或三體形式；④細胞因子通常以非特異性方式發(fā)揮作用，也無MHC限制性；⑤細胞因子具有極強的生物學效應(yīng)，極微量的細胞因子就可對靶細胞產(chǎn)生顯著的生物學效應(yīng)；⑥細胞因子的產(chǎn)生和作用具有多源性和多向性；⑦細胞因子作用時具有多效性、重疊性以及拮抗效應(yīng)和協(xié)同效應(yīng)，從而形成復雜的網(wǎng)絡(luò)；⑧多以旁分泌和(或)自分泌及內(nèi)分泌形式在局部或遠處發(fā)揮作用。 ? ★★細胞因子的主要生物學作用有：①抗感染、抗腫瘤作用，如IFN、TNF等。②免疫調(diào)節(jié)作用，如ILILILIFN等。③刺激造血細胞增殖分化，如MCSF、GCSF、IL3等。④參與和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。如：ILILTNF等細胞因子可直接參與和促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生。細胞因子共分六類：白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長因子和趨化性細胞因子。細胞因子受體共分五個家族：① 免疫球蛋白基因超家族，ILILMCSF、SCF、FGF等受體屬于此類。② I型細胞因子受體家族，又稱紅細胞生成素受體家族或造血因子受體家族。IL2～ILILIL1IL1IL1GMCSF、GCSF受體屬于此類。③ I型細胞因子受體家族，這類受體是干擾素的受體。④ III型細胞因子受體家族，又稱腫瘤壞死因子受體家族，是TNF及神經(jīng)生長因子受體。⑤ 趨化性細胞因子受體家族，這一家族是受體是G蛋白偶聯(lián)受體。：根據(jù)HLA復合體各位點基因及其編碼產(chǎn)物結(jié)構(gòu)和功能的不同，將HLA復合體分為三個區(qū)域，即I類基因區(qū)、Ⅱ類基因 區(qū)和介于I類與Ⅱ類基因區(qū)之間的Ⅲ類基因區(qū)。(1)I類基因區(qū)內(nèi)含經(jīng)典HLA的A、B、C基因位點和新近確定的非經(jīng)典 HLA的E、F、G、H等基因位點。HLA的A、B、C各位點基因編碼 HLA I類抗原分子的重鏈(α鏈)，與β2m結(jié)合共同組成人類的 HLA I類抗原。(2)Ⅱ類基因區(qū)包括HLA的DP、DQ、DR三個亞區(qū)和新近確定的HLA的DN、DO、DM三個亞區(qū)。HLA的DP、DQ、DR三個亞區(qū)編碼相應(yīng)的HLA的DP、DQ、DR抗原的α鏈和β鏈，組成HLA Ⅱ類抗原。(3)Ⅲ類基因區(qū)位于I類與Ⅱ類基因區(qū)之間，內(nèi)含眾多編碼血清補體成分和其他血清蛋白的基因，主要基因產(chǎn)物為 CCB因子、腫瘤壞死因子和熱休克蛋白70等。 的多態(tài)性主要由以下原因所致：①復等位基因：HLA復合體的每一個位點均存在為數(shù)眾多的復等位基因，這是HLA高度多態(tài)性的最主要原因。②共顯性：HLA復合體中每一個等位基因均為共顯性，從而大大增加了人群中HLA表型的多樣性。 抗原分子的主要生物學功能有 ：(1)引起移植排斥反應(yīng)。器官或組織細胞移植時，同種異體內(nèi)MHC抗原可作為異己抗原刺激機體，發(fā)生強烈的移植排斥反應(yīng)。(2)抗原提呈作用。在抗原提呈細胞內(nèi)，MHC分子通過抗原肽結(jié)合區(qū)與胞漿內(nèi)加工處理過的抗原肽結(jié)合，形成MHC抗原肽復合體，經(jīng)轉(zhuǎn)運表達于抗原提呈細胞表面，可被具有相應(yīng)抗原受體的淋巴細胞識別結(jié)合，完成抗原呈遞，啟動免疫應(yīng)答。(3)制約免疫細胞間的相互作用即MHC限制性。抗原提呈細胞與T細胞相互作用時，只有當二者MHC分子一致時，T細胞才能被激活，即細胞間相互作用的MHC限制性。CD4＋Th細胞與抗原提呈細胞之間相互作用受MHCⅡ類分子的制約，CD8＋Tc細胞與腫瘤或病毒感染細胞之間的相互作用受MHC I類分子的制約。(4)誘導胸腺細胞分化。MHC分子參與胸腺細胞(前T細胞)在胸腺中的分化和發(fā)育。通過陰、陽性選擇后，胸腺產(chǎn)生對自身抗原無反應(yīng)性的T細胞，形成天然自身免疫耐受；同時亦產(chǎn)生對非己抗原具有應(yīng)答作用的T細胞，T細胞對非已抗原的應(yīng)答作用受MHC分子制約。 I 類和Ⅱ類抗原的結(jié)構(gòu)、組織分布、功能及與抗原肽相互作用特點： HLA抗原類別 肽結(jié)合 結(jié)構(gòu)域 表達特點 組織 分布 功能 與抗原肽相互作用特點 Ⅰ類（A、B、C）α1＋α2 共顯性 所有 有核 細胞表面 識別和提呈內(nèi)源性抗原肽，與輔助受體CD8結(jié)合，對CTL的識別起限制作用 Ⅰ類抗原凹槽兩端封閉，接納的抗原肽長度有限，為8－10個氨基酸殘基，錨定位為P2和P9 Ⅱ類（DR、DQ、DP）α1＋β1 共顯性 APC 及活 化的 T 細胞 識別和提呈外源性抗原肽，與輔助受體CD4結(jié)合，對Th的識別起限制作用 Ⅱ類抗原凹槽兩端開放，接納的抗原肽長度變化較大，為13－17個氨基酸殘基，錨定位為PPP6和P9 ：⑴參與細胞生長、分化、正常組織結(jié)構(gòu)的維持⑵參與免疫應(yīng)答過程中免疫細胞的相互識別，免疫細胞抗原識別、活化、增值和分化，以及免疫功能的發(fā)揮⑶造血細胞的分化和造血過程的調(diào)控⑷參與炎癥的發(fā)生、血栓形成和組織修復⑸腫瘤的惡化和轉(zhuǎn)移。：粘附分子根據(jù)結(jié)構(gòu)特點分為整合素家族、選擇素家族、免疫球蛋白超家族、鈣粘蛋白家族，此外還有一些尚未歸類的粘附分子。功能：⑴參與免疫細胞的免疫發(fā)育與分化。如胸腺細胞發(fā)育成熟過程中涉及到胸腺細胞上CD8和CD4分子與胸腺基質(zhì)細胞上的MHCⅠ、Ⅱ類抗原間的相互作用；T細胞活化分化過程中必須有粘附分子提供的細胞間協(xié)同刺激信號的存在。⑵通過白細胞與血管內(nèi)皮細胞上的粘附分子之間的作用參與炎癥過程 ⑶通過淋巴細胞上的淋巴細胞歸巢受體與內(nèi)皮細胞上的地址素之間的作用參與淋巴細胞歸巢。、粘附及活化的CD分子的種類、結(jié)構(gòu)特點、識別配體及其功能有： 種類 結(jié)構(gòu)特點 識別配體 功能CD3 五聚體，與TCR組成TCR/CD3復合物 穩(wěn)定TCR結(jié)構(gòu)、傳遞活化信號 CD4 單體分子 MHCⅡ類分子 增強TCR與APC或靶細胞的親和性，并參與信號傳導。CD8 異源二聚體 MHCⅠ類分子 增強TCR與APC或靶細胞的親和性，并參與信號傳導。CD2 單體分子 CD58(LFA3)增強T細胞與APC或靶細胞的粘附及CD2分子所介導的信號傳導CD58 單體分子 CD2 促進T細胞識別抗原，參與T細胞信號傳導 CD28 同源二聚體 B7 提供T細胞活化的輔助信號 CD152 同源二聚體 B7 對T細胞活化有負調(diào)節(jié)作用CD40L 三聚體 CD40 是B細胞進行免疫應(yīng)答和淋巴結(jié)生發(fā)中心形成的重要條件、粘附及活化的CD分子的種類、結(jié)構(gòu)特點、識別配體及其功能有： 種類 結(jié)構(gòu)特點 識別配體 功能CD79 異源二聚體 與mIg組成BCR復合物，介導B細胞信號傳導 CD19 單體分子 促進B細胞激活CD21 單體分子 C3片段EB病毒 增強B細胞對抗原的應(yīng)答，參與免疫記憶 CD80/CD86 單體分子 CD28 提供T細胞活化的輔助信號CD40 單體分子 CD40L 是B細胞進行免疫應(yīng)答和淋巴結(jié)生發(fā)中心形成的重要條件：（1）FcγR：是IgG Fc受體，又可分為① F cγR Ⅰ（即CD64）：是高親和力IgG Fc受體，可介導ADCC，清除免疫復合物，促進吞噬細胞對顆粒性抗原的吞噬作用，促進吞噬細胞釋放ILIL6和TNFα等介質(zhì)。② FcγR Ⅱ（即CD32）：是低親和力IgG Fc受體，可介導中性粒細胞和單核巨噬細胞的吞噬作用和氧化性爆發(fā)。③FcγRⅢ（即CD16）：是低親和力IgG Fc受體，可與FcεRγ鏈或與TCRCD3δ鏈相連，傳遞活化信號，并可介導促進吞噬和ADCC作用。（2）FcαR（即CD89）：是IgA Fc受體，能結(jié)合IgA，介導吞噬細胞的吞噬作用、超氧產(chǎn)生、釋放炎癥介質(zhì)以及發(fā)揮ADCC。（3）FcεR：是IgE Fc受體，可分為：①FcεR Ⅰ：是IgE高親和力受體，可介導Ⅰ型超敏反應(yīng)；② FcεRⅡ（即CD23）：是IgE低親和力受體，可以不同方式參與IgE合成的調(diào)節(jié)。 表面分子 主要作用TCR 特異性識別由MHC分子提呈的抗原肽 CD3 穩(wěn)定TCR結(jié)構(gòu)，傳遞活化信號CD4/CD8 增強TCR與APC或靶細胞的親和性，并參與信號傳導。CD28 LFA2（CD2）提供T細胞活化的第二信號可與CD58結(jié)合，能介導T細胞旁路激活途徑，還能介導效應(yīng)階段的激活途徑 CD40L 可表達于部分活化的T細胞表面，可與B細胞表現(xiàn)CD40結(jié)合，產(chǎn)生的信號是B細胞進行免疫應(yīng)答和淋巴結(jié)生發(fā)中心形成的重要條件。絲裂原受體 與絲裂原結(jié)合后，直接使靜止狀態(tài)的T細胞活化增殖轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞。T細胞是異質(zhì)性群體，分類方法有很多：按CD分子不同可分為CD4＋和CD8＋兩個亞群；按TCR分子不同可分為TCRαβ和TCRγδT細胞；按功能不同可分為輔助性和抑制性T細胞；按對抗原的應(yīng)答不同可分為初始T細胞、抗原活化過的T細胞、記憶性T細胞。功能：（1）CD4＋輔助性T細胞（Th）：增強免疫應(yīng)答；活化細胞，增強其吞噬或殺傷功能；（2）CD8＋殺傷性T細胞（Tc）：特異性直接殺傷靶細胞，與細胞免疫有關(guān)；（3）抑制性T細胞(Ts)：抑制免疫應(yīng)答（4）遲發(fā)型超敏反應(yīng)性T細胞（TD）：主要為Th1，還有CTL，Th1分泌多種淋巴因子，引起以單核細胞浸潤為主的炎癥反應(yīng)，CTL可以直接破壞靶細胞。Th1細胞與Th2細胞各分泌的細胞因子及其主要作用是：Th1細胞分泌ILIFNγ、TNFβ等細胞因子，引起炎癥反應(yīng)或遲發(fā)型超敏反應(yīng)；Th2細胞分泌ILILILIL10等細胞因子，誘導B細胞增殖分化合成并分泌抗體，引起體液免疫應(yīng)答。＋T細胞又可以是CD8＋T細胞。：表面的抗原受體不同，T細胞是TCR而B細胞是BCR。初始T細胞與記憶T細胞： 二者表面CD45分子的異構(gòu)型不同，初始T細胞表達CD45RA，而記憶T細胞表達CD45RO。Th1細胞與Th2細胞：二者分泌的細胞因子不同，Th1細胞分泌ILIFNγ，與TDH和TC細胞的增殖分化成熟有關(guān)，可促進細胞介導的免疫應(yīng)答；而Th2細胞偏向于分泌ILILILIL10，與B細胞增殖成熟和促進抗體生成有關(guān)，可增強抗體介導的免疫應(yīng)答。＋殺傷性T細胞破壞靶細胞的機制有2種：細胞裂解和細胞調(diào)亡。⑴細胞裂解：CD8＋殺傷性T細胞特異性識別靶細胞表面的抗原肽：MHC分子復合物后，通過顆粒胞吐釋放穿孔素，使靶細胞膜上出現(xiàn)大量小孔，膜內(nèi)外滲透壓不同，水分進入胞漿，靶細胞脹裂而死；⑵細胞調(diào)亡：有2種不同機制：①Tc活化后大量表達FasL，可與靶細胞表面的Fas結(jié)合，通過Fas分子胞內(nèi)段的死亡結(jié)構(gòu)域激活caspase，在激活一系列caspase，引起死亡信號的逐級轉(zhuǎn)導，最終激活內(nèi)源性DNA內(nèi)切酶，使核小體斷裂，并導致細胞結(jié)構(gòu)毀損，細胞死亡；②Tc細胞顆粒胞吐釋放的顆粒酶，可借助穿孔素構(gòu)筑的小孔穿越細胞膜，激活另一個caspase10，引發(fā)caspase級聯(lián)反應(yīng)，使靶細胞調(diào)亡。＋T細胞表型的特點有：()，通常為CD4CD8，TCR多為TCRαβ。其功能有： ⑴細胞毒作用：①可分泌穿孔素使靶細胞溶解； ②胸腺中的該細胞可通過FasL/Fas途徑誘導CD4＋CD8＋雙陽性的胸腺細胞調(diào)亡；⑵免疫調(diào)節(jié)作用：①在受某些抗原刺激時，如寄生蟲感染，可分泌大量IL4，可誘導活化的Th0細胞分化為Th2細胞，參與體液免疫應(yīng)答或誘導B細胞發(fā)生Ig類別轉(zhuǎn)換，產(chǎn)生特異性IgE；②在病毒抗原作用下，可產(chǎn)生IFNγ，與IL12共同作用，可使Th0細胞轉(zhuǎn)向Th1細胞，增強細胞免疫應(yīng)答。：在哺乳動物，B細胞在骨髓中發(fā)育成熟，成熟B細胞可定居于周圍淋巴組織，是體內(nèi)唯一能產(chǎn)生抗體的細胞，B細胞表面可表達多種膜分子，如：BCR、CD79a、CD79b、CD1CDCDCD80、CD8CD3CD2CD2CD3MHC分子、絲裂原受體等等。B細胞的主要生物學功能。（1）產(chǎn)生抗體，參與特異性體液免疫；（2）作為APC，提呈抗原；（3）產(chǎn)生細胞因子，參與免疫應(yīng)答炎癥反應(yīng)及造血過程。： 性質(zhì) B1 B2 初次產(chǎn)生時間 胎兒期 出生后 分布 胸腔腹腔 外周免疫器官 C