【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 hler和Milstein 首創(chuàng)了B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞和單克隆抗體技術(shù)。其基本原理是：使小鼠免疫脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞，每一個(gè)雜交瘤是用一個(gè)B細(xì)胞融合而產(chǎn)生的克隆。這種細(xì)胞既保持了骨髓瘤細(xì)胞大量無(wú)限增殖的特性，又繼承了免疫B細(xì)胞合成分泌特異性抗體的能力。將這種融合成功的雜交瘤細(xì)胞株體外擴(kuò)增或接種于小鼠腹腔內(nèi)，則可從上清液或腹水中獲得單克隆抗體。用這種方法制備的抗體具有結(jié)構(gòu)高度均一，特異性強(qiáng)，無(wú)交叉反應(yīng)等特點(diǎn)。(1)概念：見名詞解釋1。(2)補(bǔ)體系統(tǒng)由30多種成分構(gòu)成，按其生物學(xué)功能分為三類：：存在于體液中、參與活化級(jí)聯(lián)反應(yīng)的補(bǔ)體成分，包括C1～CMBL、B因子、D因子。：以可溶性或膜結(jié)合形式存在。包括備解素、C1抑制物、I因子、C4結(jié)合蛋白、H因子、S蛋白、Sp40/促衰變因子、膜輔助因子等。：包括CR1～CRC3aR、C4aR、CaR等。簡(jiǎn)述補(bǔ)體系統(tǒng)的生物學(xué)功能。（1）溶菌和溶細(xì)胞作用：補(bǔ)體系統(tǒng)激活后，在靶細(xì)胞表面形成MAC，從而導(dǎo)致靶細(xì)胞溶解。（2）調(diào)理作用：補(bǔ)體激活過(guò)程中產(chǎn)生的C3b、C4b、iC3b都是重要的調(diào)理素，可結(jié)合中性粒細(xì)胞或巨噬細(xì)胞表面相應(yīng)受體，因此，在微生物細(xì)胞表面發(fā)生的補(bǔ)體激活，可促進(jìn)微生物與吞噬細(xì)胞的結(jié)合，并被吞噬及殺傷。（3）引起炎癥反應(yīng)：在補(bǔ)體活化過(guò)程中產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)C3a、C4a、C5a。它們又稱為過(guò)敏毒素，與相應(yīng)細(xì)胞表面的受體結(jié)合，激發(fā)細(xì)胞脫顆粒，釋放組胺之類的血管活性物質(zhì)，從而增強(qiáng)血管的通透性并刺激內(nèi)臟平滑肌收縮。C5a還是一種有效的中性粒細(xì)胞趨化因子。（4）清除免疫復(fù)合物：機(jī)制為：①補(bǔ)體與Ig的結(jié)合在空間上干擾Fc段之間的作用，抑制新的IC形成或使已形成的IC解離。②循環(huán)IC可激活補(bǔ)體，產(chǎn)生的C3b與抗體共價(jià)結(jié)合。IC借助C3b與表達(dá)CR1和CR3的細(xì)胞結(jié)合而被肝細(xì)胞清除。（5）免疫調(diào)節(jié)作用：①C3可參與捕捉固定抗原，使抗原易被APC處理與遞呈。②補(bǔ)體可與免疫細(xì)胞相互作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖與分化。③參與調(diào)節(jié)多種免疫細(xì)胞的功能。①細(xì)胞因子通常為低相對(duì)分子質(zhì)量(15～30kD)的分泌性糖蛋白；②天然的細(xì)胞因子是由抗原、絲裂原或其他刺激物活化的細(xì)胞分泌；③多數(shù)細(xì)胞因子以單體形式存在，少數(shù)可為雙體或三體形式；④細(xì)胞因子通常以非特異性方式發(fā)揮作用，也無(wú)MHC限制性；⑤細(xì)胞因子具有極強(qiáng)的生物學(xué)效應(yīng)，極微量的細(xì)胞因子就可對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生顯著的生物學(xué)效應(yīng)；⑥細(xì)胞因子的產(chǎn)生和作用具有多源性和多向性；⑦細(xì)胞因子作用時(shí)具有多效性、重疊性以及拮抗效應(yīng)和協(xié)同效應(yīng)，從而形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)；⑧多以旁分泌和(或)自分泌及內(nèi)分泌形式在局部或遠(yuǎn)處發(fā)揮作用。 ? ★★細(xì)胞因子的主要生物學(xué)作用有：①抗感染、抗腫瘤作用，如IFN、TNF等。②免疫調(diào)節(jié)作用，如ILILILIFN等。③刺激造血細(xì)胞增殖分化，如MCSF、GCSF、IL3等。④參與和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。如：ILILTNF等細(xì)胞因子可直接參與和促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。細(xì)胞因子共分六類：白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長(zhǎng)因子和趨化性細(xì)胞因子。細(xì)胞因子受體共分五個(gè)家族：① 免疫球蛋白基因超家族，ILILMCSF、SCF、FGF等受體屬于此類。② I型細(xì)胞因子受體家族，又稱紅細(xì)胞生成素受體家族或造血因子受體家族。IL2～I(xiàn)LILIL1IL1IL1GMCSF、GCSF受體屬于此類。③ I型細(xì)胞因子受體家族，這類受體是干擾素的受體。④ III型細(xì)胞因子受體家族，又稱腫瘤壞死因子受體家族，是TNF及神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體。⑤ 趨化性細(xì)胞因子受體家族，這一家族是受體是G蛋白偶聯(lián)受體。：根據(jù)HLA復(fù)合體各位點(diǎn)基因及其編碼產(chǎn)物結(jié)構(gòu)和功能的不同，將HLA復(fù)合體分為三個(gè)區(qū)域，即I類基因區(qū)、Ⅱ類基因 區(qū)和介于I類與Ⅱ類基因區(qū)之間的Ⅲ類基因區(qū)。(1)I類基因區(qū)內(nèi)含經(jīng)典HLA的A、B、C基因位點(diǎn)和新近確定的非經(jīng)典 HLA的E、F、G、H等基因位點(diǎn)。HLA的A、B、C各位點(diǎn)基因編碼 HLA I類抗原分子的重鏈(α鏈)，與β2m結(jié)合共同組成人類的 HLA I類抗原。(2)Ⅱ類基因區(qū)包括HLA的DP、DQ、DR三個(gè)亞區(qū)和新近確定的HLA的DN、DO、DM三個(gè)亞區(qū)。HLA的DP、DQ、DR三個(gè)亞區(qū)編碼相應(yīng)的HLA的DP、DQ、DR抗原的α鏈和β鏈，組成HLA Ⅱ類抗原。(3)Ⅲ類基因區(qū)位于I類與Ⅱ類基因區(qū)之間，內(nèi)含眾多編碼血清補(bǔ)體成分和其他血清蛋白的基因，主要基因產(chǎn)物為 CCB因子、腫瘤壞死因子和熱休克蛋白70等。 的多態(tài)性主要由以下原因所致：①?gòu)?fù)等位基因：HLA復(fù)合體的每一個(gè)位點(diǎn)均存在為數(shù)眾多的復(fù)等位基因，這是HLA高度多態(tài)性的最主要原因。②共顯性：HLA復(fù)合體中每一個(gè)等位基因均為共顯性，從而大大增加了人群中HLA表型的多樣性。 抗原分子的主要生物學(xué)功能有 ：(1)引起移植排斥反應(yīng)。器官或組織細(xì)胞移植時(shí)，同種異體內(nèi)MHC抗原可作為異己抗原刺激機(jī)體，發(fā)生強(qiáng)烈的移植排斥反應(yīng)。(2)抗原提呈作用。在抗原提呈細(xì)胞內(nèi)，MHC分子通過(guò)抗原肽結(jié)合區(qū)與胞漿內(nèi)加工處理過(guò)的抗原肽結(jié)合，形成MHC抗原肽復(fù)合體，經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)表達(dá)于抗原提呈細(xì)胞表面，可被具有相應(yīng)抗原受體的淋巴細(xì)胞識(shí)別結(jié)合，完成抗原呈遞，啟動(dòng)免疫應(yīng)答。(3)制約免疫細(xì)胞間的相互作用即MHC限制性。抗原提呈細(xì)胞與T細(xì)胞相互作用時(shí)，只有當(dāng)二者M(jìn)HC分子一致時(shí)，T細(xì)胞才能被激活，即細(xì)胞間相互作用的MHC限制性。CD4＋Th細(xì)胞與抗原提呈細(xì)胞之間相互作用受MHCⅡ類分子的制約，CD8＋Tc細(xì)胞與腫瘤或病毒感染細(xì)胞之間的相互作用受MHC I類分子的制約。(4)誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞分化。MHC分子參與胸腺細(xì)胞(前T細(xì)胞)在胸腺中的分化和發(fā)育。通過(guò)陰、陽(yáng)性選擇后，胸腺產(chǎn)生對(duì)自身抗原無(wú)反應(yīng)性的T細(xì)胞，形成天然自身免疫耐受；同時(shí)亦產(chǎn)生對(duì)非己抗原具有應(yīng)答作用的T細(xì)胞，T細(xì)胞對(duì)非已抗原的應(yīng)答作用受MHC分子制約。 I 類和Ⅱ類抗原的結(jié)構(gòu)、組織分布、功能及與抗原肽相互作用特點(diǎn)： HLA抗原類別 肽結(jié)合 結(jié)構(gòu)域 表達(dá)特點(diǎn) 組織 分布 功能 與抗原肽相互作用特點(diǎn) Ⅰ類（A、B、C）α1＋α2 共顯性 所有 有核 細(xì)胞表面 識(shí)別和提呈內(nèi)源性抗原肽，與輔助受體CD8結(jié)合，對(duì)CTL的識(shí)別起限制作用 Ⅰ類抗原凹槽兩端封閉，接納的抗原肽長(zhǎng)度有限，為8－10個(gè)氨基酸殘基，錨定位為P2和P9 Ⅱ類（DR、DQ、DP）α1＋β1 共顯性 APC 及活 化的 T 細(xì)胞 識(shí)別和提呈外源性抗原肽，與輔助受體CD4結(jié)合，對(duì)Th的識(shí)別起限制作用 Ⅱ類抗原凹槽兩端開放，接納的抗原肽長(zhǎng)度變化較大，為13－17個(gè)氨基酸殘基，錨定位為PPP6和P9 ：⑴參與細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、正常組織結(jié)構(gòu)的維持⑵參與免疫應(yīng)答過(guò)程中免疫細(xì)胞的相互識(shí)別，免疫細(xì)胞抗原識(shí)別、活化、增值和分化，以及免疫功能的發(fā)揮⑶造血細(xì)胞的分化和造血過(guò)程的調(diào)控⑷參與炎癥的發(fā)生、血栓形成和組織修復(fù)⑸腫瘤的惡化和轉(zhuǎn)移。：粘附分子根據(jù)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分為整合素家族、選擇素家族、免疫球蛋白超家族、鈣粘蛋白家族，此外還有一些尚未歸類的粘附分子。功能：⑴參與免疫細(xì)胞的免疫發(fā)育與分化。如胸腺細(xì)胞發(fā)育成熟過(guò)程中涉及到胸腺細(xì)胞上CD8和CD4分子與胸腺基質(zhì)細(xì)胞上的MHCⅠ、Ⅱ類抗原間的相互作用；T細(xì)胞活化分化過(guò)程中必須有粘附分子提供的細(xì)胞間協(xié)同刺激信號(hào)的存在。⑵通過(guò)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的粘附分子之間的作用參與炎癥過(guò)程 ⑶通過(guò)淋巴細(xì)胞上的淋巴細(xì)胞歸巢受體與內(nèi)皮細(xì)胞上的地址素之間的作用參與淋巴細(xì)胞歸巢。、粘附及活化的CD分子的種類、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、識(shí)別配體及其功能有： 種類 結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 識(shí)別配體 功能CD3 五聚體，與TCR組成TCR/CD3復(fù)合物 穩(wěn)定TCR結(jié)構(gòu)、傳遞活化信號(hào) CD4 單體分子 MHCⅡ類分子 增強(qiáng)TCR與APC或靶細(xì)胞的親和性，并參與信號(hào)傳導(dǎo)。CD8 異源二聚體 MHCⅠ類分子 增強(qiáng)TCR與APC或靶細(xì)胞的親和性，并參與信號(hào)傳導(dǎo)。CD2 單體分子 CD58(LFA3)增強(qiáng)T細(xì)胞與APC或靶細(xì)胞的粘附及CD2分子所介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)CD58 單體分子 CD2 促進(jìn)T細(xì)胞識(shí)別抗原，參與T細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo) CD28 同源二聚體 B7 提供T細(xì)胞活化的輔助信號(hào) CD152 同源二聚體 B7 對(duì)T細(xì)胞活化有負(fù)調(diào)節(jié)作用CD40L 三聚體 CD40 是B細(xì)胞進(jìn)行免疫應(yīng)答和淋巴結(jié)生發(fā)中心形成的重要條件、粘附及活化的CD分子的種類、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、識(shí)別配體及其功能有： 種類 結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 識(shí)別配體 功能CD79 異源二聚體 與mIg組成BCR復(fù)合物，介導(dǎo)B細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo) CD19 單體分子 促進(jìn)B細(xì)胞激活CD21 單體分子 C3片段EB病毒 增強(qiáng)B細(xì)胞對(duì)抗原的應(yīng)答，參與免疫記憶 CD80/CD86 單體分子 CD28 提供T細(xì)胞活化的輔助信號(hào)CD40 單體分子 CD40L 是B細(xì)胞進(jìn)行免疫應(yīng)答和淋巴結(jié)生發(fā)中心形成的重要條件：（1）FcγR：是IgG Fc受體，又可分為① F cγR Ⅰ（即CD64）：是高親和力IgG Fc受體，可介導(dǎo)ADCC，清除免疫復(fù)合物，促進(jìn)吞噬細(xì)胞對(duì)顆粒性抗原的吞噬作用，促進(jìn)吞噬細(xì)胞釋放ILIL6和TNFα等介質(zhì)。② FcγR Ⅱ（即CD32）：是低親和力IgG Fc受體，可介導(dǎo)中性粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞的吞噬作用和氧化性爆發(fā)。③FcγRⅢ（即CD16）：是低親和力IgG Fc受體，可與FcεRγ鏈或與TCRCD3δ鏈相連，傳遞活化信號(hào)，并可介導(dǎo)促進(jìn)吞噬和ADCC作用。（2）FcαR（即CD89）：是IgA Fc受體，能結(jié)合IgA，介導(dǎo)吞噬細(xì)胞的吞噬作用、超氧產(chǎn)生、釋放炎癥介質(zhì)以及發(fā)揮ADCC。（3）FcεR：是IgE Fc受體，可分為：①FcεR Ⅰ：是IgE高親和力受體，可介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)；② FcεRⅡ（即CD23）：是IgE低親和力受體，可以不同方式參與IgE合成的調(diào)節(jié)。 表面分子 主要作用TCR 特異性識(shí)別由MHC分子提呈的抗原肽 CD3 穩(wěn)定TCR結(jié)構(gòu)，傳遞活化信號(hào)CD4/CD8 增強(qiáng)TCR與APC或靶細(xì)胞的親和性，并參與信號(hào)傳導(dǎo)。CD28 LFA2（CD2）提供T細(xì)胞活化的第二信號(hào)可與CD58結(jié)合，能介導(dǎo)T細(xì)胞旁路激活途徑，還能介導(dǎo)效應(yīng)階段的激活途徑 CD40L 可表達(dá)于部分活化的T細(xì)胞表面，可與B細(xì)胞表現(xiàn)CD40結(jié)合，產(chǎn)生的信號(hào)是B細(xì)胞進(jìn)行免疫應(yīng)答和淋巴結(jié)生發(fā)中心形成的重要條件。絲裂原受體 與絲裂原結(jié)合后，直接使靜止?fàn)顟B(tài)的T細(xì)胞活化增殖轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。T細(xì)胞是異質(zhì)性群體，分類方法有很多：按CD分子不同可分為CD4＋和CD8＋兩個(gè)亞群；按TCR分子不同可分為TCRαβ和TCRγδT細(xì)胞；按功能不同可分為輔助性和抑制性T細(xì)胞；按對(duì)抗原的應(yīng)答不同可分為初始T細(xì)胞、抗原活化過(guò)的T細(xì)胞、記憶性T細(xì)胞。功能：（1）CD4＋輔助性T細(xì)胞（Th）：增強(qiáng)免疫應(yīng)答；活化細(xì)胞，增強(qiáng)其吞噬或殺傷功能；（2）CD8＋殺傷性T細(xì)胞（Tc）：特異性直接殺傷靶細(xì)胞，與細(xì)胞免疫有關(guān)；（3）抑制性T細(xì)胞(Ts)：抑制免疫應(yīng)答（4）遲發(fā)型超敏反應(yīng)性T細(xì)胞（TD）：主要為Th1，還有CTL，Th1分泌多種淋巴因子，引起以單核細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎癥反應(yīng)，CTL可以直接破壞靶細(xì)胞。Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞各分泌的細(xì)胞因子及其主要作用是：Th1細(xì)胞分泌ILIFNγ、TNFβ等細(xì)胞因子，引起炎癥反應(yīng)或遲發(fā)型超敏反應(yīng)；Th2細(xì)胞分泌ILILILIL10等細(xì)胞因子，誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖分化合成并分泌抗體，引起體液免疫應(yīng)答。＋T細(xì)胞又可以是CD8＋T細(xì)胞。：表面的抗原受體不同，T細(xì)胞是TCR而B細(xì)胞是BCR。初始T細(xì)胞與記憶T細(xì)胞： 二者表面CD45分子的異構(gòu)型不同，初始T細(xì)胞表達(dá)CD45RA，而記憶T細(xì)胞表達(dá)CD45RO。Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞：二者分泌的細(xì)胞因子不同，Th1細(xì)胞分泌ILIFNγ，與TDH和TC細(xì)胞的增殖分化成熟有關(guān)，可促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答；而Th2細(xì)胞偏向于分泌ILILILIL10，與B細(xì)胞增殖成熟和促進(jìn)抗體生成有關(guān)，可增強(qiáng)抗體介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。＋殺傷性T細(xì)胞破壞靶細(xì)胞的機(jī)制有2種：細(xì)胞裂解和細(xì)胞調(diào)亡。⑴細(xì)胞裂解：CD8＋殺傷性T細(xì)胞特異性識(shí)別靶細(xì)胞表面的抗原肽：MHC分子復(fù)合物后，通過(guò)顆粒胞吐釋放穿孔素，使靶細(xì)胞膜上出現(xiàn)大量小孔，膜內(nèi)外滲透壓不同，水分進(jìn)入胞漿，靶細(xì)胞脹裂而死；⑵細(xì)胞調(diào)亡：有2種不同機(jī)制：①Tc活化后大量表達(dá)FasL，可與靶細(xì)胞表面的Fas結(jié)合，通過(guò)Fas分子胞內(nèi)段的死亡結(jié)構(gòu)域激活caspase，在激活一系列caspase，引起死亡信號(hào)的逐級(jí)轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終激活內(nèi)源性DNA內(nèi)切酶，使核小體斷裂，并導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)毀損，細(xì)胞死亡；②Tc細(xì)胞顆粒胞吐釋放的顆粒酶，可借助穿孔素構(gòu)筑的小孔穿越細(xì)胞膜，激活另一個(gè)caspase10，引發(fā)caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)，使靶細(xì)胞調(diào)亡。＋T細(xì)胞表型的特點(diǎn)有：()，通常為CD4CD8，TCR多為TCRαβ。其功能有： ⑴細(xì)胞毒作用：①可分泌穿孔素使靶細(xì)胞溶解； ②胸腺中的該細(xì)胞可通過(guò)FasL/Fas途徑誘導(dǎo)CD4＋CD8＋雙陽(yáng)性的胸腺細(xì)胞調(diào)亡；⑵免疫調(diào)節(jié)作用：①在受某些抗原刺激時(shí)，如寄生蟲感染，可分泌大量IL4，可誘導(dǎo)活化的Th0細(xì)胞分化為Th2細(xì)胞，參與體液免疫應(yīng)答或誘導(dǎo)B細(xì)胞發(fā)生Ig類別轉(zhuǎn)換，產(chǎn)生特異性IgE；②在病毒抗原作用下，可產(chǎn)生IFNγ，與IL12共同作用，可使Th0細(xì)胞轉(zhuǎn)向Th1細(xì)胞，增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答。：在哺乳動(dòng)物，B細(xì)胞在骨髓中發(fā)育成熟，成熟B細(xì)胞可定居于周圍淋巴組織，是體內(nèi)唯一能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞，B細(xì)胞表面可表達(dá)多種膜分子，如：BCR、CD79a、CD79b、CD1CDCDCD80、CD8CD3CD2CD2CD3MHC分子、絲裂原受體等等。B細(xì)胞的主要生物學(xué)功能。（1）產(chǎn)生抗體，參與特異性體液免疫；（2）作為APC，提呈抗原；（3）產(chǎn)生細(xì)胞因子，參與免疫應(yīng)答炎癥反應(yīng)及造血過(guò)程。： 性質(zhì) B1 B2 初次產(chǎn)生時(shí)間 胎兒期 出生后 分布 胸腔腹腔 外周免疫器官 C