6微生物利用甘油生產(chǎn)二羥基丙酮的研究(編輯修改稿)
2024-09-22 23:44 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 品甘油預(yù)處理 10 mol/l 氫氧化鈉調(diào)節(jié) ph 為 ，沉淀 8 h，抽濾，濾液分別過 732 陽離子交換樹脂， d315 陰離子交換樹脂，流速為 2 ml/min，稀釋為 10%甘油含量溶液待用。 （ 3）搖瓶發(fā)酵 取冷凍管保藏菌株接于裝液量為 30 ml 一級種子培養(yǎng)基的 250 ml 錐形瓶， 30℃ ， 220 第 7 頁 共 14 頁 rpm 搖床培養(yǎng) 24 h， 5%接種量接二級種子，同上條件培養(yǎng) 9h，接裝液量為 30 ml 發(fā)酵培養(yǎng)瓶，培養(yǎng) 48 h，測 dha 含量。 分析檢測方法 ①dha 檢測方法。本文選取分光光度法和液相兩種方法測定發(fā)酵液中 dha 含量。 ② 甘油檢測方法。采用 hplc 法測定甘油含量。測定條件同dha，檢測器為 ri 檢測器。 ③ 菌體量測定方法：采用比濁法，菌液用 2%稀鹽酸稀釋 10倍后在 560 nm 處測定吸光值。 4 結(jié)果與討論 不同離子對弗托氏葡糖桿菌轉(zhuǎn)化生產(chǎn) dha 的影響 以純甘油為碳源，按照搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基成份配制培養(yǎng)基，另外配制培養(yǎng)基時以生物柴油副產(chǎn)品甘油中各種離子含量比例分別加入相應(yīng)的無機鹽配制成含有不同離子的發(fā)酵培養(yǎng)基，搖瓶培 第 8 頁 共 14 頁 養(yǎng)條件培養(yǎng) 48 h，測各物質(zhì)含量。 表 1 不同離子對發(fā)酵生產(chǎn) dha 影響 fe3+、 fe2+、 so4 ca2+、 zn2+對菌體生長均有抑制作用，特別是 zn2+幾乎完全抑制菌體生長及轉(zhuǎn)化甘油。由此見，要使弗 托氏葡糖桿菌利用甘油生產(chǎn) dha，必須對甘油進行預(yù)處理，除去其中的金屬離子和毒性有機物質(zhì)。 圖 2 zn2+ so42不同濃度對發(fā)酵生產(chǎn) dha 的影響 圖 3 fe3+、 fe2+不同濃度對發(fā)酵生產(chǎn) dha 的影響 zn2+含量升高，菌體量和 dha 濃度呈現(xiàn)先緩慢升高，當濃度大于 100 mg/l 時 dha 生成量迅速降低， fe3+、 fe2+ so42隨著發(fā)酵液離子濃度的升高， dha 濃度逐漸降低。 生物柴油 副產(chǎn)品甘油預(yù)處理對生產(chǎn) dha 的影響 調(diào)節(jié) 使 fe2+ 第 9 頁 共 14 頁 fe3+及一些酸性蛋白、雜質(zhì)充分沉淀，抽濾除去沉淀物，通過離子交換樹脂除去其他一些離子及可溶性蛋白。每步處理后，取此步處理后甘油配制發(fā)酵培養(yǎng)基，搖瓶發(fā)酵后測 dha。 表 2 不同處理對 dha 生產(chǎn)影響 甘油中離子強度逐漸降低，經(jīng) 732 陽離子
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