11dna重組技術(shù)的基本工具用(編輯修改稿)
2025-03-22 22:53 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 G…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 不同來(lái)源的 DNA片段混合 將不同種來(lái)源的 DNA片段連接起來(lái) 生物 A基因片段 生物 B基因片段 ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 酶切 ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 同一種 2：基因工程的 指 “ DNA連接酶 ” “ ” 作用： 連接“梯子”斷口的“扶手”而非“梯子”中間的“踏板”。 形成磷酸二酯鍵 其作用與限制酶相反，作用點(diǎn)相同 ③類型： 類型 EcoliDNA連接酶 T4DNA連接酶 來(lái)源 功能 大腸桿菌 T4噬菌體 恢復(fù) 磷酸 二酯鍵 只能連接 黏性末端 能連接 黏性末端 和平末端 (效率較低 ) 相同點(diǎn) 差別 可把黏性末端之間的 縫隙“縫合” 起來(lái)， Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵 T4 DNA連接酶 還可把 平末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，但效率較低 T4DNA連接酶 三、“分子運(yùn)輸車(chē)” —— 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 ⒈載體需要的條件： ⑴ 有 1~多個(gè)限制酶切點(diǎn) ⑵對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害 ⑶導(dǎo)入基因 能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá) ⑷ 有某些標(biāo)記基因，便于篩選 ⒉常用運(yùn)載體： ⑴細(xì)菌的質(zhì)粒 ⑵ λ 噬菌體衍生物或某些動(dòng)植物病毒 ? 常用的載體：質(zhì)粒 能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制 有切割位點(diǎn) 有標(biāo)記基因的存在，可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基鑒別 思考與探究 P7 （ 2） 為什么限制酶不剪切細(xì)菌本身的 DNA？ 通過(guò)長(zhǎng)期的進(jìn)化，細(xì)菌中含有某種限制酶的細(xì)胞，其 DNA分子中或者 不具備 這種限制酶的
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