11dna重組技術的基本工具用(編輯修改稿)
2025-03-22 22:53 本頁面
【文章內容簡介】 G…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 不同來源的 DNA片段混合 將不同種來源的 DNA片段連接起來 生物 A基因片段 生物 B基因片段 ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 酶切 ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… ……G AATTC…… ……CTTAA G…… 同一種 2：基因工程的 指 “ DNA連接酶 ” “ ” 作用： 連接“梯子”斷口的“扶手”而非“梯子”中間的“踏板”。 形成磷酸二酯鍵 其作用與限制酶相反，作用點相同 ③類型： 類型 EcoliDNA連接酶 T4DNA連接酶 來源 功能 大腸桿菌 T4噬菌體 恢復 磷酸 二酯鍵 只能連接 黏性末端 能連接 黏性末端 和平末端 (效率較低 ) 相同點 差別 可把黏性末端之間的 縫隙“縫合” 起來， Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 T4 DNA連接酶 還可把 平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低 T4DNA連接酶 三、“分子運輸車” —— 基因進入受體細胞的載體 ⒈載體需要的條件： ⑴ 有 1~多個限制酶切點 ⑵對受體細胞無害 ⑶導入基因 能在受體細胞中復制、表達 ⑷ 有某些標記基因，便于篩選 ⒉常用運載體： ⑴細菌的質粒 ⑵ λ 噬菌體衍生物或某些動植物病毒 ? 常用的載體：質粒 能復制并帶著插入的目的基因一起復制 有切割位點 有標記基因的存在，可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基鑒別 思考與探究 P7 （ 2） 為什么限制酶不剪切細菌本身的 DNA？ 通過長期的進化，細菌中含有某種限制酶的細胞，其 DNA分子中或者 不具備 這種限制酶的
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