11《dna重組技術(shù)的基本工具》用-文庫(kù)吧
2025-02-22 22:53 本頁(yè)面
【正文】 這個(gè)特點(diǎn)說(shuō)明了： 酶具有專一性 O 尋根問底 ? 你能推測(cè)限制酶存在于原核生物中的作用是是什么嗎？ 原核生物易受自然界外源 DNA的入侵 ，但生物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了一套完善的防御機(jī)制，以防止外來(lái)病原物的侵害。 限制酶 就是細(xì)菌的一種 防御性工具 ，當(dāng)外源DNA侵入時(shí)，會(huì)利用限制酶 將外源 DNA切割掉，以保證自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源 DNA、 使之失效 ，從而達(dá)到 保護(hù)自身 的目的。 ⒉種類與命名： 現(xiàn)在已經(jīng)從約 300種微生物中分離出了約 4000種限制性內(nèi)切酶 (限制酶 )。 EcoRⅠ SmaⅠ 粘質(zhì)沙雷氏桿菌 （ Serratia marcesens） 大腸桿菌 （ Escherichia coli R） 練習(xí)：流感嗜血桿菌的 d菌株( Haemophilus influenzae d )中先后分離到 3種限制酶，則分別命名為 : HindⅠ 、 HindⅡ 和 HindⅢ ? 限制酶的識(shí)別序列： 能被限制性內(nèi)切酶特異性識(shí)別的切割部位都具有回文序列 ： 在切割部位，一條鏈 正向 讀的堿基順序與另一條鏈 反向 讀的順序完全 一致 。 EcoRⅠ ? 什么叫黏性末端？ 被限制酶切開的 DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè) 伸出的核苷酸 ，它們之間正好 互補(bǔ)配對(duì) ，這樣的切口叫 黏性末端 。 SmaⅠ 平末端 平末端 ? 要想獲得某個(gè)基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性 (平 )末端？ 要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性 (平 )末端。 ? 如果把兩種來(lái)源不同的 DNA用同一種限制酶來(lái)切割，會(huì)怎樣呢？ 會(huì)產(chǎn)生 相同的黏性 (平 )末端 ，然后讓兩者的黏性 (平 )末端 黏合 起來(lái)，就似乎可以合成重組的 DNA分子了。 思考 ? ……GAATTC…… ……CTTAAG…… ……GAATTC…… ……CTTAAG…… EcoRⅠ ……G AATTC…… ……CTTAA
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