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生產菌種的擴大培養(yǎng)與保藏培訓課程(編輯修改稿)

2025-02-26 21:42 本頁面
 

【文章內容簡介】 得較好,而斜面上部由于水分迅速蒸發(fā)呈干疤狀,孢子稀少。在氣溫高含濕度大的地區(qū),斜面孢子長得慢,主要由于試管下部冷凝水多而不利于孢子的形成。從表中看出相對濕度在40%~45%時孢子數量最多,且孢子顏色均勻,質量較好。 相對濕度( %) 斜面外觀 活孢子計數 (億 /支 ) 2536 4045 上部稀薄 ,下部略黃 上部薄 ,中部均勻發(fā)白 一片白 ,孢子豐富 不同相對濕度對龜裂鏈霉菌斜面生長的影響 22 3,培養(yǎng)時間和冷藏時間 ( 1)培養(yǎng)時間 ? 一般來說,衰老的孢子不如年輕的孢子,因為衰老的孢子已在逐步進入發(fā)芽階段,核物質趨于分化狀態(tài)。過于衰老的孢子會導致生產能力的下降。 ? 措施:孢子培養(yǎng)的時間應該控制在孢子量多、孢子成熟、發(fā)酵產量正常的階段終止培養(yǎng)。 23 ( 2)冷藏時間 ? 斜面冷藏對孢子質量的影響與孢子成熟程度有關。如土霉素生產菌種孢子斜面培養(yǎng) 4天左右即于 4?C冰箱保存,發(fā)現冷藏 7~8天菌體細胞開始自溶。而培養(yǎng) 5天以后冷藏, 20天未發(fā)現自溶。 ? 冷藏時間對孢子的生產能力也有影響。例如在鏈霉素生產中,斜面孢子在 6? C冷藏兩個月后的發(fā)酵單位比冷藏一個月降低 18%,冷藏 3個月后降低 35%。 24 4,接種量 ? 接種量大小影響到培養(yǎng)基中孢子的數量,進而影響菌體的生理狀況。 25 二、影響種子質量的因素及控制 ? 孢子的質量 ? 培養(yǎng)基 ? 培養(yǎng)條件 ? 種齡 ? 接種量 26 1,培養(yǎng)基 ? 營養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要 – 選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長的培養(yǎng)基; – 營養(yǎng)上要易于被菌體直接吸收和利用; – 營養(yǎng)成分要適當豐富和完全,氮源和維生素含量要高 ? 營養(yǎng)成分要盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基相近。 27 2,培養(yǎng)條件 ( 1)溫度 ( 2)通氣量 在種子罐中培養(yǎng)的種子除保證供給易被利用的培養(yǎng)基外,有足夠的通氣量可以提高種子質量。例如,青霉素的生產菌種在制備過程中將通氣充足和不足兩種情況下得到的種子分別接入發(fā)酵罐內,它們的發(fā)酵單位可相差 1倍。但也有例外,例如土霉素生產菌,一級種子罐的通氣量小對發(fā)酵有利。 28 3,種齡 ? 種齡:是指種子罐中培養(yǎng)的菌絲體開始移入下一級種子罐或發(fā)酵罐時的培養(yǎng)時間。 ? 通常種齡是以處于生命力極旺盛的對數生長期,菌體量還未達到最大值時的培養(yǎng)時間較為合適。時間太長,菌種趨于老化,生產能力下降,菌體自溶;種齡太短,造成發(fā)酵前期生長緩慢。 ? 不同菌種或同一菌種工藝條件不同,種齡是不一樣的,一般需經過多種實驗來確定。嗜堿性芽孢桿菌生產堿性蛋白酶,12小時最好。 29 4,接種量 ? 接種量:是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。 ? 接種量的大小決定于生產菌種在發(fā)酵罐中生長繁殖的速度,采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌絲繁殖達到高峰的時間,使產物的形成提前到來,并可減少雜菌的
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