微生物遺傳變異與菌種保藏增加內(nèi)容(編輯修改稿)
2025-02-10 00:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 螺旋 中，加寬間距，引起堿基增加 。 t 3. 誘變程序： 原始菌種 ? 原菌種特性鑒定 ? 純化 ? 斜面 /肉湯 ? 培養(yǎng)單孢子 /單細胞懸液 ? 誘變劑處理 ? 計算存活率 ?平板分離 ? 觀察形態(tài)變異，挑單菌落 ? 移至斜面 ? 初篩 ? 復(fù)篩 ? 小試 ? 良種保藏 ? 中試 4 誘變的主要環(huán)節(jié) （ 1）誘變劑的選擇 （ 2）出發(fā)菌株的選擇 （ 3） 單孢子或單細胞懸液的制備 （ 4）設(shè)計和采用效率高的篩選方案和方法 （ 1）誘變劑的選擇： 1）了解誘變劑的性質(zhì)、作用機理和使用方法。 2）處理方式 A、 單一因子處理：先后使用 B、 復(fù)合因子處理：兩種以上因素同時使用單一 因子重復(fù)使用。 3）處理劑量：測致死率。 方法：平板菌落計數(shù)法、 紙片法 一般殺菌率為 70%左右。 （ 2）出發(fā)菌株： 育種的原始菌種應(yīng)具備： 1）對誘變劑的敏感性高； 2）生產(chǎn)中選育過的自發(fā)變異菌株； 3）本身具有一些有利性狀； 4）對代謝產(chǎn)物有一定積累； 5）已經(jīng)發(fā)生過某些變異。 （ 3）單孢子或單細胞懸液的制備 1）必要性：單細胞可均勻地接觸誘變劑，避免出現(xiàn)不 純的菌落 —— 菌種退化。 2）制備： 物理誘變劑 —— 生理鹽水（ %NaCl) 化學(xué)誘變劑 —— 緩沖液。 3）方法： 三角瓶內(nèi)加 玻璃珠打散 1015min。 加０ .3%吐溫 80（表面活性劑），用無菌脫脂 棉過濾。 4）濃度： 細菌、放線菌 108個 /ml 霉菌、酵母菌 106個 /ml （ 4）設(shè)計和采用效率高的篩選方案和方法 1）初篩： 平板上做定性、半定量的測定，觀察突變株的 生理效應(yīng)范圍。 方法 梯度平板法（抗性菌株） 紙片法（抗性菌株） 透明圈法（淀粉酶產(chǎn)生菌株等） 變色圈法（氨基酸生產(chǎn)菌株） 2）復(fù)篩 ：（見 P250） 較精確的生物化學(xué)分析方法 — 做搖瓶測定 三、營養(yǎng)缺陷型的篩選 （一）概念 （二）篩選方法 （一）概念 1. 三種遺傳型個體 篩選用的培養(yǎng)基 1. 三種遺傳型個體 （ 1）營養(yǎng)缺陷型（ auxotroph） ： 經(jīng)誘變產(chǎn)生的一些合成能力出現(xiàn)缺陷，而必須在培養(yǎng)基內(nèi)加入相應(yīng)有機養(yǎng)分才能正常生長的變異菌株。 如： lys
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