【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 暗視野顯微鏡檢查，每 400 倍暗視野下不少于 50 條，運(yùn)動(dòng)活潑并無(wú)自凝者可作顯凝抗原。 2．操作方法 血清 56℃ 水浴滅活 30 分后，用生理鹽水稀釋，健康人以 1∶ 早期病人以 1∶ 50、恢復(fù)期病人以 1∶ 100 開始，做倍比稀釋。取 15 個(gè)代表株的培養(yǎng)液依次加入倍比的稀釋血清孔。搖勻后 37℃ 孵育 ～ 2h。用接種環(huán)挑取反應(yīng)液及對(duì)照，放置載物玻片上暗視野顯微鏡下觀察凝集情況，測(cè)定其凝集滴度。凝集滴度按原血清稀釋倍數(shù) 2 計(jì)算。 3．終點(diǎn)凝集滴度的判定 以出現(xiàn)＋＋凝集 (即視野中 50%鉤體凝集 )的血清最高稀釋度作為終點(diǎn)凝集滴度。 161 附件 2 間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (間接 ELISA) 1．操作步驟： 血清用 PBS稀釋液按 1:400、 1:800、 1:1600、 1:3200稀釋。 取包被鉤體抗原的酶標(biāo)板，將稀釋好的陽(yáng)性血清、陰性血清及樣本血清分別加入酶標(biāo)板孔中，每孔 100μl，同時(shí)加入 2孔空白對(duì)照 (PBS)。 37℃ 60分鐘，棄去孔中液體。 洗板，于酶標(biāo)板每孔加入洗滌液 250μl，洗板 3次。 每支酶標(biāo)羊抗人 IgG用 三蒸水充分溶解均勻后，再用 PBS按 1:50 稀釋，每孔加稀釋好的酶結(jié)合物 100μl。放置 37℃ 40分鐘。 洗板：洗板 4次 (方法同 )。 顯色與終止：加底物液 A、底物液 B各 1滴。室溫避光顯色， 10分鐘后，每孔加終止液 1滴，終止反應(yīng)。 采用波長(zhǎng) 405nm的酶標(biāo)儀測(cè)定 OD值，陰性 OD值 判定界值。檢測(cè)樣本的 OD值 ≥此判定界值則為陽(yáng)性。 2．試劑配制： 2． 1 洗滌液 (PBST， )： NaCl KH2PO4 KCl Tween 20 硫柳汞 D2H2O至 1000ml 2． 2 稀釋液 (PBS， ): NaCl KH2PO4 KCl 硫柳汞 D2H2O至 1000ml 162 2． 3 底物液 A( ， %過(guò)氧化氫脲，pH ) 檸檬酸 .H2O 過(guò)氧化氫脲 D2H2O至 1000ml 250ml 2． 4底物液 B( 3`、 5`─四甲基聯(lián)苯胺， TMB，作用時(shí)終濃度 ) 2． 4． 1 TMB貯存液 TMB貯存液 (50mg/ml) TMB 150mg 二甲基亞砜 3ml 注意事項(xiàng)： TMB 不易 溶解，緩慢加入二甲基亞砜中并不斷搖晃或攪拌，水浴適當(dāng)加熱可加速溶解。 2． 4． 2 底物液 B 檸檬酸 .H2O EDTANa2 (EDTA) D2H2O至 1000ml 250ml TMB貯存液 (50mg/ml) 4ml 1ml 2． 5 終止液： 2M H2SO4 163 附件 3 分離培養(yǎng)鉤體方法 1 培養(yǎng)基制備方法 Korthof培養(yǎng)基成分和制備方法 成分 蛋白胨 (可用胰蛋白胨代替 ) 400mg 氯化鈉 (NaCl) 700mg 氯化鉀 (KCl) 20mg 碳酸氫鈉 (NaHCO3) 10mg 磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 120mg 碳酸氫二鈉 (12個(gè)結(jié)晶水 )(N2HCO3 .12H2O) 440mg 氯化鈣 (CaCl2) 20mg(如高壓 滅菌或煮沸后出現(xiàn)沉淀，可省去此成分 ) 蒸餾水 500ml 制法 20min過(guò)濾，校正 pH為 ，分裝于燒瓶?jī)?nèi)，每瓶 100ml， 15磅 30min高壓滅菌。 兔血清 56℃ 30min滅活。 將 8～ 10%。 Tepck ии培養(yǎng)基 (磷酸鹽緩沖溶液 )成分和制備方法 母液 1/15mol/L 12g/500ml 蒸餾水 磷酸緩沖液 1/15mol/L KH2PO4 取 1/15mol/L 80ml、 1/15mol/L KH2PO4 20ml，混勻，調(diào)整～ ,加入蒸餾水 900ml 混勻，分裝試管，并用 15 磅 30min高壓滅菌，再以無(wú)菌操作加入滅活兔血清最后濃度為 8～ 10%。 2 培養(yǎng)分離病原體 病人血液培養(yǎng)： 采集早期病人血液，無(wú)菌操作接種于 2～ 3管 Korthof培養(yǎng)管中，每管接種 1～3滴。血培養(yǎng)管置 28℃ 培養(yǎng)。每隔 5～ 7d取培養(yǎng)物暗視野顯微鏡下觀察有無(wú)鉤端螺旋體生長(zhǎng)，若有生長(zhǎng)，即 為分離陽(yáng)性。若未見生長(zhǎng)，需繼續(xù)培養(yǎng) 60d，仍不見鉤端螺旋體方作陰性處理。 ： 164 接取病后兩周以上的病人中段尿 30～ 50ml于無(wú)菌離心管中 3500～ 4000r/min離心 1h。取沉渣 ～ 接種于 2～ 4 管上述培養(yǎng)基中， 28℃ 孵育。每隔 5～7d取材鏡檢。為提高檢出率和減少污染，可在采集尿標(biāo)本的前一天晚上給病人服碳酸氫鈉 (NaHCO3)2～ 4g，同時(shí)，在培養(yǎng)基中加入 100～ 400μg/ml 5氟脲嘧啶或1/2020的磺胺嘧啶。 動(dòng)物腎臟培養(yǎng)： 無(wú)菌操作，采集新鮮動(dòng)物腎臟 (包膜 完整 )，剪取米粒大小接種于 2～ 3 管Korthof 培養(yǎng)管中。置 28℃ 培養(yǎng)。每隔 5～ 7d 取培養(yǎng)物暗視野顯微鏡下觀察有無(wú)鉤端螺旋體生長(zhǎng)，若有生長(zhǎng)，即為分離陽(yáng)性。若未見生長(zhǎng)，需繼續(xù)培養(yǎng) 60d，仍不見鉤端螺旋體方作陰性處理。 3． 菌株分群、分型： 應(yīng)用分群血清與新分離的鉤端螺旋體作凝集試驗(yàn)，確定菌群。應(yīng)用交叉凝集素吸收試驗(yàn)或分型因子血清來(lái)確定菌型。 范文最新推薦 165 高校畢業(yè)生工作總結(jié) [高校畢業(yè)生工作總結(jié) ]作為一名即將面臨畢業(yè)的大四學(xué)生，我將我的個(gè)人情況作如下總結(jié)： （一）政治思想 在馬列主義、毛澤東思想、鄧小平理 論以及 jzm 同志 。三個(gè)代表 。的正確指引下，我逐漸成長(zhǎng)為一名有理想、有道德、有文化、有紀(jì)律，面向現(xiàn)代化、面向世界、面向未來(lái)的當(dāng)代大學(xué)生，高校畢業(yè)生工作總結(jié)。作為合格的大學(xué)生，我堅(jiān)決擁護(hù)中國(guó)共產(chǎn)黨領(lǐng)導(dǎo)的多黨合作和政治協(xié)商制度；堅(jiān)決擁護(hù)社會(huì)主義；同時(shí)，始終堅(jiān)持以辯證唯物主義方法分析和處理問(wèn)題。我在學(xué)習(xí)科技文化知識(shí)的同時(shí)，也在不斷努力提高自身的思想道德素質(zhì)，以適應(yīng)未來(lái)社會(huì)的需要。 （二）道德品質(zhì) 我始終以愛國(guó)守法、明禮誠(chéng)信、團(tuán)結(jié)友善、勤儉自強(qiáng)、敬業(yè)奉獻(xiàn)作為衡量道德的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)要求自己。在社會(huì)生活中，我努力做到文明禮 貌、助人為樂、愛護(hù)公物、保護(hù)環(huán)境、遵紀(jì)守法；在家庭生活中，也堅(jiān)持孝敬父母、勤儉節(jié)約、團(tuán)結(jié)鄰里。 在走上工作崗位后，我也將以愛崗敬業(yè)、誠(chéng)實(shí)守信、辦事公道、服務(wù)群眾、奉獻(xiàn)社會(huì)來(lái)要求自己。 （三）學(xué)習(xí)工作成績(jī) 四年來(lái)，在師友的嚴(yán)格教益及個(gè)人的努力下，我具備了扎實(shí)的專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)，系統(tǒng)地掌握了學(xué)、學(xué)、學(xué)和 x 學(xué)四大主干課程及其它相關(guān)理論知識(shí)；熟悉涉外工作常用禮儀；能熟練操作范文最新推薦 166 計(jì)算機(jī)辦公軟件。同時(shí)，我利用課余時(shí)間廣泛地涉獵了大量書籍，不但充實(shí)了自己，也培養(yǎng)了自己多方面的技能。此外，我還積極地參加各種社會(huì)實(shí)踐活動(dòng)，抓住每 一個(gè)機(jī)會(huì)鍛煉自己。 （四）作風(fēng)紀(jì)律 大學(xué)四年，我深深地感受到，與優(yōu)秀學(xué)生共事，使我在競(jìng)爭(zhēng)中獲益；向?qū)嶋H困難挑戰(zhàn)，讓我在挫折中成長(zhǎng)。祖輩們教我勤奮、盡責(zé)、善良、正直；大學(xué)培養(yǎng)了我實(shí)事求是、開拓進(jìn)取的作風(fēng)。在實(shí)踐中，我形成了團(tuán)結(jié)服從、顧全大局的行為準(zhǔn)則。同時(shí) ,中華民族的優(yōu)秀傳統(tǒng)造就了我誠(chéng)實(shí)善良、遵紀(jì)守法的品質(zhì)。嚴(yán)謹(jǐn)?shù)淖黠L(fēng)和嚴(yán)明的紀(jì)律成為我成功走向社會(huì)、走上工作崗位的有力保障，工作總結(jié)《高校畢業(yè)生工作總結(jié)》。 （五）主要不足 作為一名尚未正式步入社會(huì)的學(xué)生，我深知自己存在諸多不足。目前，我最大的劣勢(shì)就是缺 乏長(zhǎng)期從事某種穩(wěn)定工作的經(jīng)驗(yàn)，也正因?yàn)槿绱耍袝r(shí)我會(huì)對(duì)自己缺乏信心，在處理問(wèn)題時(shí)，往往過(guò)于謹(jǐn)慎、保守，不敢輕易、大膽地嘗試新方法。但我同時(shí)也相信，這種現(xiàn)象會(huì)隨著我走上工作崗位逐漸得到改善。另外，可以肯定的是，我自身一定還存在著其他我尚未意識(shí)到的不足。我真誠(chéng)地希望，在今后的工作中，領(lǐng)導(dǎo)和同事們能夠幫助我，及時(shí)指出我暴露出來(lái)的缺陷，我一定虛心接受，及時(shí)改正；同時(shí)，我會(huì)在工作中不斷充實(shí)和改造自己，努力進(jìn)取、鉆研業(yè)務(wù)，早日成為國(guó)家的棟梁之才。 范文最新推薦 167 本人被派往三明市大田縣屏山鄉(xiāng)黨政綜合辦公室參加 。三支一扶 。工作一年 來(lái)，秉持 。到農(nóng)村去，到基層去，到人民最需要的地方去 。的理念，廣泛深入群眾，主動(dòng)向領(lǐng)導(dǎo)學(xué)習(xí)，向干部同事學(xué)習(xí)，向廣大人民群眾學(xué)習(xí)，勤奮工作，刻苦鍛煉，認(rèn)真做到 。五個(gè)為 。：一是有為。做到工作有目標(biāo)、有規(guī)劃，按計(jì)劃朝目標(biāo)序時(shí)推進(jìn)，杜絕盲目行事、虛度光陰的不良行為，手腳麻利、快事快為，當(dāng)天的任務(wù)當(dāng)天完成，不拖拉懶散，努力實(shí)現(xiàn)事有所為、為有所果。二是實(shí)為。就是做事情腳踏實(shí)地、實(shí)事求是，養(yǎng)成不恥下問(wèn)的良好習(xí)慣，拒絕盲從和憑直覺做事，做到公平公正、不偏不倚，樹立為人民服務(wù)的公仆意識(shí)，深入基層、接近群眾，努力為人民群眾辦事。 三是能為。就是不斷加強(qiáng)學(xué)習(xí)，主動(dòng)向領(lǐng)導(dǎo)學(xué)習(xí)、向同事學(xué)習(xí)、向廣大人民群眾學(xué)習(xí)，逐步積累基層工作經(jīng)驗(yàn)，將所學(xué)到的知識(shí)與實(shí)踐緊密結(jié)合起來(lái)，努力克服作風(fēng)漂浮、高傲自大、心浮氣躁的消極意識(shí)形態(tài)。四是敢為。敢為不是亂為，而是事事做到比領(lǐng)導(dǎo)快半拍，領(lǐng)導(dǎo)的決策意圖是什么，大概什么時(shí)候會(huì)出臺(tái)新計(jì)劃，都具備超前意識(shí)并做好適當(dāng)準(zhǔn)備，這樣才沒有手足無(wú)措，真正做到了超前不搶前。五是新為。就是不斷解放思想、大膽創(chuàng)新，著力培養(yǎng)創(chuàng)新思維和改革意識(shí)，敢于向領(lǐng)導(dǎo)提出自己的建議和看法，大膽建言獻(xiàn)策但不決策，遇事廣思維、多角度分析，挖掘亮點(diǎn)、抓住特色。一年來(lái)，在各級(jí)黨委政府、各級(jí) 。三支一扶 。辦、各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)、干部同事、廣大人民群眾的大力關(guān)心和支持下，通過(guò)自己的不懈努力和辛勤工作，取得了一定成績(jī)： 一、強(qiáng)化自身思想作風(fēng)建設(shè) 范文最新推薦 168 在改造客觀世界的同時(shí)，更加注重改變自己的主觀世界，工作以來(lái)，一直保持讀書、看報(bào)，關(guān)注科技發(fā)展動(dòng)態(tài)的習(xí)慣，認(rèn)真學(xué)習(xí) 。三個(gè)代表 。重要思想和 。十七大 。精神，牢固樹立和落實(shí)科學(xué)發(fā)展觀，并把學(xué)習(xí)和實(shí)際工作結(jié)合起來(lái)，聯(lián)系群眾，為民辦實(shí)事，時(shí)刻把群眾疾苦掛在心上，牢記服務(wù)宗旨加深群眾感情，端正對(duì)群眾的態(tài)度，積極投身到為人民服務(wù)的實(shí)踐中去 ，一切為農(nóng)民著想，為農(nóng)民造福。 二、切實(shí)增強(qiáng)為民服務(wù)本領(lǐng) 利用業(yè)余時(shí)間深入群眾開展扶貧工作。實(shí)現(xiàn)科技致富，人的素質(zhì)是關(guān)鍵，當(dāng)前人民群眾盼的是致富，要的是服務(wù)，求的是技術(shù)，希望我們能指出致富門路，人的素質(zhì)顯得更為重要。為此，我努力把學(xué)習(xí)放在十分突出的位臵，深入村、組指導(dǎo)生產(chǎn)，增加社