九血清學(xué)試驗及項目管理知識分析(編輯修改稿)
2025-02-13 15:34 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ?當抗原或抗體過剩時，由于過剩方的結(jié)合價得不到飽和，只能形成較小復(fù)合物，不能出現(xiàn)可見反應(yīng)。 免疫學(xué) 陳功軒 血清學(xué)試驗的影響因素 影響抗原抗體反應(yīng)的因素較多 ，主要有兩方面 :一方面是受到抗原 、抗體的自身因素的影響 。另一方面是受到電解質(zhì) 、 酸堿度 、 溫度及時間等實驗環(huán)境因素的影響 。 一、反應(yīng)物自身因素 抗原 :理化性狀、表位種類和數(shù)目 抗體 :來源、特異性、親和性、效價 ?抗原的理化性狀、抗原決定簇的數(shù)目和種類均可影響血清學(xué)反應(yīng)結(jié)果 例如，可溶性抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)沉淀，而顆粒性抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)則出現(xiàn)凝集 抗原 ? 抗體是血清學(xué)反應(yīng)中的關(guān)鍵因素 ， 對反應(yīng)的影響表現(xiàn)在以下三個方面 : ? (1)來源 :來自不同動物的免疫血清，其反應(yīng)性有差異。 家兔等大多數(shù)動物的免疫血清具有較寬的等價帶，通常在抗原過量時才易出現(xiàn)可溶性免疫復(fù)合物 。馬等大動物和人的免疫血清等價帶較窄，少量的抗原或抗體過剩，均可形成可溶性免疫復(fù)合物 抗體 (2)特異性與親和力 : ? 特異性和親和力是影響血清學(xué)反應(yīng)的兩個關(guān)鍵因素 ， 它們共同影響試驗結(jié)果的準確程度 。 用于診斷的試劑必須盡量選用特異性高 、 親和力強的抗體 ，才能保證和提高試驗結(jié)果的可靠性 。 （ 3）濃度 : 抗體的濃度往往是與抗原相對而言。合適的濃度才出現(xiàn)明顯的反應(yīng)現(xiàn)象。因此許多試驗應(yīng)進行抗體預(yù)滴定，找出最適反應(yīng)濃度。 免疫學(xué) 陳功軒 電解質(zhì) : 生理鹽水或緩沖液 酸堿度 : pH6～ pH9 溫 度 : 15℃ ～ 40℃ ， 37℃ 最適 二、環(huán)境因素 免疫學(xué) 陳功軒 ? 抗原抗體結(jié)合后由親水性變?yōu)槭杷?，此時易受電解質(zhì)影響 ， 如有適當濃度電解質(zhì)存在 ， 就會使抗原抗體失去一部分電荷而相互凝集或沉淀 ， 出現(xiàn)可見反應(yīng) 。若無電解質(zhì)存在 ， 則不出現(xiàn)可見反應(yīng) 。 免疫學(xué) 陳功軒 ? 通常在血清學(xué)試驗中，以 作為抗原抗體的稀釋液及反應(yīng)液，其中 Na+和 Cl可分別中和膠體顆粒上的電荷，使膠體顆粒的電勢下降，形成可見的沉淀物或凝集物。但如果電解質(zhì)濃度過高，則會出現(xiàn)非特異性蛋白質(zhì)沉淀，即鹽析。 免疫學(xué) 陳功軒 ? 合適的 pH是抗原抗體反應(yīng)的必要條件之一。 血清學(xué)試驗一般以 pH69為宜 ，超出此范圍可影響抗原和抗體的理化性質(zhì)，導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果。當 pH為 3左右時，接近細菌抗原的等電點，可出現(xiàn)非特異性酸凝集，造成假象。 免疫學(xué) 陳功軒 ? 抗原抗體反應(yīng)一般在 15一 40℃ 范圍內(nèi)均可進行 ， 最適溫度為 37℃ 。 在此范圍內(nèi)溫度越高 ， 分子運動速度加快 ， 增加抗原抗體接觸機會 ， 反應(yīng)速度越快 ， 但亦容易引起復(fù)合物解離 。溫度越低 ， 反應(yīng)速度緩慢 ， 但抗原抗體結(jié)合牢固 ， 易于觀察 。 某些特殊的抗原抗體反應(yīng)需要特定的溫度 ， 如冷凝集素在 4℃ 時與紅細胞結(jié)合 ， 20℃ 以上反而解離 。 免疫學(xué) 陳功軒 免疫學(xué) 陳功軒 作用時間
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