實驗動物質量監(jiān)測報告(編輯修改稿)
2025-01-28 00:07 本頁面
【文章內容簡介】 現雜合型 ， 應考慮有否發(fā)生遺傳突變 。 為了證實此點 ， 往往需要根據動物編號查詢該只動物同窩兄妹或雙親的基因標記表型 。 如遺傳突變發(fā)生在親代 ， 則同窩兄妹均應為雜合型或分離產生不同的表型 。 30 如果在同窩兄妹或雙親中該基因標記的表型與遺傳概貌圖一致 ， 應考慮被測個體發(fā)生了遺傳突變 。 在檢查時如同時發(fā)現其他基因標記的表型與遺傳概貌圖不符 ， 無論是雜合型還是純合型均應考慮發(fā)生了遺傳污染 ， 應立即淘汰換種 。 遺傳突變如無特殊保留價值 ， 在剔除突變的個體后 ， 整個品系可以繼續(xù)保存；如有保存價值 ， 可將突變個體單獨培育成同源突變近交系 。 31 第二節(jié) 微生物學與寄生蟲學監(jiān)測 如何控制微生物和寄生蟲 ， 是實驗動物標準化的主要內容之一 。 一般而言 ， 科研中使用的實驗動物 ， 其微生物和寄生蟲的控制級別越高 ， 其結果就越精確 、 越可靠 。 32 一、監(jiān)測意義 1． 對實驗動物進行微生物 、 病毒與寄生蟲的監(jiān)控 ， 對保證實驗研究的順利進行和工作人員的身體健康具有十分重要的意義 。 實驗動物被集中飼養(yǎng) ， 極易導致疾病的爆發(fā)與流行 。 實驗動物疾病的爆發(fā) ， 除造成動物死亡外 ， 還會干擾實驗的順利進行 ， 引起生物制品的污染 ， 對人類健康產生危害 。 33 2． 對實驗動物飼養(yǎng)設施的監(jiān)測 ， 為確保這些設施能否控制微生物污染提供依據 。 3． 對引進的實驗動物進行檢疫 ， 避免病原體入侵原有的動物群 。 4． 如動物群發(fā)生疾病 ， 為了確證病原 ， 對患病動物進行病原學診斷 ， 積累對疾病的認識 ， 收集菌株和毒株 ， 進一步研究病原 ，為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株 。 34 二、監(jiān)測方法 （一）實驗動物病毒學檢測方法 1．血清學檢測 適用于各級各類實驗動物的經常性檢測和疫情普查。常用方法有：酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)、免疫熒光試驗 (IFA)、免疫酶染色試驗 (IEA)、血凝試驗 (HA)、血凝抑制試驗 (HI)、病毒中和試驗、補體結合試驗、瓊脂擴散試驗。 35 2． 病原學檢測 適用于動物群中有疾病流行 ， 需要檢出病毒或確認病毒存在的情況 。 檢測方法有：病毒分離與鑒定 ， 病毒顆粒 、 抗原或核酸的檢出 ， 潛在病毒的激活 ， 抗體產生試驗等 。 例如：采用 HA或 HI方法檢查患病動物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原；采用聚丙烯酰胺凝膠電泳 (PAGE)檢查病毒基因組；采用核酸分子雜交技術或聚合酶鏈反應 (PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸 。 36 （ 二 ） 實驗動物細菌學檢測方法 最常用的方法是病原菌的分離與培養(yǎng)或進行動物接種 。 部分病原菌 ， 如：鼠傷寒沙門菌 、 鼠棒狀桿菌 、 布氏桿菌 、 沙門菌 、 氣管敗血波氏桿菌等 ， 可采取血清學方法 ， 但仍需結合分離培養(yǎng)結果最后做出診斷 。 對于泰澤菌 ， 由于不能在人工培養(yǎng)基上生長 ， 因此宜采用組織壓片 、鏡檢的方法進行檢查 ， 并結合病理檢查結果最后做出診斷 。 37 （ 三 ） 實驗動物真菌學檢測方法 目前主要采用沙氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng) 。 皮膚真菌一般在 25℃ 培養(yǎng) ， 深部真菌在 37℃ 培養(yǎng) 。不同的真菌具有一定的菌落特點 ， 鏡下染色檢查可進行種屬鑒定 ， 有時 ， 還需借助于生物化學反應結果和免疫學方法進行最后診斷 。 38 （ 四 ） 實驗動物寄生蟲學檢測方法 1． 體外寄生蟲 肉眼觀察法 、 透明膠紙粘取法 、 拔毛取樣法 、皮屑刮取法 、 黑背景檢查法 、 解剖鏡下通體檢查法等 ， 主要檢查蚤 、 虱 、 螨等節(jié)肢動物 。 39 2． 體內寄生蟲 主要檢查蠕蟲和原蟲 ， 可用直接涂片法 (糞便 、 血液 、 臟器 、 腸內容物 )、 飽和鹽水漂浮法或沉淀法 、透明膠紙肛門周圍粘取法 、 組織或器官剖面壓印法 、 病變組織切片或壓片法 、 尿液的離心法 (如查鼠膀胱線蟲 )等 。 實驗動物的微生物 、 寄生蟲檢測具體操作方法詳見 《 國家標準實驗動物微生物學和寄生蟲學的檢測方法 （ 嚙齒類和兔類 ） 》 （ GB/200 1） 。 40 三、監(jiān)測要求 1． 選定監(jiān)測項目 任何一種實驗動物都有許多致病性微生物 、 寄生蟲 ， 結合具體情況選擇合適的檢測項目 ， 既達到保證動物質量的目的 ， 又可節(jié)省人力物力 。我國經過十多年來對各地實驗動物感染病原微生物 、 寄生蟲情況的調查 ， 結合其他國家的規(guī)定和經驗 ， 制定了我國嚙齒類和兔類微生物學 、寄生蟲學等級標準 ， 貓 、 犬 、 猴等中型實驗動物 ， 衛(wèi)生部醫(yī)學實驗動物管理委員會亦有初步規(guī)定 。 41 2． 采樣數量和頻度 檢測結果的準確性 ， 要采取合適的動物數量 。采樣動物數可根據動物群體的污染程度而有所不同 。 按照國家標準規(guī)定 ， 動物數量超過 100只的生產繁殖單元取樣如下：普通級動物不能少于 10只；清潔級動物檢測 5～ 10只；飼養(yǎng)于小隔離罩內的無菌動物和無特定病原體動物隨機抽檢 2只；飼養(yǎng)于生產繁殖單元的抽檢 5～ 10只 。 42 除了采樣的數量 ， 還必須考慮到檢測的間隔時間 。 一般來說 ， 一旦病原體侵入動物群體引起感染 ， 初期分
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