【正文】 一個切口 ， 使 DNA裂解為片斷 。 如中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) GB；T149232023公布 9種常用近交系大鼠生化位點標(biāo)記基因 (表 52)。 11 （ 二 ） 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng) 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的原理為：異源動物或遺傳上有差異個體的淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)一定時間后 ， 這些細(xì)胞會增殖 ， 甚至進(jìn)一步裂解 。 ?每一個實驗動物育種機(jī)構(gòu)都應(yīng)當(dāng)認(rèn)真執(zhí)行良好的育種制度，完善地保持育種記錄，基礎(chǔ)群應(yīng)有系譜記錄。 5 實驗結(jié)果準(zhǔn)確性、規(guī)律性、重復(fù)性的保證 6 實驗動物質(zhì)量監(jiān)測主要包括以下幾個方面： ?遺傳質(zhì)量 ?微生物與寄生蟲質(zhì)量 ?飼料質(zhì)量 ?環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測。 7 第一節(jié) 遺傳質(zhì)量監(jiān)測 ?實驗動物的 遺傳背景與反應(yīng)特性 ，是影響實驗結(jié)果的重要因素。要做到以上要求，最重要的因素就是要有訓(xùn)練有素、經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員。 此反應(yīng)結(jié)果可在 7～ 9天獲得 ， 定期地從群體中抽取足夠量的動物進(jìn)行監(jiān)測能夠維護(hù)實驗動物的品質(zhì) 。 14 表 52 常用近交系大鼠生化位點標(biāo)記基因 Strain Akp1 Cs2 Es1 Es3 Es4 Es6 Es8 Es9 F344/N a a a a b a b a LOU/C a a a a b b b a SHR a b a b a a b a WKY b b a d b a a c LEW/M a a a d b a b c ACI b a b a b b b a 15 四、骨骼形態(tài)特征監(jiān)測 ?常采用 “ 下頜骨分析法 ” 來鑒別和檢測大小鼠的亞系變異 。 這些片斷的長度在動物群體中存在變異 ， 造成多態(tài)現(xiàn)象 。 采用夾在這些序列兩端的引物 ， 通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR)和電泳 ， 就能觀察到這些位點的差異 ， 從而區(qū)分不同的品系 。 二是用較短的隨機(jī)擴(kuò)增引物或小衛(wèi)星引物 ， 通過 PCR而獲得的 DNA指紋 。 而 RAPD技術(shù) ， 由于引物可任意改變 ， 有可能找到任何一個個體特異的 RAPD標(biāo)記 ， 從而為實驗動物的遺傳檢測和分析提供一個十分有效的工具 。 29 3． 遺傳突變 (mutation) 遺傳突變在哺乳類動物中的頻率為 105。 一般而言 ， 科研中使用的實驗動物 ， 其微生物和寄生蟲的控制級別越高 ， 其結(jié)果就越精確 、 越可靠 。常用方法有：酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)、免疫熒光試驗 (IFA)、免疫酶染色試驗 (IEA)、血凝試驗 (HA)、血凝抑制試驗 (HI)、病毒中和試驗、補(bǔ)體結(jié)合試驗、瓊脂擴(kuò)散試驗。 皮膚真菌一般在 25℃ 培養(yǎng) ， 深部真菌在 37℃ 培養(yǎng) 。采樣動物數(shù)可根據(jù)動物群體的污染程度而有所不同 。 引種的動物則需有檢疫隔離期 ， 小鼠 、 大鼠和豚鼠 l～ 7天 ， 兔 21天 ， 犬 、 貓 21～ 28天 ， 猴 l～9周 。 但是無論其形狀如何 ，在實驗動物飼料加工生產(chǎn)過程中都應(yīng)注意生產(chǎn)規(guī)格及其產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn) 。 48 3． 實驗動物的飼料管理 實驗動物飼料管理是指從飼料原料選擇 、生產(chǎn)加工到成品以及生產(chǎn)過程中的蟲害 、 安全及衛(wèi)生管理的全過程 。尤其是維生素 C、 維生素 B 維生素 B6和維生素A等 ， 過熱會受到破壞 ， 而純化學(xué)性飼料比天然飼料更不穩(wěn)定 。 54 三、實驗動物飼料的檢測 飼料檢測是實驗動物飼料質(zhì)量管理必不可少的重要手段 。 2． 測定方法 分靜態(tài)和動態(tài)：靜態(tài)為在動物飼養(yǎng)前 ， 所有系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)時檢測；動態(tài)為飼養(yǎng)動物后 ，在正常飼養(yǎng)條件下檢測 。 2． 測定方法 在無動物的狀態(tài)下 ， 每 5～10m2放置一個直徑 9cm的血液瓊脂培養(yǎng)基 ， 敞開皿蓋暴露 30min， 蓋上皿蓋 ， 置于 37℃ 培養(yǎng)48～ 72h后 ， 計算培養(yǎng)皿內(nèi)菌落數(shù) 。 2． 測定方法 測定順序一般由低壓到高壓 ， 測定前將需要測定壓差的兩個區(qū)域封閉 ， 關(guān)閉所有的門 。 2． 測定方法 測量換氣次數(shù) ， 首先必須計算出換氣量 。 在測定溫度 、 濕度時 ， 空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)連續(xù)運轉(zhuǎn) ， 并做多點檢測 ， 如在外界空氣最冷和最熱時檢測最佳 。 66 一般動物室常采用 “ 田 ” 字形 、 9點模式 ，即在入口 、 中央 、 內(nèi)側(cè)相當(dāng)于動物飼養(yǎng)高度的上 、 中 、 下三層設(shè)置三個格測定 (50， 100，150cm)。 在一個以上進(jìn)氣口的房間 ， 要將各進(jìn)氣口合并計算 。 s1 62 六、氣流方向和速度測定 1． 儀器 發(fā)煙管 、 熱球式電風(fēng)速儀或數(shù)字顯示式風(fēng)速儀 。 檢測儀器 塵埃粒子計數(shù)器 。 58 二、照度測定 1． 儀器 便攜式照度計 。 我國實驗動物飼料質(zhì)量應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn) GBl49242023規(guī)定的根據(jù)實驗動物的不同種類 、 性別 、 年齡 、 體重和生理階段制定的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn) 。 如用環(huán)氧乙烷進(jìn)行滅菌 ， 熏蒸后必須在不低于 20℃ 的自然空氣中將殘余氣體揮發(fā) 。 常用飼料消毒方法有干熱 、 濕熱 、 輻照及藥物熏蒸等多種 ， 應(yīng)按飼養(yǎng)動物的不同要求和飼料種類以及所具備的條件來選擇 。 原料儲存：應(yīng)按原料種類 、 生產(chǎn)廠家 、 進(jìn)貨日期等分開保管 。 只有良好的營養(yǎng)才能使