酶的生產(chǎn)培訓知識(編輯修改稿)
2025-01-24 18:40 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 、提高酶產(chǎn)量的策略（一）菌種選育（一勞永逸） (1) 使誘導型變?yōu)榻M成型 —— 選育組成型突變株(2)使阻遏型變?yōu)槿プ瓒粜? 選育營養(yǎng)缺陷型突變株?解除反饋阻遏 選育結(jié)構(gòu)類似物抗性突變株?解除分解代謝物阻遏 —— 選育抗分解代謝阻遏突變株 2. 基因工程育種 退出（二） .通過條件控制提高酶產(chǎn)量（ 1）添加誘導物 選擇適宜的誘導物及濃度 :誘導物： 酶的作用底物 酶作用底物的前體 酶的反應產(chǎn)物 酶的底物類似物或底物修飾物等 IPTG/乳糖 纖維素 /纖維二糖誘導纖維素酶 退出（ 2）降低阻遏物濃度 避免使用過于豐富的培養(yǎng)基和易被利用的碳源，并設(shè)法阻止效應物的形成和濃度的增加。 流加和連續(xù)培養(yǎng)退出（ 3） .其他 促進分泌：添加表面活性劑 離子型 對細胞有毒害作用 表面活性劑 Tween－ 80 非離子型 TritonX－ 100 非離子型增加細胞通性 ， 添加產(chǎn)酶促進劑 植酸鈣鎂，聚乙烯醇等退出第四節(jié) 酶發(fā)酵動力學 細胞生長速度 產(chǎn)物生成速度 基質(zhì)消耗速度 環(huán)境因素的影響細胞生長動力學發(fā)酵產(chǎn)酶動力學發(fā)酵動力學研究內(nèi)容：退出一、酶生物合成的模式微生物細胞的生長歷程退出按細胞生長和酶產(chǎn)生的關(guān)系，酶生物合成具有下列四種模式：同步合成型延續(xù)合成型中期合成型滯后合成型1. 生長偶聯(lián)型（又稱同步合成型） 酶的生物合成與細胞生長同步。特點： 酶的合成可以誘導，但不受分解代謝物阻遏和反應產(chǎn)物阻遏。 當去除誘導物、細胞進入平衡期后，酶的合成立即停止，表明這類酶所對應的 mRNA很不穩(wěn)定。 —— 中期合成型 酶的合成在細胞生長一段時間后才開始，而在細胞生長進入平衡期以后，酶的合成也隨著停止 。特點： 酶的合成受產(chǎn)物的反饋阻遏或分解代謝物阻遏。 所對應的 mRNA是不穩(wěn)定的。 枯草桿菌堿性磷酸酶合成曲線 （又稱延續(xù)合成型） 酶的合成在細胞的生長階段開始，在細胞生長進入平衡期后，酶還可以延續(xù)合成較長一段時間。特點： 可受誘導，一般不受分解代謝物和產(chǎn)物阻遏。 所對應的 mRNA相當穩(wěn)定。黑曲霉聚半乳糖醛酸酶合成曲線4. 非生長偶聯(lián)型（又稱滯后合成型） 只有當細胞生長進入平衡期以后，酶才開始合成并大量積累。許多水解酶的生物合成都屬于這一類型 。特點 ：受分解代謝物的阻遏作用。 所對應的 mRNA穩(wěn)定性高。黑曲霉酸性蛋白酶合成曲線 總結(jié)： 影響酶生物合成模式的主要因素1） mRNA的穩(wěn)定性2）培養(yǎng)基中阻遏物的存在退出退出vmRNA的穩(wěn)定性，培養(yǎng)基中誘導物，反饋阻遏物，分解代謝物的存在是影響酶生物合成模型的主要因素。v mRNA穩(wěn)定性 代謝調(diào)節(jié) 產(chǎn)物生成模型v 同步合成型 () 誘導 dP/dt=αdX/dt v 延續(xù)合成型 (+) 誘導 dP/dt=αdX/dt＋ βXv 中期合成型 () 反饋阻遏 dP/dt=αdX/dt
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