培養(yǎng)基滅菌及發(fā)酵設(shè)備概述(編輯修改稿)
2025-01-24 15:26 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 36 67115 15 50120 4 27130 8145 2150 ＜ 1二）影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素微生物熱阻 （前述） pH◆ 微生物在 ～ ◆ pH低于 ，氫離子極易滲入微生物細(xì)胞，從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng)而促進(jìn)其死亡，故培養(yǎng)基酸度愈高，則所需的殺菌時間愈短。影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素（ continued） 溫度 孢子數(shù) 滅菌時間 (min) (℃) ( 個 /ml) pH= 120 10000 8 7 5 3 3 115 10000 25 25 16 13 13110 10000 70 65 35 30 24100 10000 740 720 180 150 150 pH對滅菌時間的影響影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素（ continued）菌的濃度濃度越高，所需滅菌時間越長例如： 如肉毒梭狀芽孢桿菌，在 105℃ 濕熱滅菌時間 芽孢桿菌數(shù) /ml 時間 (min) 910 8 48 910 6 36 910 4 20 910 2 14 9 2影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素（ continued） 培養(yǎng)基成分◆ 油脂、糖類及一定濃度的蛋白質(zhì)會增加微生物的耐熱性 因高濃度有機(jī)物會環(huán)繞細(xì)菌的四周形成一層薄膜，影響熱的傳入?！? 而高濃度的鹽類、色素等則削弱其抗性影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素（ continued）泡沫 泡沫中的空氣形成隔熱層，使熱量難以滲透進(jìn)去殺死其中潛伏的微生物； 易產(chǎn)生泡沫的培養(yǎng)基在滅菌時，可加入少量消泡劑。顆粒 顆粒小，滅菌容易，顆粒大，滅菌難。影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素（ continued）三、分批滅菌 （實(shí)罐滅菌）一）操作 在進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌之前，通常應(yīng)先把發(fā)酵罐的 分空氣過濾器滅菌并用無菌空氣吹干。 若已先行空罐滅菌，此步可不進(jìn)行 預(yù)熱向夾套或蛇管中通入蒸汽，間接將培養(yǎng)基加熱至 70℃ 左右。作用： 利于糊化；減少冷凝水的生成；減輕噪音有的工廠省卻此步；需通過試驗(yàn)掌握冷凝水的生成量，確保培養(yǎng)基的濃度。開啟蒸汽管，向培養(yǎng)基中通入蒸汽，升溫。罐壓達(dá) 1kg/cm2 ( MPa)時，安裝在發(fā)酵罐封 頭的接種管、補(bǔ)料管、消泡劑管等應(yīng)排汽。升 溫 階 段保溫 調(diào)節(jié)好各進(jìn)汽和排汽閥門，使罐壓和溫度 保持在一穩(wěn)定水平，維持一定時間。在保溫階段，凡進(jìn)口在培養(yǎng)基液面下的各管道都應(yīng)通入蒸汽；在液面上的其余管道則應(yīng)排放蒸汽，這樣才能保證滅菌徹底，不留死角。保 溫 階 段保溫結(jié)束后，依次關(guān)閉各排汽、進(jìn)汽閥；待罐內(nèi)壓力降至 ，向罐內(nèi)通入無菌空氣，向夾套或蛇管中通入冷水，使培養(yǎng)基降至所需溫度。通入無菌空氣的作用：加速降溫；保持罐內(nèi)正壓降 溫 階 段AB CD升溫 保溫 降溫小型罐升降溫快，可忽略；但大型罐不可忽視℃min二） 滅菌時間的計算V = V加熱 + V維持 + V冷卻 RT2 (E –2RT)V 加熱 = ———————— t 加熱 (TT0)E2 RT2 (E –2RT)V 冷卻 = ———————— t 冷卻 (TT0)E2R ：氣體常數(shù)； = 1. 986 [ 卡 /克分子 K]E ：耐熱孢子致死的活化能； = 65000 [卡 /克分子 ]T：滅菌維持溫度； 121℃ （ 393 K）T0：開始計算滅菌效果的溫度； 100℃ （ 373 K）例：1）小型發(fā)酵罐在 120℃ 滅菌維持 15分鐘，由 100℃ （ 100℃ 以下滅菌效果不計）加熱至 120℃ 的時間為 5分鐘，由 120℃ 冷卻到 100℃ 的時間為 3分鐘，計算總的滅菌時間。 3932(65000 – 2 393)V加熱 = ———————————————— 5 = (393373) 65000
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