培養(yǎng)基滅菌與空氣凈化(編輯修改稿)
2025-02-13 05:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 基在滅菌時的稀釋（體積的增加），通常體積可增加 20%左右，滅菌時間越長，體積增加的越多。 培養(yǎng)基升溫及保溫 升溫： 打開所有的排氣閥門，排掉空氣 ？ 開動攪拌系統(tǒng)，以使培養(yǎng)基內(nèi)部傳熱均勻，當溫度升溫到 8090℃ 時，停止攪拌，一方面是為了保護軸承，另一方面，當培養(yǎng)基升溫到該溫度時，培養(yǎng)基的沸騰，可以起到攪拌作用。 保溫： 當培養(yǎng)基的溫度升到滅菌溫度（ 121℃ ）時，進入保溫操作階段，此時要求與反應(yīng)器相連的所有管道出于兩個狀態(tài)：進汽或出汽，目的是對管道進行滅菌，防止罐內(nèi)氣壓過高。 保溫期間，要求罐壓： — ，溫度： 118— 121℃ ，時間： 2030分鐘。 滅菌結(jié)束后，維持罐內(nèi)正壓 滅菌結(jié)束后，立即引入無菌空氣，保證罐內(nèi)壓力處于正壓（ ）后方可冷卻，目的是防止培養(yǎng)基的冷卻使罐內(nèi)形成負壓，易染菌。 第二節(jié) 空氣的凈化 一、空氣中微生物的分布 ? 空氣中的微生物種類以 細菌和細菌芽孢較多，也有酵母，霉菌和病毒 。 ? 這些微生物大小不一，一般 附著在空氣中的灰塵上或霧滴上， 空氣中微生物的含量一般為 103104個／米 3。 ? 灰塵粒子的平均大小約 m左右，所以空氣除菌主要是 去除空氣中附著微生物的微粒 ( m ）。 （一）發(fā)酵對空氣無菌程度的要求 ? 密閉的深層通氣發(fā)酵需嚴格的純凈培養(yǎng)， 發(fā)酵過程中需要大量的無菌空氣，空氣要做到絕對無菌在目前是不可能的，也是不經(jīng)濟的。 ? 發(fā)酵對無菌空氣的要求是 ： 無菌，無灰塵，無雜質(zhì)，無水，無油，正壓等幾項指標； ? 在工程設(shè)計中一般要求 1000次使用周期中只允許有一個菌通過，即經(jīng)過濾后空氣的無菌程度為N=103 二、空氣除菌 （二） 空氣除菌的方法 ? 輻射殺菌 ? 熱殺菌 ? 靜電除菌 ? 過濾除菌 （ 1）輻射滅菌法 ? 最常用的是用 紫外光線進行無菌室滅菌 。 紫外光線 的主要作用是使微生物的 DNA分子產(chǎn)生的胸腺嘧啶的二聚體 ， 導致細胞死亡 。 ? 無菌室常用的紫外燈功率為 30W， 安裝在操作臺上方一米左右高處 ， 每次照射 1530min既可 。 ? 此外，紫外線對人體組織有一定刺激作用，眼睛、皮膚受照射后會產(chǎn)生某些癥狀，所以 工作人員在無菌室操作時應(yīng)關(guān)閉紫外燈 （ 2）熱滅菌 ? 原理：基于加熱后微生物體內(nèi)的蛋白（酶）熱變性而得以實現(xiàn)。 （ 3）靜電除菌 ? 靜電除塵器可除去空氣中的水霧、油霧、塵埃，同時也除去微生物。 ? 原理：對于一些直徑大，帶電荷較大的微粒，利用靜電引力來吸附帶電粒子而達到除塵滅菌目的。 （ 4）介質(zhì)過濾除菌 ? 介質(zhì)過濾除菌是 使空氣通過經(jīng)高溫滅菌的介質(zhì)過濾層，將空氣中的微生物等顆粒阻截在介質(zhì)層中，而達到除菌的目的。 ? 從可靠性，經(jīng)濟適用與便于控制等方面考慮，目前仍以介質(zhì)過濾法較好，也是大多數(shù)發(fā)酵廠廣泛采用的方法。 要保持過濾器有比較高的過濾效率，應(yīng)維持一定的氣流速度和不受油、水的干擾。 要保持不受油、水干擾，則要有一系列冷卻、分離、加熱的設(shè)備來保證空氣的相對濕度在50%～ 60%的條件下過濾。 空氣除菌流程分析 （三）空氣凈化流程 空氣凈化的一般流程 ? 吸氣口吸入的空氣先經(jīng)過壓縮前的過濾 ? 進入空氣壓縮機（ 120150℃ ） ? 冷卻到適溫除油水，再加熱至 3035℃ 。 ? 最后通過總過濾器和分過濾器除菌，獲得潔凈度、壓力、溫度和流量都符合要求的無菌空氣（ p101）。 ? 高空取氣管是遠離地面幾十米的管子。一般而言， 地面附近空氣中所含的微生物和灰塵等均比高空空氣中含的多， 據(jù)資料介紹，每升高 10米，空氣中雜菌可降低一個數(shù)量級，因此從高空取氣要比從低空取氣有利得多。 空氣凈化使用的設(shè)備 高空取氣管 空氣壓縮機 空氣貯罐 油水分離器 ? 其內(nèi)部同時采用直接攔截 ，慣性碰撞 ， 布朗擴散及凝聚等機理 ， 能有效地去除空氣中的水 、 油霧 、 塵埃 ，內(nèi)部不銹鋼絲網(wǎng)可清洗 ，使用壽命長 。 旋風油水分離器（較大霧粒） 絲網(wǎng)油水分離器（小霧粒） 冷卻器 空氣加熱器 ? 過濾除菌是目前發(fā)酵工業(yè)中經(jīng)濟實用的空氣除菌方法 。 ? 常用的 過濾介質(zhì)有棉花 、 活性炭或玻璃纖維 、 有機合成纖維 、 有機和無機燒結(jié)材料 、 微孔超濾膜等 。 過濾除菌設(shè)備 過濾除菌設(shè)備 空氣過濾器 （ 1）兩次冷卻、兩次分離，適當加熱除菌流程 ? 空氣第一次冷卻到 3035℃ ，分離大部分油水，之后用 旋風分離器分離較大霧粒 ； ? 第二級冷卻至 2025℃ ，析出 小霧粒用絲網(wǎng)分離器分離 ； ? 經(jīng)分離油水后加熱到 3035℃ ，溫度升高，相對濕度下降至 50%～ 60% 。 ? 特點 ：是較完善的凈化流程，提高傳熱系數(shù)，節(jié)約冷卻用水，油水分離完全 。 幾種典型的空氣凈化流程 （ 2）冷熱空氣直接混合式空氣除菌流程 ? 方法：壓縮空氣從貯罐出來分兩路，一部分進入冷卻器，經(jīng)分離器分離油、水后，與另一部分未處理過的高溫壓縮空氣混合，使混合后的空氣溫度為 3035℃ ， 相對濕度為 5060%。 ? 特點 ： 省去一級冷卻和分離設(shè)備及空氣再加熱設(shè)備，簡化了流程，降低冷卻水用量。 （ 3）高效前置過濾除菌流程 ? 在壓縮機前設(shè)置一臺 高效率的前置粗過濾器， 降低了 主過濾器 負荷（即多次過濾）。 謝蒭奐售歿羪櫞納肍觵磺蔛鋔驚筻騼掏棥茺卪钘跪赟痼猻蔇欣愵亍顅慆商怈嶏鏑鵓斃礈較臓檔習梴
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