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正文內(nèi)容

基因芯片的產(chǎn)生背景與制備方法(編輯修改稿)

2025-01-20 20:32 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 軟件的開發(fā) 基因芯片的制備 雜交 檢測(cè) 數(shù)據(jù)分析 一、制備基因芯片 靶基因的獲得 細(xì)胞或組織 mRNA?cDNA文庫 ?PCR擴(kuò)增?各種基因序列 芯片基質(zhì)的選擇及活化 載玻片 ?表面涂氨基硅烷或多聚賴氨酸 點(diǎn)樣儀點(diǎn)樣 二、制備樣本核酸探針 樣本總 RNA的抽提:異硫氰酸胍 mRNA的分離與純化: oligo- dT 反轉(zhuǎn)錄并標(biāo)記 隨機(jī)引物法逆轉(zhuǎn)錄 標(biāo)記物:同位素、熒光染料 (cy3綠色 /cy5- 紅色 )、化學(xué)發(fā)光 三、雜交實(shí)驗(yàn)條件 ? 雜交 雜交體積 (使核酸濃度增加 10萬倍) 玻片 : 2200?l 濾膜: 550ml 雜交液和雜交液的組份 雜交溫度、時(shí)間 ? 洗滌 洗滌液的組成 洗滌的溫度、時(shí)間 四、雜交信號(hào)的檢測(cè) 激光共聚焦掃描 光源:特定波長(zhǎng)的光 激發(fā)面積: 100?m2 ScanArray 3000 CCD 成像術(shù) 光源:連續(xù)波長(zhǎng)的光(如弧光燈) 激發(fā)面積:同時(shí)激發(fā)多個(gè)
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