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基因芯片的產(chǎn)生背景與制備方法-wenkub

2023-01-21 20:32:49 本頁(yè)面
 

【正文】 ? 微量點(diǎn)樣的寡核苷酸點(diǎn)陣或 cDNA點(diǎn)陣 ? 微流路生物分析儀 (labonchip) ? 其他:電子芯片、三維芯片 芯片常用制備方法的比較 ? 原位合成 –高密度(可達(dá) 40萬(wàn)點(diǎn) /) –25bp –DNA –測(cè)序分析,尋找點(diǎn)突變 ? 微量點(diǎn)樣(針點(diǎn)、噴墨 〕 187。對(duì)比分析 基因芯片技術(shù)流程 制備方法及點(diǎn)樣儀器 ?探針的制備: 標(biāo)記方法 ?雜交: 雜交液、雜交溫度、 洗滌條件的選擇 掃描儀 :激光 CCD 分析軟件的開發(fā) 基因芯片的制備 雜交 檢測(cè) 數(shù)據(jù)分析 一、制備基因芯片 靶基因的獲得 細(xì)胞或組織 mRNA?cDNA文庫(kù) ?PCR擴(kuò)增?各種基因序列 芯片基質(zhì)的選擇及活化 載玻片 ?表面涂氨基硅烷或多聚賴氨酸 點(diǎn)樣儀點(diǎn)樣 二、制備樣本核酸探針 樣本總 RNA的抽提:異硫氰酸胍 mRNA的分離與純化: oligo- dT 反轉(zhuǎn)錄并標(biāo)記 隨機(jī)引物法逆轉(zhuǎn)錄 標(biāo)記物:同位素、熒光染料 (cy3綠色
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