微生物的保藏技術(shù)(編輯修改稿)
2025-01-19 04:39 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 準(zhǔn)生物保藏中心 法國(guó)巴斯德研究所 L39。Institut Pasteur菌物保藏中心 Collection de L39。Institut Pasteur Of Institut Pasteur(CIP) 加拿大國(guó)家微生物健康實(shí)驗(yàn)室微生物菌種保藏中心 National Microbiology Laboratory Health Canada Culture Collections（ NMLHCCC） 日本生物技術(shù)研究所微生物菌種保藏中心 Marine Biotechnology Institute Culture Collection, Marine Biotechnology Instituten(MBIC) 傳代培養(yǎng)保藏 一、傳代培養(yǎng)保藏 原理 1 優(yōu)缺點(diǎn) 2 注意事項(xiàng) 3 傳代培養(yǎng)的原理 有些微生物當(dāng)遇到冷凍或干燥等處理時(shí)，會(huì)很快死亡，因此在這種情況下，只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進(jìn)行菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存，它是最基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生產(chǎn)菌種的保存。 傳代培養(yǎng)優(yōu)缺點(diǎn) 傳代培養(yǎng)保存法雖然簡(jiǎn)便，但其缺點(diǎn)也很明顯，如：①菌種管棉塞經(jīng)常容易發(fā)霉；②菌株的遺傳性狀容易發(fā)生變異；③反復(fù)傳代時(shí)，菌株的病原性、形成生理活性物質(zhì)的能力以及形成孢子的能力等均有降低；④需要定期轉(zhuǎn)種，工作量大；⑤雜菌的污染機(jī)會(huì)較多。 傳代培養(yǎng)的注意事項(xiàng) 傳代保存時(shí)，培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。 一般地，大多數(shù)菌種的保藏溫度以 5℃ 為好，像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以使用 37℃ 進(jìn)行保存，而蕈類等大型食用菌的菌種則可以室溫直接保存。 二、冷凍保藏原理 適用于抗凍力強(qiáng)的微生物。這些微生物可在其菌體細(xì)胞外遭受凍結(jié)的情況下而不受損傷，而對(duì)其它大多數(shù)微生物而言，無(wú)論在細(xì)胞外凍結(jié)還是在細(xì)胞內(nèi)凍結(jié)，都會(huì)對(duì)菌體造成損傷，使其代謝作用停止，可達(dá)到保藏的目的。 常用的冷凍保藏法 液氮保藏法 1 低溫冰箱保存法 2 干冰保存法 3 液氮保存法 ? 一、適用范圍 液氮溫度在 196以下 ,用于快速制冷 ,速凍 ,機(jī)械安裝等 ,一般不用于日常生活 ,此法除適宜于一般微生物的保藏外，對(duì)一些用冷凍干燥法都難以保存的微生物如支原體、衣原體、氫細(xì)菌、難以形成孢子的霉菌、噬菌體及動(dòng)物細(xì)胞均可長(zhǎng)期保藏，而且性狀不變異。缺點(diǎn)是需要特殊設(shè)備。 二、保藏方法 a、裝 安瓶 管：使用盡量濃厚的菌體懸浮于含有適當(dāng)防凍劑（保存霉菌不用防凍劑）的滅菌溶液中，將 ～ 1ml的這種溶液分裝于安瓶中，或在裝有分散劑的安瓶中直接接種，或?qū)⒕z體瓊脂塊直接懸浮于分散劑中。
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