第十九章補體檢測及應(yīng)用(編輯修改稿)
2024-08-28 13:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 。指示系統(tǒng) :以 SRBC抗 SRBC為激活物和指示系統(tǒng)216。參照體系 :以人為設(shè)計的缺乏某種補體成分的血清為參照216。結(jié)果判度 :若有溶血發(fā)生，表明待檢標(biāo)本存在參照血清所缺乏的補體成分，且溶血程度與此補體成分的量呈正比，仍以 50％溶血為終點 216。參照血清常稱之 “R（ remove） ”試劑 ，即去除某種補體成分之意。已能篩選到的血清有人 C2缺乏、豚鼠 C4缺乏、小鼠 C5缺乏和家兔 C6缺乏的血清 216。 免疫溶血法常用于 C C C C C6等補體成分的檢測。其中以 C C4兩成分的檢測更為常見 二、免疫化學(xué)法免疫化學(xué)法分類 216。 前兩種方法：手工操作繁瑣、耗時長、影響因素多、結(jié)果重復(fù)性差，已趨于淘汰216。 后兩種方法：通過儀器對補體的 C C B因子等單個成分進行自動化測定 比濁法216。 比濁法原理 借助補體的抗原性和與相應(yīng)抗體反應(yīng)的 前帶現(xiàn)象 建立的補體單個成分定量檢測法。216。比濁法不足 必需以過量的某種補體相應(yīng)抗體為保證216。 自動免疫比濁法 反映所測補體成分的絕對量 可進行標(biāo)準(zhǔn)化流程管理與質(zhì)量控制第 四 節(jié) 補體結(jié)合試驗補體結(jié)合試驗 (plement fixation test， CFT ) 將免疫溶血作為指示系統(tǒng)，用以檢測另一反應(yīng) 系統(tǒng)中抗原或抗體的傳統(tǒng)方法。一、試驗原理作用原理： 利用補體的溶細胞作用進行各種物理狀態(tài)的抗原抗體測定5種成分， 3個系統(tǒng)反應(yīng)系統(tǒng)：已知抗原（或抗體）與待測抗體（或抗原）補體系統(tǒng)指示系統(tǒng)： SRBC與相應(yīng)溶血素。試驗時常將其預(yù)先結(jié)合，成為致敏綿羊紅細胞（ sensitized sheep red blood cell,SRBCS）。反應(yīng)分兩步進行 第一步 :反應(yīng)系統(tǒng)與補體的作用 第二步 :指示系統(tǒng)利用剩余補體的反應(yīng)不溶血為補體結(jié)合試驗陽性，而溶血為試驗陰性（一） .試劑的準(zhǔn)備二、補體結(jié)合試驗方法216。用于試驗的抗原或抗體 : 需要純化 純度愈高，特異性愈強216?？乖c抗體比例適當(dāng) : 確定抗原或抗體相應(yīng)的使用單位 采用方陣或棋盤法進行抗原與抗體滴定由于該試驗基于指示和試驗兩對抗原抗體系統(tǒng)競爭補體因此，補體必須恒量，且以滿足指示系統(tǒng)的溶血為度，過多會導(dǎo)致假陰性，而過少則引起假陽性。 216。 采用豚鼠血清為補體 216。 對補體進行滴定和確定其用量，以能產(chǎn)生完全溶血的最少補體用量為 1個實用單位216。 正式試驗時使用 2個實用單位216。 補體的性質(zhì)不穩(wěn)定，每次試驗前均應(yīng)進行滴定 血清標(biāo)本遇有抗補體現(xiàn)象時，可作下列處理：T加熱滅活時提高 12℃ T－ 20℃ 凍融后離心去沉淀 T以 3mmol/L鹽酸處理 T加入少量補體后再行滅活 T以白陶土處理 T通入 CO2 T以小白
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