【文章內(nèi)容簡介】 、結(jié)果判定觀察速測卡上白色藥片的顏色并與標(biāo)準(zhǔn)色卡進(jìn)行比對，判斷農(nóng)藥殘留的強(qiáng)弱，藍(lán)色表示農(nóng)藥為陰性，淺藍(lán)色為弱陽性，白色表示農(nóng)藥為陽性。六、方法演示七、注意事項(xiàng)蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(shí)，可采取整株蔬菜浸提或采用表面測定法。對一些含葉綠素較高的蔬菜，可采用整株蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。紅色藥片和白色藥片疊合后反應(yīng)時(shí)間以3 min為準(zhǔn)，3 min后的藍(lán)色會(huì)逐漸加深，24 h后顏色會(huì)逐漸退去。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤。第三講 微生物快速檢測法——Compact Dry顯色碟片中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院 劉沛 電話：010857733552205一、顯色碟片以傳統(tǒng)方法為基礎(chǔ)的一種快速簡便的微生物檢測方法。目標(biāo)菌在顯色底物和氧化還原指示劑的共同作用下，呈現(xiàn)不同顏色，以此達(dá)到分離鑒別的目的。即用型Compact Dry（日本）二、操作步驟樣品處理：采集樣品，經(jīng)適當(dāng)均質(zhì)后，制備樣品稀釋液。打開碟片蓋子，滴加1mL樣品稀釋液于板中央。樣品會(huì)自動(dòng)擴(kuò)散，并在幾秒鐘內(nèi)形成膠狀培養(yǎng)基。在空白位置標(biāo)記樣品信息，加蓋倒置培養(yǎng)。記錄結(jié)果第一節(jié) 細(xì)菌總數(shù)檢測一、細(xì)菌總數(shù)衛(wèi)生學(xué)意義菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志，也可以以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評價(jià)時(shí)提供依據(jù)。二、基本概念細(xì)菌總數(shù)(total bacteria number)：是死的和活的細(xì)菌細(xì)胞的總數(shù)。?菌落總數(shù)(total colony number)：指在被檢樣品的單位重量（g）、容積（mL）或表面積（cm2）內(nèi)，所含能于普通營養(yǎng)瓊脂平板上，在一定條件下培養(yǎng)后所生成的菌落的總數(shù)。包括所有嗜中溫的、需氧和兼性厭氧的活的細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落(colony)：生長在固體培養(yǎng)基上，來源于一個(gè)細(xì)胞，肉眼可見的細(xì)胞群體。 菌落形成單位CFU(colony forming unit)平板菌落計(jì)數(shù)TPC(total plate count)三、GB/取樣制成稀釋液（%NaCl生理鹽水）適當(dāng)十倍稀釋樣品選擇23個(gè)連續(xù)適宜稀釋度各取1mL分別加入滅菌平皿內(nèi)（每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平行）每皿內(nèi)加入適量 營養(yǎng)瓊脂（NA）36 177。1 ℃ 48 177。 2h菌落計(jì)數(shù)報(bào)告四、SN/FDA/ISO取樣制成稀釋液（%生理鹽水或磷酸鹽緩沖液）適當(dāng)十倍稀釋樣品選擇23個(gè)連續(xù)適宜稀釋度各取1mL分別加入無菌平皿內(nèi)（每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平行）每皿內(nèi)加入適量平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）35 177。1 ℃ 48 177。 2h菌落計(jì)數(shù)報(bào)告五、Compact Dry TCTotal Count培養(yǎng)條件：35177。2℃/48h結(jié)果:紅色及其他顯色菌落都是細(xì)菌第二節(jié) 大腸菌群及大腸桿菌檢測一、大腸菌群及大腸桿菌衛(wèi)生學(xué)意義大腸菌群和大腸桿菌是評價(jià)衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)，作為食品中的糞便污染指標(biāo)。食品中檢出大腸菌群，表明該食品有糞便污染，既可能有腸道致病菌存在，因而也就有可能通過污染的食品引起腸道傳染病的流行。大腸菌群數(shù)的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對人體健康危害性的大小。大腸桿菌在外界存活時(shí)間與一些主要腸道致病菌接近，它的出現(xiàn)預(yù)示著某些腸道病原菌的存在，因此該菌是國際上公認(rèn)的衛(wèi)生監(jiān)測指示菌。近年來，有些國家在執(zhí)行HACCP管理中，將大腸桿菌檢測作為微生物污染狀況的監(jiān)測指標(biāo)和HACCP實(shí)施效果的評估指標(biāo)。二、基本概念（一）概念1大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。大腸菌群不是細(xì)菌學(xué)上的分類命名，而是根據(jù)衛(wèi)生學(xué)方面的要求，提出的與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，即作為食品、水體等是否受過人畜糞便污染的指示菌，這些細(xì)菌在生化及血清學(xué)方面并非完全一致。根據(jù)進(jìn)一步的生化試驗(yàn)，可將這群細(xì)菌再分為大腸埃希氏菌（俗稱大腸桿菌）、弗氏檸檬酸桿菌、肺炎克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。（二）概念2大腸桿菌（也稱大腸埃希氏菌）指革蘭氏陰性無芽孢桿菌、發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、IMViC試驗(yàn)（靛基質(zhì)、MR、VP、檸檬酸鹽試驗(yàn)）為++或+的細(xì)菌。大腸桿菌分類于腸桿菌科，歸屬于埃希氏菌屬。與人類有關(guān)的大腸桿菌統(tǒng)稱為致瀉性大腸桿菌，包括五種：腸毒素性大腸桿菌（ETEC）、致病性大腸桿菌（EPEC）、出血性大腸桿菌（EHEC）、侵襲性大腸桿菌（EIEC）、黏附性大腸桿菌（EAEC）。三、取樣方法食(飲)具抽檢碗、盤、口杯：(5cm2)滅菌濾紙片緊貼內(nèi)面各10張(總面積50cm2)、碟、匙、酒杯以每5件為1份，每件內(nèi)面緊貼滅菌濾紙片各2張(總面積50cm2／份)，經(jīng)1min，按序取置入50mL滅菌鹽水試管中，充分振蕩后，制成原液?？辏喝∶侩p的下段12cm處約50cm2(12cm2cm2cm)，置入50mL滅菌鹽水試管中，充分振蕩20次，制成原液。（以上采樣方法依據(jù)GB1493494）食品檢驗(yàn)采樣方法：在無菌條件下，根據(jù)樣品種類，袋裝、瓶裝和罐裝食品，應(yīng)采完整的未開封的樣品。如果樣品很大，則需用無菌采樣器取樣；固體粉末樣品，應(yīng)邊取邊混合；液體樣品通過振搖混勻；冷凍食品應(yīng)保持冷凍狀態(tài)，非冷凍食品需在05℃中保存。四、GB/取樣制成稀釋液適當(dāng)十倍梯度稀釋乳糖膽鹽發(fā)酵肉湯（含小倒管）不產(chǎn)氣產(chǎn) 氣報(bào)告陰性EMB平板革蘭氏染色接種乳糖復(fù)發(fā)酵肉湯革蘭氏陽性革蘭氏陰性無芽孢桿菌產(chǎn) 氣不產(chǎn)氣大腸菌群陰性大腸菌群陽性大腸菌群陰性報(bào) 告查MPN表報(bào)告結(jié)果報(bào) 告五、SN/FDA六、Compact Dry EC ＆ Coliform培養(yǎng)條件：35177。2℃/24h結(jié)果：大腸桿菌為藍(lán)色菌落，大腸菌群的其他細(xì)菌呈紅色。七、Compact Dry EC ＆ Coliform培養(yǎng)條件：35177。2℃/24h結(jié)果：大腸桿菌為藍(lán)色菌落，大腸菌群的其他細(xì)菌呈紅色。八、注意事項(xiàng)儲藏條件及保質(zhì)期：130℃保質(zhì)18個(gè)月。如果培養(yǎng)后整個(gè)平板呈紅色，說明稀釋度不合適，須選擇較高稀釋度重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。平板背面有1cm1cm的網(wǎng)格（總面積20㎝2），便于計(jì)數(shù)。如菌落較多，可選擇一塊具有代表性的格子計(jì)數(shù)，再乘以20，即為總菌數(shù)。第四講 食品中化學(xué)有害物快速檢測技術(shù)中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院 李鵬 電話01085775790837第一節(jié) 有效氯、余氯含量快速檢測方法一、背景知識含氯消毒劑是目前應(yīng)用最廣泛的消毒劑，但其穩(wěn)定性較差，容易分解和揮發(fā)。有效率含量是消毒劑的一個(gè)重要指標(biāo)，是指含氯消毒劑的氧化能力相當(dāng)于多少氯的氧化能力。有效氯含量愈高，消毒劑的消毒能力愈強(qiáng)。反之，消毒能力就弱。常用的品種有漂白粉、漂白精粉、次氯酸鈉、氯胺T、氯化磷酸鹽、二氯或三氯異氰尿酸鈉等。一般情況下，有效氯含量在100 mg/kg以上才有足夠的殺菌效果。消毒液中有效氯含量是否達(dá)到衛(wèi)生要求，是保證消毒效果的關(guān)鍵。傳統(tǒng)的有效氯測試方法一般采用碘量法（），需要一定的實(shí)驗(yàn)室條件和技能，難以在現(xiàn)場使用。余氯是指含氯消毒劑投入水中后，除了與水中細(xì)菌、微生物、有機(jī)物、無機(jī)物等作用消耗一部分氯量外，還剩下了一部分氯量，這部分氯量就叫做余氯。余氯可分為化合性余氯和游離性余氯，兩種余氯之和即為總余氯。 如果出廠水沒有氯或加氯量不夠，在管網(wǎng)里就可能使細(xì)菌、大腸桿菌等微生物大量繁殖，影響管網(wǎng)水質(zhì)，因此在供水管網(wǎng)中必須保證一定的余氯量。我國《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定： mg/L，集中式給水除出廠水應(yīng)符合上述要求外。 《食品工具、設(shè)備用洗滌消毒劑衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中有效氯的測定采用碘量法：洗滌劑中有效氯在酸性溶劑中與碘化鉀起氧化作用，釋放出一定量的碘，再以硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定碘，根據(jù)硫代硫酸鈉的消耗量計(jì)算出有效氯含量。GB 1189889《水質(zhì) 游離氯和總氯的測定 N,N二乙基1,4苯二胺分光光度法》中游離氯的測定，~，游離氯直接與N,N二乙基1,4苯二胺（DPD）反應(yīng)生成紅色化合物，用分光光度法測量其吸光度。總氯的測定是存在過量碘化鉀時(shí)反應(yīng)，然后按游離氯的測定方法測定。消毒對象、余氯濃度和時(shí)間關(guān)系表消毒對象或目的余氯濃度(mg/L)消毒時(shí)間(分)水果、蔬菜、皮膚沖洗、游泳池腳墊10～2510～15禽蛋、兒童尿布、口罩、居室噴灑、寵物洗浴25～5015～20飲具茶具、玩具、內(nèi)衣、內(nèi)褲、床單、被罩、車船及賓館、公用臥具、洗衣機(jī)添加、冰箱擦拭、一般光滑表面處理50～10010～1