【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 年 月 日正文聚維酮碘與戊二醛對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌殺滅效果的研究XXXXX大學(xué)XX校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系摘要：目的：研究聚維酮碘和戊二醛在不同濃度、不同作用時(shí)間對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌的殺滅效果。方法：%到5%%到2%的戊二醛，作用時(shí)間從10min到12h分別對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌進(jìn)行殺菌試驗(yàn)，接種培養(yǎng)觀察長(zhǎng)菌情況。結(jié)果：5%的聚維酮碘作用10min、2%的聚維酮碘作用2h、1%濃度的聚維酮碘作用6h后均可殺滅牛型結(jié)核分支桿菌，而1%濃度以下的聚維酮碘對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌沒有殺滅效果；2%的戊二醛對(duì)結(jié)核桿菌沒有殺滅作用。該試驗(yàn)結(jié)果為養(yǎng)殖場(chǎng)選擇消毒劑對(duì)環(huán)境進(jìn)行凈化提供了理論依據(jù)。關(guān)鍵詞：牛型結(jié)核分支桿菌；聚維酮碘；戊二醛；殺菌作用；消毒劑Observation on the Effect of Povidone Iodine and Glutaraldehyde Ddisinfectant for Killing the Bovine Mycobacterium XXXDepartment of Veterinary Medicine, XX UniversityAbstract: Objective: To study the effect of povidone iodine and germicidal efficacy of glutaraldehyde in different concentrations, different time on bovine type of Mycobacterium : concentration from % to 5% povidone iodine and % to 2% glutaraldehyde, time from 10min to 12h germicidal experiments were conducted on the type of Mycobacterium tuberculosis, bacterial culture was : 5% povidone iodine 10min, 2% povidone iodine 2h, 1% concentration of povidone iodine 6h can kill Mycobacterium bovis, and 1% concentrations povidone iodine on the type of Mycobacterium tuberculosis without killing effect。 2% glutaraldehyde has no killing effect on Mycobacterium test results for the farms to select disinfectants to purify the environment provides a theoretical basis.Key words: Bovine Mycobacterium 。 povidoneiodine。 glutaraldehyde。 germicidal efficacy。 disinfectant1前言牛結(jié)核病(Bovine tuberculosis，BTB)主要是由牛分支桿菌(Mycobacterium bovis)引起的一種嚴(yán)重的人畜共患慢性、消耗性傳染病。以病牛貧血、消瘦、體虛乏力、精神萎靡不振和生產(chǎn)力下降等為特征[1]。其特點(diǎn)是在多種組織器官形成結(jié)核結(jié)節(jié)和干酪樣壞死[2]。 牛結(jié)核病為一種人獸共患病，不進(jìn)給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大損失，還嚴(yán)重威脅人類健康，經(jīng)調(diào)查，在非洲的亞薩哈拉地區(qū)的國(guó)家生產(chǎn)的90%的原奶和被這些國(guó)家的人直接消費(fèi)的奶要么是新鮮的要么是發(fā)酵的，但都沒有經(jīng)過巴氏消毒[3] ，導(dǎo)致這些地區(qū)大部分人都感染了結(jié)核病。并且有相關(guān)研究指出，如果人是通過吸入的方式感染牛分枝桿菌，感染人會(huì)發(fā)展成典型的肺結(jié)核[4] 。利用消毒劑對(duì)畜禽及其周圍環(huán)境進(jìn)行消毒以殺滅病原體、切斷傳染途徑，已成為預(yù)防和控制畜禽傳染病流行的重要措施[5]。選出能有效殺滅結(jié)核分枝桿菌的消毒劑，是控制其感染的一個(gè)有力途徑[6]。對(duì)結(jié)核桿菌的殺滅效果研究已經(jīng)相繼有了報(bào)道，如：“84”消毒液對(duì)結(jié)核桿菌的殺滅效果研究[7]，含氯復(fù)方消毒劑殺滅結(jié)核桿菌效果的試驗(yàn)觀察[8]，以及碘伏對(duì)3株分支桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株殺滅效果的研究[9]。聚維酮碘作為目前畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)常用的碘制劑之一，可殺死大部分細(xì)菌、真菌和病毒[10]，是一種高效、廣譜的消毒殺菌劑。殺菌范圍廣，作用強(qiáng)能殺死病毒、細(xì)菌、芽孢、繁殖體、真菌、原蟲。無刺激性，毒性低。低濃度效果好，成本低[11]。夏勇等的研究結(jié)果顯示聚維酮碘消毒劑安全無毒[12]。而戊二醛作為養(yǎng)殖場(chǎng)常用消毒劑之一，是一種廣譜、高效的滅菌劑，對(duì)芽胞、一般的細(xì)菌繁殖體、分枝桿菌、病毒、真菌等都有良好的殺滅作用[13]。但是，聚維酮碘和戊二醛對(duì)牛型結(jié)核分枝桿菌的殺菌效果還未見報(bào)道。本研究采用養(yǎng)殖場(chǎng)常用的鹵素類消毒劑聚維酮碘、醛類消毒劑戊二醛進(jìn)行殺菌試驗(yàn)，試驗(yàn)通過觀察不同濃度消毒劑、不同消毒時(shí)間對(duì)結(jié)核桿菌的殺菌效果，為養(yǎng)殖場(chǎng)在開展對(duì)牛結(jié)核病的的預(yù)防工作選擇消毒劑時(shí)提供理論依據(jù)。2 材料與方法 試驗(yàn)藥品戊二醛、聚維酮碘、磷酸二氫鉀、枸櫞酸鎂、硫酸鎂、谷氨酸鈉、丙三醇、馬鈴薯淀粉、新鮮雞蛋、孔雀石綠、NaCl、蒸餾水等。以上試劑均購(gòu)自國(guó)產(chǎn)分析純。 試驗(yàn)所需細(xì)菌由實(shí)驗(yàn)室提供。高壓滅菌鍋、離心機(jī)、水浴鍋、無菌操作臺(tái)、生化培養(yǎng)箱、移液槍等。 試驗(yàn)方法吸取少量生理鹽水置于載玻片上，用接種環(huán)適量挑取在改良羅琴培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的單菌落于載玻片上，涂抹均勻，用齊尼二氏染色法染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察，如可見紅色、抗酸性、短桿狀、微彎、團(tuán)狀聚集菌體, 偶見分枝即為牛結(jié)核分枝桿菌。 改良羅氏培養(yǎng)基的制作 磷酸二氫鉀14g，，丙三醇12mL，溶解于600mL水中，加馬鈴薯淀粉30g，混勻，沸水浴煮1h成糊狀，待冷后加經(jīng)消毒紗布過濾的新鮮雞卵液1000mL，再加入無菌的2%孔雀綠水溶液20mL，混勻后分裝于無菌試管內(nèi)，85℃間歇滅菌2次，冷卻后經(jīng)37℃無菌試驗(yàn)24h備用。 試驗(yàn)室提供給5%的聚維酮碘和2%的戊二醛。試驗(yàn)所需其他濃度均以原濃度為基礎(chǔ)，加入滅菌蒸餾水配制。每個(gè)濃度消毒劑均為2ml。 標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)媳葷峁艿闹苽?表1: 麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)管的制備Table Ⅰ: preparation of McFarland standard tube 麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)管號(hào) 體積（ml）細(xì)菌數(shù)108/mlBaCl2(%)H2SO4(1%) 1 2 3 4