【文章內(nèi)容簡介】 用瑞氏或伊紅 美藍(lán)染色液染色，油鏡下計數(shù)100個白細(xì)胞，報告嗜酸性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。（ 徐寶貴 朱 炎 ）第三節(jié) 血栓與止血的檢驗血管壁與內(nèi)皮細(xì)胞檢驗出血時間（BT） 出血時間檢測是指皮膚受特定條件的外傷后，出血自行停止所需的時間。此過程反映皮膚毛細(xì)血管與血小板相互作用，包括血小板粘附，血小板活化和釋放以及血小板聚集等反應(yīng)。 1. 出血時間“測定器法”自肘前窩凹下二橫指處，經(jīng)常規(guī)消毒后，使刀片由“測定器”內(nèi)刺入皮膚，啟動秒表，每隔半分鐘用干凈濾紙吸干流出的血液，直至出血自然停止，按停秒表，記錄出血時間。 2. Duke法，自耳垂或指尖取血。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版） 【 注意事項 】 測定器法： 1. 采取部位應(yīng)保暖，血液應(yīng)自動流出。 2. 由于刺入皮膚的刀片長度和深度均固定，故“測定器法”的結(jié)果較為準(zhǔn)確。 3. 濾紙吸干流出血液時，應(yīng)避免與傷口接觸。 4. 試驗前1周內(nèi)不能服用抗血小板藥物，如阿司匹林等，以免影響結(jié)果。阿司匹林耐量試驗（ATT） 口服少量阿司匹林后，可使某些血栓和出血患者的出血時間延長。 【 方法與操作 】 定量口服阿司匹林后2h，測定出血時間，當(dāng)結(jié)果可疑時，可于4h后重復(fù)測定出血時間一次，詳見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 【 試 劑 】 阿司匹林片（）。 【 附 注 】 1. 服藥前出血時間明顯延長者，或臨床有明顯出血癥狀者，或有阿司匹林禁忌證患者，不宜作此試驗。 2. 阿司匹林有引起出血副作用，對準(zhǔn)備手術(shù)或術(shù)后1周以內(nèi)及血友病患者忌作本試驗。內(nèi)皮細(xì)胞功能試驗 血管性假血友病因子抗原（vWF : Ag）測定（ELISA法） 【 標(biāo) 本 】 ~，注入抗凝管〔30mmol/L 枸緣酸枸椽酸鈉緩沖液（）〕內(nèi)，（1:9 v/v）充分混勻，在1h內(nèi)分離血漿，立即測定或放 20℃1周內(nèi)測定。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版） 【 附 注 】 1. 對血漿中血管性假血友病因子抗原含量過高的標(biāo)本，應(yīng)作稀釋后再測定?！? 2. 凡ELISA檢測中須注意的問題均要重視。 3. 除此法外，還可選用免疫火箭電泳法或單抗酶聯(lián)免疫吸附法。6酮－前列腺素Fla（6酮－PG Fla）測定 【 標(biāo) 本 】 采用血漿標(biāo)本。 【 方法與操作 】 ELISA法?，F(xiàn)有商品試劑盒出售，嚴(yán)格按說明書步驟操作。 【 附 注 】 1. 如第二抗體為羊抗兔，則不宜測定兔血標(biāo)本。 2. 除ELISA法外，尚有放射免疫法。血小板數(shù)量和功能檢驗血小板計數(shù)和平均血小板體積測定 血小板計數(shù)： 目視計數(shù)法。 【 標(biāo) 本 】 末梢血或抗凝靜脈血。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 【 試 劑 】 1. 草酸銨法稀釋液。 2. 許汝和稀釋液。 【 附 注 】 1. 血小板稀釋液要清潔。防微粒和細(xì)菌污染。試管和吸管也應(yīng)清潔、干凈。 2. 針刺應(yīng)稍深，使血流通暢。拭去第一滴血后，首先采血作血小板檢測，動作要快，防止血小板聚集和破壞。采取標(biāo)本后盡快計數(shù)。 3. 血液稀釋液充分混勻后，滴入計數(shù)池內(nèi)后，要靜置10~15min。室溫高時注意保持計數(shù)池周圍的濕度，以免水分蒸發(fā)。 4. 計數(shù)時光線要適中，注意有折光性的血小板與雜質(zhì)灰塵相區(qū)別，附在血細(xì)胞旁邊的血小板也要注意，不要漏掉。血小板計數(shù)儀計數(shù) 【 標(biāo) 本 】 末梢血。 【 方法與操作 】 使用血小板計數(shù)儀及與其相匹配的稀釋液。操作詳見儀器使用說明書。平均血小板體積（MPV）測定 【 標(biāo) 本 】 根據(jù)儀器的要求用末稍血或靜脈取血注入抗凝管（） 【 方法與操作 】 自動化血細(xì)胞計數(shù)儀均可檢測血小板功能檢驗 血小板粘附試驗 【 標(biāo) 本 】 ~。 【 方 法 】 1. 玻珠柱法： （1）操作：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 （2）注意事項： 1）取血過程必須順利，掌握血液通過玻珠柱的速度，流速太快，粘附率降低，流速太慢會使粘附率增高。 2）玻珠柱為一次性用具，用后即棄去。 3）待用玻珠柱應(yīng)置于干燥器中貯存，受潮后粘附率下降。 2. 玻璃濾器法： 【 標(biāo) 本 】 。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。血小板聚集試驗（PAgT） 【 標(biāo) 本 】 109mmol/L枸椽酸鈉的硅化離心管內(nèi)，充分混勻。 【 試 劑 】 1. 富含血小板血漿（PRP）及貧含血小板血漿（PPP）。 2. 血小板聚集誘導(dǎo)劑ADP、腎上腺素、膠原、瑞斯托霉素（Ristocetin）等。 【 方法與操作 】 PAgT比濁法，按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）步驟操作。 【 注意事項 】 1. ~，可測得最佳結(jié)果。pH＜＞，可使聚集抑制或消失。 2. 阿司匹林、潘生丁、肝素、雙香豆素等可抑制聚集，尤其阿司匹林抑制聚集作用時間可持續(xù)1周。 3. 采血后標(biāo)本應(yīng)放在15~25℃下，切忌冰箱內(nèi)保存，并在3h內(nèi)作完實(shí)驗。凝血因子檢驗全血凝固時間檢驗（CT） 【 標(biāo) 本 】 靜脈取血3ml。 【 方法與操作 】 試管法、硅管法操作參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 【 附 注 】 1. 靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。 2. 水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結(jié)果?；罨糠帜蠲笗r間測定（APTT） 【 標(biāo) 本 】 自靜脈取血，用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 方法與操作】 按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進(jìn)行。 【 附 注 】 1. 標(biāo)本應(yīng)及時檢測，最遲不超過2h。 2. 分離血漿應(yīng)在3000r/min，離心10min。 3. 本試驗較試管法全血凝血時間敏感，能檢出因子Ⅷ：C＜25％輕型血友病。血漿凝血酶原時間測定（PT，一期法） 【 標(biāo) 本 】 ，用109mmol/。 【 試 劑 】 1. 組織凝血活酶浸出液； 2. ； 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 【 附 注 】 1. 采血后宜在1h內(nèi)完成，置冰箱4℃保存,不應(yīng)超過4h，20℃下可放置2周，70℃可放置6個月。 2. 水溫箱控制在37℃177。1℃，過高過低均影響結(jié)果。簡易凝血活酶生成試驗（STGT） 【 標(biāo) 本 】 ，混勻，即成溶血液，備用。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）纖溶系統(tǒng)檢驗優(yōu)球蛋白溶解時間測定（ELT） 【 標(biāo) 本 】 ，混勻。 【 試 劑 】 1. 109mmol/L枸櫞酸鈉液； 2. 1%醋酸液； 3. （）硼酸鹽緩沖液； 4. 。 【 方法與操作 】 加鈣法。操作參見《全國臨床檢驗操作常規(guī)》（第二版）。 【 注意事項 】 1. 采血時，止血帶不宜扎得過緊，不得超過5min。 2. 觀察溶解標(biāo)本以不見絮狀物為準(zhǔn)。 3. 當(dāng)纖溶極度亢進(jìn)時，體內(nèi)纖酶原基本被消耗盡時，本試驗可呈假陰性。組織纖溶酶原激活物測定（tpA : A） 【 標(biāo) 本 】 自靜脈采血。 【 方法與操作 】 發(fā)色底法。操作見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 【 注意事項 】 1. 采血時最好不用止血帶，加壓后會引起tpA進(jìn)入血液，取血后盡快在低溫分離血漿。 2. 標(biāo)本必須酸化處理，否則受纖溶酶原激活抑制物（PAI）的影響較大。纖溶酶原活性測定（PLG : A） 【 標(biāo) 本 】 , 109mmol/l枸櫞酸鈉液混勻。 【 試 劑 】 1. （）。 2. 尿激酶。 3. 50%（v/v）甘油溶液。 4. 50%（v/v）醋酸液。 5. 正常人混合血漿。 6. 國產(chǎn)發(fā)色底物140450（上海生化所東風(fēng)試劑公司產(chǎn)品）。 【 方法與操作 】 發(fā)色底物法。操作參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。D二聚體測定 高凝狀態(tài)的患者，血栓性疾病和彌漫性血管內(nèi)凝血時，血漿D二聚體明顯升高是診斷DIC的重要依據(jù)。 【 標(biāo) 本 】 采靜脈血1~，注入抗凝管（枸櫞酸鈉，）內(nèi)混勻。 【 方法、試劑與操作 】 ELISA法，操作嚴(yán)格按商品出售的試劑盒說明書進(jìn)行。 【 注意事項 】 1. 使用的抗凝劑量，不應(yīng)超過血總體積10%。 2. 待檢血漿在室溫保存8h或4℃4天內(nèi)，D二聚體含量基本不變，若需長期保存，可置20℃保存，操作時置于37℃水浴中快速復(fù)溶。 3. 市售D二聚體乳膠試劑盒及金標(biāo)試劑盒使其檢測更為方便，但不能定量。血漿魚精蛋白副凝固時間（3P）試驗 【 標(biāo) 本 】 ~，注入枸櫞酸鈉抗凝管內(nèi)，混勻。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 【 試 劑 】 1. 109mmol/L枸櫞酸鈉液。 2. 10g/L硫酸魚精蛋白液（）。 【 注意事項 】 1. 本試驗不宜用草酸鹽、肝素或EDTA鹽作抗凝劑。 2. 抽血不順利、抗凝不完全、標(biāo)本保存于冰箱、試驗時間已到未及時觀察結(jié)果等均可致假陽性結(jié)果。 3. 水浴箱溫度太低或纖維蛋白原的含量過低，會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。血清纖維蛋白降解產(chǎn)物（FDP）測定 【 標(biāo) 本 】 采用無溶血的血清。 【 方法、試劑與操作 】ELISA法。試劑現(xiàn)已有商品試劑盒供應(yīng)，操作按說明書步驟進(jìn)行。循環(huán)抗凝物質(zhì)檢驗?zāi)笗r間測定（TT） 【 標(biāo) 本 】 自靜脈取血1~，注入枸櫞酸鈉抗凝管內(nèi)，混勻。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版） 【 試 劑 】 1. 109mmol/L枸櫞酸鈉液 2. 凝血酶溶液 【 附 注 】 1. 采血后宜在1h內(nèi)完成，置冰箱內(nèi)保存不應(yīng)超過4h。 2. 。血漿肝素或類肝素抗凝物質(zhì)檢驗（甲苯胺藍(lán)糾正試驗） 【 標(biāo) 本 】 靜脈枸櫞酸鈉抗凝血。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。 【 附 注 】 本試驗中加甲苯胺藍(lán)后，凝血酶時間縮短5s以上者，提示待檢血，有肝素或類肝素增多。蘄蛇酶時間測定（AT） 【 標(biāo) 本 】 （109mmol/L）枸椽酸鈉抗凝。 【 試 劑 】 1. ； 2. 109mmol/L枸椽酸鈉液。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。（ 何金昌 徐淑屏 ） 第四節(jié) 溶血性貧血的檢驗 紅細(xì)胞滲透脆性試驗 【 標(biāo) 本 】 1. 簡易法，靜脈血為宜。 2. 比色法，用肝素抗凝管，~，混勻。 【 方法及操作與試劑 】 1. 簡易法：~，立即滴入試管架上含有不同量的NaCL及蒸餾水的各管中，每管１滴，貧血患者可加2滴，搖勻，靜置，室溫2h，觀察結(jié)果。詳見《臨床實(shí)驗診斷學(xué)上冊》。 2. 比色法：見《臨床實(shí)驗診斷學(xué)上冊》。 【 附 注 】 1. 簡易法： （1）試劑配制要準(zhǔn)確，每次配制量不宜過大，1~2個月內(nèi)需更換1次試劑。 （2）如取耳垂血要使血液流出暢通，如靜脈血要求注射器干燥。 （3）如用抗凝血，以去纖維蛋白或肝素抗凝血為合適。 （4）如開始及完全溶血的結(jié)果不易判斷時，可離心后觀察。 （5）地中海貧血的滲透脆性降低，需作低濃度NaCL液檢測。 2. 比色法： （1）如在室溫下實(shí)驗，需在2小時內(nèi)比色結(jié)束。 （2）血與NaCL緩沖液的PH值及溫度對檢查結(jié)果均有一定影響。 紅細(xì)胞孵育后滲透脆性試驗 【 標(biāo) 本 】 用肝素抗凝血1~，混勻后備用。 【 方法與操作 】 見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第二版 【 試 劑 】 9g/L NaCl磷酸鹽緩沖液（） 【 附 注 】