【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 實(shí)驗(yàn)室樣品中）制備試料所需的所有內(nèi)容，如果適宜，本條應(yīng)敘述稱量或量取試料的方法。本條應(yīng)敘述試料的質(zhì)量或體積和稱量的準(zhǔn)確程度，如果必要，還應(yīng)說(shuō)明其他有關(guān)的特性。本條還應(yīng)指明是否需要一份以上的試料（例如，當(dāng)需要把兩次或更多次測(cè)定值的平均值作為測(cè)定結(jié)果時(shí)）。 試料用質(zhì)量表示試料用質(zhì)量表示，其稱量通常用下列方式之一表示： 確定量當(dāng)需要準(zhǔn)確稱取確定量的試樣時(shí)，應(yīng)用下列示例表示。示例1：“=177。1mg。” 示例2：“=（177。）g?！?示例3：“，準(zhǔn)確到1mg?！? 大約量當(dāng)需要準(zhǔn)確稱取大約量的試樣時(shí)，應(yīng)用下列示例表示。示例：“稱取約2g試樣，準(zhǔn)確到1mg。” 試料用體積表示試料用給定體積表示時(shí)，采用下列兩種方法指明量取試料的準(zhǔn)確度： 如果要求使用已知準(zhǔn)確度的儀器，建議描述量取試樣的量時(shí)應(yīng)包括儀器的相關(guān)編號(hào)。示例1：“用移液管（）量取10mL測(cè)試溶液?！?而儀器的準(zhǔn)確度應(yīng)在“儀器和設(shè)備”一章中說(shuō)明。示例2：“1 移液管 符合GB A級(jí)?！? 如果對(duì)儀器或設(shè)備在前面沒有規(guī)定，測(cè)量所要求達(dá)到的準(zhǔn)確程度應(yīng)在“分析步驟”的條文中指明。示例：“量取10mL177?！? 從其他測(cè)定中得到的試料如果試料是其他測(cè)定的產(chǎn)物（例如，濾液、沉淀、殘余物），其來(lái)源應(yīng)使用大寫字母清楚地標(biāo)識(shí)。示例：“溶液A——由測(cè)定硫酸鈣得到的濾液C?！? 儀器的調(diào)試(或測(cè)試條件) 應(yīng)指出儀器的調(diào)試按儀器說(shuō)明書的要求進(jìn)行。 如果需要，應(yīng)給出儀器測(cè)試的各項(xiàng)參數(shù)。 如果需要，應(yīng)給出儀器分析所需的環(huán)境條件。 校準(zhǔn) 如果分析方法需要對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)在本條給出儀器校準(zhǔn)的方法并寫出完整的詳細(xì)步驟。必要時(shí)，應(yīng)給出儀器設(shè)備在兩次檢定或校準(zhǔn)之間期間核查的方法、校準(zhǔn)頻率（例如，批量分析時(shí)）。如果有關(guān)校準(zhǔn)的詳細(xì)步驟與“測(cè)定”自身的操作完全或部分相同時(shí)，那么其中的一條應(yīng)引用另一條。示例：“……～。” 如果分析方法需要繪制校準(zhǔn)曲線，本條應(yīng)指出校準(zhǔn)方法及詳述完成校準(zhǔn)操作的所有必不可少的細(xì)節(jié)。若需要，指出校準(zhǔn)所用標(biāo)準(zhǔn)樣品系列的制備、使用標(biāo)準(zhǔn)樣品的條件、校準(zhǔn)曲線的繪制和校準(zhǔn)數(shù)據(jù)的表示方式。必要時(shí)，還應(yīng)指出校準(zhǔn)的頻次。 空白試驗(yàn) 在分析樣品的同時(shí)，每次均應(yīng)作空白試驗(yàn)，也即全程序空白試驗(yàn)，空白試驗(yàn)所得的結(jié)果稱為空白試驗(yàn)值。 空白試驗(yàn)應(yīng)與樣品測(cè)定同時(shí)進(jìn)行，并采用相同的分析步驟，取相同的所有試劑（滴定法中的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的用量除外），但空白試驗(yàn)不加試料。 在某些情況下，不加試料可能導(dǎo)致空白試驗(yàn)的條件與實(shí)際測(cè)定的條件不同（如pH值）而影響分析方法的應(yīng)用。在這種情況下，本條應(yīng)闡明考慮到這樣的差異而對(duì)空白試驗(yàn)的分析步驟必須進(jìn)行的調(diào)整，必要時(shí)，仍應(yīng)使空白試驗(yàn)與測(cè)定所用的試劑量相同。 如果需要用空白試驗(yàn)去驗(yàn)證試劑的純度或?qū)嶒?yàn)室環(huán)境和儀器的清潔度，本條應(yīng)指明進(jìn)行空白試驗(yàn)的所有條件。 測(cè)定或測(cè)試 測(cè)定操作要按測(cè)定過(guò)程的先后順序分段敘述。 每一步操作應(yīng)準(zhǔn)確地?cái)⑹?，?yīng)在適當(dāng)?shù)臈l或段中以容易閱讀的形式陳述有關(guān)的測(cè)試。 在分析步驟中，如有必要保留其中某一操作步驟得到的產(chǎn)物作為以后某測(cè)定的“試料”，則應(yīng)予以明確說(shuō)明，并用參考符號(hào)或字母標(biāo)識(shí)該“試料”，當(dāng)以后的分析過(guò)程中用到它時(shí)，便于識(shí)別。 結(jié)果計(jì)算應(yīng)指明結(jié)果計(jì)算的方法。a) 應(yīng)說(shuō)明以下幾點(diǎn)：——表示結(jié)果的單位；——計(jì)算公式；——公式中使用的代數(shù)符號(hào)的含義；——表示量的單位；——計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后的位數(shù)或有效位數(shù)。有效位數(shù)數(shù)值的修約按照GB8170。b) 量的符號(hào)應(yīng)符合GB3101和GB3102。c) 如果某種符號(hào)代表同一個(gè)量的不同含義時(shí)，應(yīng)將數(shù)字下標(biāo)（0，1，2，…）加到符號(hào)上（例如：,）。示例1：水質(zhì)中氯化物的測(cè)定采用滴定法，以硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液作滴定劑。計(jì)算方法如下：水中氯化物含量（mg/L）按下式計(jì)算：=式中：——蒸餾水消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液量，單位為毫升（mL）；——試樣消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液量，單位為毫升（mL）；——硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；——試樣體積，單位為毫升（mL）。計(jì)算結(jié)果的有效位數(shù)根據(jù)操作中各參加計(jì)算因素的有效位數(shù)確定。示例2：水中氰化物的測(cè)定采用分光光度法。計(jì)算方法如下：氰化物含量（mg/L）以氰離子（CN）計(jì)，按下式計(jì)算：=式中：——從校準(zhǔn)曲線上查出試料的氰化物含量，單位為微克（μg）；——從校準(zhǔn)曲線上查出空白試驗(yàn)的氰化物含量，單位為微克（μg）；——樣品的體積，單位為毫升（mL）；——試樣的體積，單位為毫升（mL）；——試料的體積，單位為毫升（mL）； 精密度和準(zhǔn)確度 對(duì)于經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室間測(cè)試的方法，應(yīng)指明其精密度數(shù)據(jù)（例如，重復(fù)性和再現(xiàn)性）。應(yīng)按ISO5725的有關(guān)部分或其他適用的標(biāo)準(zhǔn)（應(yīng)引用這些標(biāo)準(zhǔn)）計(jì)算精密度數(shù)據(jù)。 對(duì)于經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室間測(cè)試的方法，還應(yīng)指明其準(zhǔn)確度數(shù)據(jù)（例如，測(cè)量方法的誤差和確定誤差時(shí)所用的參照值以及加標(biāo)回收率）。 方法標(biāo)準(zhǔn)不具備提供精密度或允許差數(shù)據(jù)的條件時(shí)，針對(duì)方法的特點(diǎn)，必要時(shí)應(yīng)給出平行測(cè)定結(jié)果之差的允許差值?？稍诮Y(jié)果計(jì)算條文的最后，另起一行用下列用語(yǔ)表述：——“取兩次平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為測(cè)定結(jié)果，兩次平行測(cè)定結(jié)果之差不得大于?！? 應(yīng)在附錄中給出附加的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，示例參見附錄A。 不確定度 應(yīng)逐步開展不確定度的評(píng)定工作。 應(yīng)列出測(cè)量不確定度的評(píng)定方法，給出參照資料/標(biāo)準(zhǔn)或簡(jiǎn)要列出方法。 如適宜，應(yīng)規(guī)定測(cè)量不確定度主要來(lái)源的值的極限，并規(guī)定計(jì)算結(jié)果的表示方式。不確定度來(lái)源包括但不限于所用的參考標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、所用方法和設(shè)備、環(huán)境條件、被檢測(cè)樣品的性能和狀態(tài)以及操作人員。 質(zhì)量保證和控制 應(yīng)說(shuō)明質(zhì)量保證和控制的程序。應(yīng)給出有關(guān)控制樣品、控制頻率和控制準(zhǔn)則等內(nèi)容，以及當(dāng)過(guò)程失控時(shí)，應(yīng)采取的措施。 如果必要，應(yīng)對(duì)所用儀器做一次預(yù)先檢查，或用有證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（標(biāo)準(zhǔn)樣品）、合成樣品或已知純度的天然產(chǎn)品校驗(yàn)分析方法的有效性，應(yīng)給出進(jìn)行這一校驗(yàn)需要的所有細(xì)節(jié)。 質(zhì)量控制應(yīng)包括下列內(nèi)容：a） 重復(fù)測(cè)量結(jié)果的控制；b） 結(jié)果準(zhǔn)確性的控制；c） 影響檢出限因素的控制（空白值的控制）；d） 檢出限的確定；必要時(shí)，還應(yīng)包括：e） 斜率的控制要求；f） 質(zhì)量控制圖的繪制等內(nèi)容。 特殊情況 應(yīng)包括分析的樣品中是否因含有特殊成分而需對(duì)分析步驟做出的各種修改。這些修改均應(yīng)在“范圍”一章中提及。每種特殊情況應(yīng)給出不同的小標(biāo)題。 修改分析方法的內(nèi)容應(yīng)包括以下方面：——修改后分析方法的原理，包括對(duì)于一般分析步驟原理的必要修改，或敘述新分析步驟的原理?！绻枰獙?duì)一般采樣方法進(jìn)行修改，則應(yīng)說(shuō)明新的采樣方法?！路治霾襟E或修改的說(shuō)明。如果只給出修改內(nèi)容，則有必要指明每個(gè)修改在一般步驟中的具體位置。簡(jiǎn)便方法為：指明未修改的步驟的最后一段（必要時(shí)重復(fù)最后一句或部分句子），然后給出修改，最后指明緊跟在修改之后的第一個(gè)未修改的段落（必要時(shí)重復(fù)其第一句或部分句子）。——適用于修改后的或附加的分析步驟的計(jì)算方法。 上述修改內(nèi)容即使很少，也不要在“分析步驟”一章中描述這些修改內(nèi)容，為了清楚起見，仍要以“特殊情況”為標(biāo)題單獨(dú)列為一章。 注意事項(xiàng)為方便方法的應(yīng)用，對(duì)于分析過(guò)程中可能出現(xiàn)的異?，F(xiàn)象及其處理辦法、使用該方法的特殊要求、操作過(guò)程中需要注意的事項(xiàng)等，可以以“注”的形式置于有關(guān)條款或子條款的末尾，或者，當(dāng)內(nèi)容比較冗長(zhǎng)時(shí)，可在本章中以“注解”專門列出。 廢棄物的處理如需要，給出對(duì)健康或環(huán)境有危險(xiǎn)或有危害的所測(cè)試的樣品、所用試劑或測(cè)試后產(chǎn)生的廢棄物的安全處置方法。示例：“廢酸、廢堿可用中和法處理或集中收集送往廢物處置場(chǎng)?！? 附錄如果標(biāo)準(zhǔn)的詳細(xì)內(nèi)容便于用附錄的形式表述且能使文本主體更簡(jiǎn)潔，那么可以使用附錄。應(yīng)明確說(shuō)明附錄是“規(guī)范性附錄”，還是“資料性附錄”。 參考文獻(xiàn)如果需要資料性引用文件，可以在文本的相應(yīng)位置通過(guò)引用給出；或者，如果有多個(gè)資料性引用文件時(shí)，可以在文本后的“參考文獻(xiàn)”中列出。8 方法驗(yàn)證 通則 對(duì)建立的標(biāo)準(zhǔn)分析方法、原標(biāo)準(zhǔn)方法作出改進(jìn)、分析方法上升為標(biāo)準(zhǔn)分析方法時(shí)，都需經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，以使方法的各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到規(guī)定的要求。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證也適用于非標(biāo)準(zhǔn)方法的采用和對(duì)新方法/新技術(shù)研究建立新方法。 在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證之前，首先要制定一個(gè)合理的設(shè)計(jì)方案。根據(jù)影響方法的精密度和準(zhǔn)確度的主要因素和數(shù)理統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求，確定參加實(shí)驗(yàn)室的數(shù)目，選擇合適的實(shí)驗(yàn)室、樣品的類型、含量水平、分析人員、分析設(shè)備、分析時(shí)間及重復(fù)測(cè)定次數(shù)。 實(shí)驗(yàn)中，對(duì)于測(cè)試所需的儀器、天平、吸管、滴定管、容量瓶等，必須按規(guī)定進(jìn)行檢定和校準(zhǔn)。 所用試劑及實(shí)驗(yàn)用水的規(guī)格、純度必須符合要求，否則要進(jìn)行純化。特殊用水如無(wú)酚水、無(wú)鉛水等，必須按規(guī)定制備。 在方法驗(yàn)證前，參加驗(yàn)證的操作人員首先要做方法練習(xí)，包括全程序空白試驗(yàn)、繪制校準(zhǔn)曲線，測(cè)定1～2個(gè)已知樣品，以熟悉和掌握方法原理、操作步驟及流程。 在方法驗(yàn)證中需用的基準(zhǔn)物質(zhì)，如標(biāo)準(zhǔn)溶液，要與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比對(duì)、核查。測(cè)量完成后，計(jì)算兩者的平均值，若在95%置信區(qū)間無(wú)顯著差異即可使用。否則應(yīng)檢查原因或重新配制，再重復(fù)比對(duì)，直至無(wú)顯著差異為止。 方法的檢出限與測(cè)定限 檢出限方法檢出限的確定方法有以下幾種，根據(jù)不同的檢測(cè)方法選擇合適的確定方法。a）式中： ——檢出限； ——全試劑空白響應(yīng)值； ——標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程中的斜率；——空白樣品多次測(cè)定的平均值（）； ——次空白測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差；——根據(jù)一定置信水平確定的系數(shù)，值為3。b） 式中：——檢出限；——批內(nèi)自由度；[，為空白試驗(yàn)批數(shù)，為批平行測(cè)定的次數(shù)]；——(單測(cè))，自由度為的值；——空白平行測(cè)定批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差。c) 對(duì)某些分光光度法。d） 氣相色譜分析的最小檢測(cè)量系指檢測(cè)器恰能產(chǎn)生與噪聲相區(qū)別的響應(yīng)信號(hào)時(shí)所需進(jìn)入色譜柱的物質(zhì)的最小量，一般為恰能辨別的響應(yīng)信號(hào)，最小應(yīng)為噪聲的兩倍。最小檢測(cè)濃度系指最小檢測(cè)量單位體積所對(duì)應(yīng)的濃度。e） 某些離子選擇電極法規(guī)定：當(dāng)校準(zhǔn)曲線的直線部分外延的延長(zhǎng)線與通過(guò)空白電位且平行于濃度軸的直線相交時(shí)，其交點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的濃度值即為該離子選擇電極法的檢出限。 測(cè)定下限測(cè)定下限指在限定誤差能滿足預(yù)定要求的前提下，用特定方法能夠準(zhǔn)確定量測(cè)定被測(cè)物質(zhì)的最低濃度或含量。以4MDL（檢出限）為測(cè)定下限（RQL），即4倍檢出限濃度作為測(cè)定下限，其測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差約為10%。 測(cè)定上限測(cè)定上限指在限定誤差能滿足預(yù)定要求的前提下，用特定方法能夠準(zhǔn)確地定量測(cè)量待測(cè)物質(zhì)的最大濃度或量。以工作曲線峰值前的重復(fù)測(cè)試結(jié)果作為測(cè)定上限。 方法檢出限與測(cè)定限的確定a） 每天平行測(cè)定兩個(gè)空白溶液，共測(cè)5d，結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B4）中，并按表中規(guī)定進(jìn)行計(jì)算。每天繪制一條校準(zhǔn)曲線（至少6個(gè)濃度點(diǎn)），共測(cè)5d，結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B4）中，并按表中規(guī)定進(jìn)行計(jì)算。b） 對(duì)色譜法，測(cè)定5個(gè)空白溶液，結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B5）中，并按表中規(guī)定進(jìn)行計(jì)算。繪制5條校準(zhǔn)曲線（至少5個(gè)濃度點(diǎn)），結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B5）中，并按表中規(guī)定進(jìn)行計(jì)算。根據(jù)表B表B5可以確定方法的檢出限、測(cè)定下限和測(cè)定上限。 方法的定量測(cè)定范圍定量測(cè)定范圍指在限定誤差能滿足預(yù)定要求的前提下，特定方法的測(cè)定下限至測(cè)定上限之間的濃度范圍。 方法的靈敏度靈敏度可以用儀器的響應(yīng)量或其他指示量與對(duì)應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)的濃度或量之比來(lái)描述。如分光光度法常以校準(zhǔn)曲線的斜率度量靈敏度。一個(gè)方法的靈敏度可因?qū)嶒?yàn)條件的變化而改變。在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，靈敏度具有相對(duì)的穩(wěn)定性。靈敏度的表示方法：通過(guò)校準(zhǔn)曲線可以把儀器響應(yīng)量與待測(cè)物質(zhì)的濃度或量定量地聯(lián)系起來(lái)，用下式表示它的直線部分：式中：——儀器響應(yīng)值；——方法的靈敏度，即校準(zhǔn)曲線的斜率；——待測(cè)物質(zhì)的濃度；——校準(zhǔn)曲線的截距。 方法的精密度a） 各實(shí)驗(yàn)室按方法的測(cè)定上限濃度c ，、 的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，每種標(biāo)準(zhǔn)溶液平行雙份，每份按方法操作步驟平行測(cè)定6次，將所得數(shù)據(jù)填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》表B6中，按規(guī)定公式進(jìn)行平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等各項(xiàng)參數(shù)的計(jì)算。b） 對(duì)色譜法，配制一低濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（～5倍所對(duì)應(yīng)的組分濃度值），對(duì)上述兩種溶液平行雙份，每份平行測(cè)定6次，結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》表B7中，并按表中規(guī)定進(jìn)行計(jì)算。c） 各實(shí)驗(yàn)室對(duì)實(shí)際樣品和實(shí)際樣品加標(biāo)進(jìn)行分析測(cè)試。這種實(shí)際樣品至少需3個(gè)，每個(gè)樣品平行雙份，每份平行測(cè)定6次。將所得數(shù)據(jù)填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B8）中。按規(guī)定公式進(jìn)行平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等各項(xiàng)參數(shù)的計(jì)算。d） 對(duì)各實(shí)驗(yàn)室的測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，按規(guī)定公式計(jì)算總平均值、重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差、重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、重復(fù)性限（r）和再現(xiàn)性限（R）的數(shù)值。并建立r（或R）與總平均值之間函數(shù)關(guān)系式，確定重復(fù)性限（r）和再現(xiàn)性限（R）的最終值。計(jì)算公式參見附錄《方法驗(yàn)證報(bào)告》。 方法的準(zhǔn)確度a） 使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行分析測(cè)定，通過(guò)分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，由所得結(jié)果了解分析的準(zhǔn)確度。 按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的規(guī)定和要求，完成1～3個(gè)濃度水平的國(guó)家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測(cè)定，每種樣品平行測(cè)定6次，將測(cè)試結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B9）中，按規(guī)定公式進(jìn)行平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等各項(xiàng)參數(shù)的計(jì)算。b） 用加標(biāo)回收率測(cè)定，在樣品中加入一定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)定其回收率（～2倍，但加標(biāo)后的總濃度應(yīng)不超過(guò)方法的測(cè)定上限濃度值）。將測(cè)試結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B9）中。c） 不同方法比較分析，對(duì)同一樣品分別使用具有可比性的不同方法進(jìn)行測(cè)定或不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)定。兩種方法對(duì)自配的同一標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，結(jié)果填入《方法驗(yàn)證報(bào)告》（表B10）中，并按表中規(guī)定進(jìn)行計(jì)算