【文章內(nèi)容簡介】 再加入待檢菌24 ％ mL，混勻，放37℃水浴中，2 min觀察一次(一般10 min內(nèi)可凝固)，待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化時間。如2 h內(nèi)不溶化，繼續(xù)放置24 h后觀察，如凝塊全部溶化為陽性，24 h仍不溶化為陰性?！　U菌肽敏感試驗：將被檢菌菌液涂于血平板上，同時以已知陽性菌株作對照，在37℃下放置18～24 h，有抑菌帶者為陽性?！　?結(jié)果報告：鏡檢革蘭氏陽性鏈狀排列球菌，血平板上呈現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗陽性，可報告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。A7 真菌檢測方法　　 操作步驟　　定性法：取樣液5 mL，加入到50 mL沙氏培養(yǎng)基中，置20～25℃培養(yǎng)7天，逐日觀察有無真菌生長?！　《糠ǎ喝右荷锨逡航臃N沙氏瓊脂培養(yǎng)基，即每個平皿中放入1 mL樣液，共接種6個平皿，每一平皿傾注冷卻至45～50℃的約15 mL上述瓊脂培養(yǎng)基，隨即轉(zhuǎn)動平皿使樣品與培養(yǎng)基充分混勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，置28℃培養(yǎng)72 h后開始觀察，共培養(yǎng)觀察7天，計算平板上菌落數(shù)。　　 結(jié)果報告　　定性法：如真菌培養(yǎng)管混濁應轉(zhuǎn)種沙氏瓊脂培養(yǎng)基，證實有真菌生長，可報告被檢樣品檢出真菌?！　《糠ǎ焊鶕?jù)平板上的菌落數(shù)，按式(A2)計算結(jié)果：　　每克樣品真菌菌落數(shù)(cfu/g)＝平板上菌落平均數(shù)180。 10 (A2)　　所得結(jié)果超過標準值的10％，必須重復檢測一次，以兩次結(jié)果的平均數(shù)為最終結(jié)果。附 錄 B產(chǎn)品抑菌和殺菌性能與穩(wěn)定性測試方法(補充件)　B1 樣品采集　　于同一批號三個大包裝中至少隨機抽取20件樣品，其中10件留樣，5件做抑菌或殺菌性能測試，5件做穩(wěn)定性測試。B2 試驗菌保存與準備　　試驗菌采用金黃色葡萄球菌 (ATCC 6538) 和大腸桿菌 (8099或ATCC 25922)。菌株接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，置于4℃下保存，每月轉(zhuǎn)種一次。　　試驗前，將試驗菌從保存瓊脂斜面上轉(zhuǎn)種，每天轉(zhuǎn)種一次，不超過2～3周。試驗時采用24 h新鮮細菌培養(yǎng)物。B3 穩(wěn)定性測試條件　　 自然留樣：將原包裝樣品置室溫下1年，進行抑菌或殺菌性能測試?！　?加速試驗：將原包裝樣品置54～57℃水浴中14天或37～40℃水浴中3個月，進行抑菌或殺菌性能測試。B4 中和劑試驗　　進行殺菌性能測試所選用的中和劑必須能通過以下實驗：　　實驗分以下六組進行：1組：樣片染菌5 min + 5 mL中和劑；2組：染菌對照片 + 5 mL中和劑；3組：樣片 + 5 mL中和劑 + 染菌對照片；4組：染菌對照片 + 磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)；5組：染菌樣片 + 5 mL PBS；6組：培養(yǎng)基對照?！　∫陨狭M分別作用10 min后取樣1 mL作活菌計數(shù)，1組長少量活菌；2組、3組、4組活菌數(shù)相似(誤差10％)；5組長少量菌或不長菌；6組無菌生長。B5 操作步驟　　將試驗菌24 mol/L PBS洗下，制成菌懸液(要求的濃度為：用其100 m L滴于對照樣片上，回收菌數(shù)為1180。 104～9180。 104 cfu/片)?！　?cm 180。 cm和對照樣片(與被試樣片同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理)各4片，分成4組置于4個滅菌平皿中?！　∪∩鲜鼍鷳乙海謩e在每個被試樣片和對照樣片上滴加100 m L，均勻涂布，開始計時，于20 min用無菌鑷分別將它們投入含5 mL PBS( mol/L，pH )的試管內(nèi)(如是殺菌試驗，則該試管中含5 mL相應中和劑)，用手振打80次，作適當稀釋，然后取其中2～3個稀釋度， mL，置于兩個平行平皿，用涼至40～45℃的營養(yǎng)瓊脂15 mL作傾注，轉(zhuǎn)動平皿，使其充分均勻，涼至瓊脂凝固翻轉(zhuǎn)平板，37℃培養(yǎng)24 h，作菌落計數(shù)?！　∫陨显囼?，重復三次，取其平均數(shù)。B6 計算　　抑(殺)菌率(％)＝ (B1)　　式中：A 對照樣品平均回收菌數(shù)；　　B 試驗樣品平均回收菌數(shù)。B7 結(jié)果報告　　抑菌率≥50％～90％，可以報告產(chǎn)品有抑菌作用；抑菌率≥90％，可以報告產(chǎn)品有較強抑菌作用。　　殺菌率≥90％，可以報告消毒濕巾有殺菌作用?！　‘a(chǎn)品經(jīng)自然留樣或加速試驗，其抑菌率≥50％或殺菌率≥90％，可以報告該產(chǎn)品的抑菌或殺菌作用在室溫下至少保持一年。附 錄 C產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量測試方法(補充件)　C1 測試目的　　確定產(chǎn)品消毒后啟用時間，當產(chǎn)品原料與消毒工藝改變時應予測試。C2 樣品采集　　于環(huán)氧乙烷消毒后，立即從同一消毒批號的三個大包裝中隨機抽取一定量小包裝樣品，采樣量至少應滿足兩次測試用(留一次量在必要時進行復測用)?！　》謩e于環(huán)氧乙烷消毒后24 h及以后每隔數(shù)天進行殘留量測定。C3 儀器操作條件　　儀器：氣相色譜儀，氫焰檢測器(FID)。操作條件：　　柱：15％丁二酸乙二醇聚酯Chromosorb W HP 60～80目；玻璃柱長2m，f 3 mm。柱溫：120℃。檢測器：150℃。氣化器：150℃。載氣量：氮氣：35 mL/min。氫氣：35 mL/min。空氣：350 mL/min。柱前壓約為108 kPa。C4 操作步驟 標準配制　　用100 mL玻璃針筒從純環(huán)氧乙烷小鋼瓶中抽取環(huán)氧乙烷標準氣(重復放空二次，以排除原有空氣)，塞上橡皮頭，用10 mL針筒抽取上述100 mL針筒中純環(huán)氧乙烷標準氣10 mL，用氮氣稀釋到100 mL(可將10 mL標準氣注入到已有90 mL氮氣的帶橡皮塞頭的針筒中來完成)。用同樣方法根據(jù)需要再逐級稀釋2～3次(稀釋1 000～10 000倍)，作三個濃度的標準氣體。按環(huán)氧乙烷小鋼瓶中環(huán)氧乙烷的純度、稀釋倍數(shù)和室溫計算出最后標準氣中的環(huán)氧乙烷濃度。　　計算公式如下：44*106273c=*....(C1)*103*K273+t　　式中：c 標準氣體濃度，m g/mL；　　K 稀釋倍數(shù)；　　t 室溫，℃。 樣品處理　　至少取2個最小包裝產(chǎn)品，將其剪碎，隨機精確稱取2 g，放入萃取容器中，加入5 mL丙酮，充分搖勻，放置4 h或振蕩30 min待用。 分析　　待儀器穩(wěn)定后，在同樣條件下， mL，待分析樣品各進樣2 m L。　　根據(jù)保留時間定性，根據(jù)峰面積(或峰高)進行定量計算。 計算　　以所進環(huán)氧乙烷標準氣的微克(m g)數(shù)對所得峰面