初始污染菌檢驗規(guī)程(編輯修改稿)
2024-08-09 22:23 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 于易于使用，結(jié)果與凝固的培養(yǎng)基的接觸表面直接相關(guān)。 表面上天然集聚的細(xì)胞群、菌落在瓊脂介面散布、瓊脂干燥、可能存在的厭氧菌等都是潛在的不利因素。 由于該方法的效率普遍較低，所以只有在其他方法都不適用的情況下使用接觸板和玻璃片一般只適用于平的或至少是規(guī)則的表面。 當(dāng)生物負(fù)載低和在產(chǎn)品構(gòu)型適宜時，在產(chǎn)品表面涂上熔化的瓊脂培養(yǎng)基(最高溫度在45B)，培養(yǎng)至生成可見菌落。當(dāng)生物負(fù)載低以及產(chǎn)品構(gòu)型適宜時，適用本方法。 表面上天然集聚的細(xì)胞群、菌落在瓊脂介面散布、瓊脂干燥、可能存在的厭氧菌等都是潛在的不利因素。 連續(xù)稀釋的最大可能數(shù)(MPN)法 MPN法，是業(yè)已建立并且充分文件化的用于估測產(chǎn)品上隨機分布的活性微生物數(shù)量的方法。其主要應(yīng)用為使用液體、粉體和半固體產(chǎn)品或原材料的食品和水工業(yè)。MPN法特別適用于生物負(fù)載平均值低的產(chǎn)品。，可將其一系列的稀釋液接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基中，使接種的培養(yǎng)基部分在隨后的培養(yǎng)中不產(chǎn)生可見生長。用表現(xiàn)出生長的稀釋度，用統(tǒng)計學(xué)方法來估計微生物的原始數(shù)量。目前利用統(tǒng)計學(xué)假設(shè)已經(jīng)設(shè)計出了MPN表格，可查表直接估計出微生物的最可能數(shù)目(MPN) 。 MPN法易于操作，但是可以使用的培養(yǎng)條件范圍則很有限，而且因該方法是基于統(tǒng)計學(xué)，所以它更適于一般性評價而不是精確測定。 如果存在殺滅微生物或抑制微生物的物質(zhì)。 移至培養(yǎng)基 總則 經(jīng)過處理后，通常在洗脫液中會生成微生物懸液，可用如下所描述的方法檢查其中的存活微生物數(shù)。 在移人培養(yǎng)基之前，還可能必須進行額外的處理，以便將聚集的微生物分解開來，以降低變異。在有些情況下，從試驗樣品中取下微生物的方法也會分解這種聚集。 如果洗脫液中有殺滅微生物或抑制微生物的物質(zhì)，這可以通過稀釋將其濃度降至無效，或通過過濾或化學(xué)中和法來去除。因為，殺滅微生物或抑制微生物的物質(zhì)可能會影響計數(shù)方法的選擇。 殺滅微生物或抑制微生物的物質(zhì)的存在可能會影響到培養(yǎng)方法的選擇。 膜過濾法 通常，經(jīng)膜過濾后，將濾器放到適宜的生長媒介上進行培養(yǎng)形成可見菌落是一種評價污染的有效方法。濾膜的孔徑大小應(yīng)適宜，能濾除通過它的洗提液中的微生物。 通常需要一真空或正壓(有些情況下)源。應(yīng)注意避免負(fù)壓過大，這會引起濾膜變形或損壞。，濾膜可以放在瓊脂表面或放在浸泡了營養(yǎng)媒介的吸水紗布墊上。濾膜表面上形成的菌落可以計數(shù)，也可從濾器上分離出來進行定性。，當(dāng)懷疑液體基質(zhì)中含有殺滅或抑制微生物時，膜過濾特別適用，先將洗提液中的微生物過濾出來，并可在培養(yǎng)前對濾膜上的微生物進行沖洗。但是有些類型的膜濾器可以吸收或釋放抑制微生物生長的物質(zhì)，所以只使用那些適于給微生物計數(shù)的濾膜是很重要的。濾膜和洗提液應(yīng)相容。 平板傾注 運用平板傾注技術(shù)，將一定量的懸浮液在不超過45℃下與熔化的瓊脂混合，隨后澆到平板中，放至凝固。對平板進行培養(yǎng)至菌落形成并計數(shù)。 傾注板技術(shù)并不能將微生物從洗提液中分離出來。如果存在殺滅微牛物或抑制微生物的物質(zhì)， 適用。 由于可澆倒的洗提液數(shù)量有限，所以，本方法可能會對微生物低濃度懸浮液不具備所要求的靈敏度。 培養(yǎng) （培養(yǎng)基 和培養(yǎng)條件） 應(yīng)注意，所有非選擇性厭氧培養(yǎng)方法可能導(dǎo)致兼性寄生的厭氧生物體的生長。 計數(shù) 使用群落計算的計數(shù)方法時，所建立的程序應(yīng)著重于不同情況，如：a)檢測小群落 (如使用立體顯微鏡)；A) 計算并記錄不平常的群落(. spreaders)；B) 計數(shù)并記錄大量群落(如TNTB)；d) 記錄連續(xù)稀釋的計數(shù)。 使用群落計算的計數(shù)方法時，應(yīng)考慮所產(chǎn)生群落的數(shù)量。此數(shù)量應(yīng)即能夠表現(xiàn)自我存在，而又不被其周圍群落所干擾。 標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)通常指定群落數(shù)量的某一低限。這一低限在生物負(fù)載低時不必用于生物負(fù)載的測定。 不同技術(shù)人員的測定結(jié)果的可變性應(yīng)予以評估。技術(shù)人員的可變性可以高至10 %。 對于自動計數(shù)方法，體系操作應(yīng)符合ISO/IEB 17025要求。 檢測微生物的其他方法估計生物負(fù)載時還可使用菌落計數(shù)以外的其他方法。這包括新陳代謝物測定和熒光法。這些方法被稱為“間接法”，為了建立起與以往確定的存活微生物數(shù)量的關(guān)系，它們必須對照菌落計數(shù)校準(zhǔn)。這
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