蝴蝶蘭的特性及發(fā)展畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2025-07-25 01:39 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 可以是頂芽（莖尖）、莖段（休眠芽），也可以是幼嫩的葉片或根尖，但目前最常見的是采用蝴蝶蘭的花梗。5 蝴蝶蘭組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù) 花梗腋芽和頂芽組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)蝴蝶蘭為總狀花序，通常由花?；克闫鹪诘?或至第7節(jié)才會(huì)分化花朵。除最基部一節(jié)外，剝開位于該節(jié)位以上各節(jié)的苞片都可看到腋芽，近頂端的節(jié)含有未完全分化的花原始體，花軸基部的芽往往為休眠芽，常具有苞片覆蓋，連同花序的頂端，都是花梗腋芽組織培養(yǎng)的好材料。對(duì)花梗腋芽有兩條培養(yǎng)途徑：一是切取帶腋芽的花梗莖段培養(yǎng)；二是不帶花梗組織剝?nèi)∏o尖生長(zhǎng)點(diǎn)培養(yǎng)。其中采用腋芽莖段培養(yǎng)，促使休眠芽啟動(dòng)向營(yíng)養(yǎng)芽轉(zhuǎn)化，爾后采用叢生芽方式直接增殖，從而不通過脫分化形成原球莖階段，可以減少變異，保持母株優(yōu)良特性，但增殖速度相對(duì)后者較慢?；üＲ秆颗囵B(yǎng)程序如圖1所示。不定芽 增殖 長(zhǎng)根 完整植株 出瓶 花梗腋芽或頂芽 誘導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)芽 莖尖 原球莖誘 增殖 完整小苗 根莖 嫩葉片 剝離莖尖 誘導(dǎo)原球莖 增殖 完整小苗圖1 花梗腋芽培養(yǎng)程序．外植體取材、消毒和接種 從蝴蝶蘭出現(xiàn)花梗到花朵凋謝，在花梗尚未枯黃前，都可用來(lái)作為外植體。剪下來(lái)的花梗，用75%乙醇的棉化球?qū)⒒üＭ獗淼幕覊m、雜物等擦拭干凈，然后以節(jié)為單位切成段，含芽的花梗時(shí)上下留不同長(zhǎng)度，置于超凈工作臺(tái)上，準(zhǔn)備消毒。 將花梗腋芽上的的苞葉去除，并用解剖刀把節(jié)與芽相接處清除干凈。另外，若在花梗表面有病斑或焦枯的部分，應(yīng)以解剖刀削去。 將處理的花梗放入消毒水中消毒，消毒時(shí)間依材料、質(zhì)地、嫩度的不同而異。一般花朵盛開或已凋謝的成熟花梗，%HgCl2吐溫80溶液中消毒10~15分；如果是較嫩的組織，消毒時(shí)間縮短為8~10分鐘。消毒期間，最好經(jīng)常搖動(dòng)瓶子，使消毒劑充分接觸外植體，提高消毒效果。 消毒時(shí)間到時(shí)，將材料取出，置于盛有無(wú)菌水的燒杯中，用無(wú)菌水蕩洗3~5次。 將沖洗后的外植體置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，用銳利的解剖刀截去兩端與消毒液接觸部分，取出中間部分插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。 花梗腋芽的另一種培養(yǎng)方法，既不帶花梗組織的采芽培養(yǎng)，消毒程序同上，無(wú)菌水沖洗3遍。用手握住腋芽節(jié)下端操作，用鑷子剝?nèi)グ~，露出腋芽后，用解剖刀切割，將腋芽自節(jié)上切下，% HgCl2吐溫80溶液第2次消毒5分鐘。用無(wú)菌水沖洗。用解剖刀片擠壓生長(zhǎng)點(diǎn)。接種于培養(yǎng)基上，切口避免接觸空氣。生長(zhǎng)點(diǎn)成活后，2~4周內(nèi)生長(zhǎng)肥大，誘導(dǎo)形成原球莖。在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)1~2個(gè)月后原球莖上端長(zhǎng)出葉片，下端增殖原球莖。 操作要點(diǎn) 消毒時(shí)間外植體的消毒過程是影響花梗培養(yǎng)成功與否的首要因素。消毒時(shí)間短，會(huì)導(dǎo)致消毒時(shí)間不完全；時(shí)間太長(zhǎng)有會(huì)傷害外植體。因此要掌握適當(dāng)?shù)南緯r(shí)間，消毒時(shí)間的控制不是一成不變的，還要考慮到材料本身，因此只有多實(shí)踐，在實(shí)踐中求取經(jīng)驗(yàn)。一旦萌芽長(zhǎng)出，不論是長(zhǎng)芽、抽梗，均可加以利用來(lái)繼代增殖培養(yǎng)，繁殖原球莖或誘導(dǎo)叢生芽，達(dá)到擴(kuò)大繁殖的目的。，切口不可接觸空氣，以免外植體被氧化產(chǎn)生褐變。 每隔1~2周移植到新鮮培養(yǎng)基上?；ü３醮谓臃N于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，基本培養(yǎng)基有Kyoto、KC、MS、3/4MS、1/3MS等，似乎不同種類的培養(yǎng)基均可獲得成功，只不過誘導(dǎo)率有高低之別。附加不同濃度的BA、NAA、胰蛋白胨或椰乳能提高誘導(dǎo)率。實(shí)驗(yàn)中采用誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/3MS+~+~+椰乳15%+蔗糖30克/升+瓊脂6克/升，或KC+++椰乳15%+蔗糖20克/升+瓊脂6克/升，另外添加檸檬酸300毫克/升防止褐變，通常可以獲得滿意效果。誘導(dǎo)蝴蝶蘭側(cè)芽萌動(dòng)的影響因素，主要集中在培養(yǎng)溫度，腋芽節(jié)位和激素濃度等方面。蝴蝶蘭花梗誘導(dǎo)培養(yǎng)操作時(shí)，每瓶接種一個(gè)外植體，置培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)室溫度為25177。1℃，光照強(qiáng)度1500勒，每天光照10~16個(gè)小時(shí)。通?；ü?cè)芽在適當(dāng)培養(yǎng)基上培養(yǎng)7~10天后，腋芽突出肥大，經(jīng)過15天后，腋芽萌發(fā)，可達(dá)1厘米以上不定芽。但是花梗側(cè)芽在離體培養(yǎng)條件下有兩種發(fā)育可能，一種是進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，長(zhǎng)出葉片而成幼小植株；另一種是長(zhǎng)出花梗。較高的培養(yǎng)溫度能夠促進(jìn)培養(yǎng)腋芽朝營(yíng)養(yǎng)芽方向分化，而較低的溫度則促進(jìn)花梗腋芽朝花芽方向分化；細(xì)胞分裂素BA有利于營(yíng)養(yǎng)芽萌發(fā)，在28℃培養(yǎng)條件下，誘導(dǎo)率隨BA濃度升高而提高，其中添加5毫克/升BA，花梗各部位的腋芽絕大多數(shù)發(fā)育為營(yíng)養(yǎng)芽。此外，生長(zhǎng)素的存在對(duì)腋芽誘導(dǎo)也有顯著促進(jìn)作用。蝴蝶蘭花梗腋芽誘導(dǎo)叢生芽的較好培養(yǎng)條件是在25℃~28℃進(jìn)行光照培養(yǎng)，光照度為1500勒左右，培養(yǎng)基中添加1~3毫克/。按此方法，一般接種7天后，外植體萌動(dòng)、膨大并向外伸長(zhǎng)，30天后長(zhǎng)出小葉，50天左右可長(zhǎng)出4~5片葉。而花序頂端小芽的啟動(dòng)較慢，40~50天后才見小葉萌發(fā)伸展。在培養(yǎng)過程中，外植體基部容易變褐色，因而要及時(shí)在原培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移或轉(zhuǎn)接到新鮮培養(yǎng)基上。這個(gè)培養(yǎng)程序的目的是使休眠的花梗腋芽和頂芽啟動(dòng)，形成營(yíng)養(yǎng)芽，在試管內(nèi)長(zhǎng)成無(wú)菌植株，便于進(jìn)一步利用，如取無(wú)菌試管苗的葉片、莖尖或根尖進(jìn)行培養(yǎng)，建立無(wú)性繁殖體系。將誘導(dǎo)產(chǎn)生的芽或芽叢從花梗上切離，轉(zhuǎn)入繼代增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一般每瓶接種6~10株無(wú)根苗。培養(yǎng)條件與誘導(dǎo)相同，也可以將激素濃度和配比稍做調(diào)整，主要取決于不同品種而已。一般可以適當(dāng)調(diào)高細(xì)胞分裂素的濃度，降低或不用生長(zhǎng)素，如僅添加6~BA3~5毫克/升。影響蝴蝶蘭叢生芽繼代培養(yǎng)效果的條件和因素很多，主要是生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類和濃度、有機(jī)物添加種類等。細(xì)胞分裂素有利于芽的增殖，在BA濃度1~20毫克/升范圍內(nèi)增殖率隨BA濃度上升而增加，但是BA濃度過高會(huì)使芽的生長(zhǎng)減弱，如BA濃度為20毫克/升時(shí)雖然增殖率最高，但芽長(zhǎng)勢(shì)細(xì)弱
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