通過大孔樹脂柱層析和制備hplc分離和純化竹葉中具有抗氧化活性的4種c改稿畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2025-07-21 22:06 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 A（60min）。流速為25mL/min，而檢測波長為330nm。進樣量為10ml。 分析HPLC為了分析柱層析組分、制備HPLC組分和進一步純化的樣品中的C糖苷黃酮，分析HPLC條件如下：采用了Waters2695HPLC色譜儀和Luna C18 (250 mm mm，：5 um)，其中保護柱為：RP18 ( mm mm，：5 um)，這兩根柱都從Phenomener購買。采用梯度洗脫，流動相：溶劑A（乙腈）和溶劑B（1％(V/V）醋酸，)。梯度順序：15％A（15min），1540％A(10min)，40％A（9min），4015％A（6min）。柱溫40℃。在330nm用DAD進行信號檢測。 C糖苷黃酮的進一步純化從制備HPLC分離得到的4種C糖苷黃酮的組分分別用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進行濃縮蒸干。每一種殘渣用10ml甲醇再溶解，并轉(zhuǎn)移到離心管中。在離心管中加入等體積（10ml）的純凈水，然后在4℃下放置過夜。所分析的物質(zhì)通過反溶劑結(jié)晶法大量沉淀下來，然后在4℃下離心（10000r/min,20min）。小心地去除上清，洗滌干燥后得到終產(chǎn)品。 C糖苷黃酮的鑒定 C糖苷黃酮的單體通過IR，UV，MS，1HNMR和13CNMR光譜來鑒定。 IR：Nexus 670 Flourier Transform Infrared Spectrometer (Thermo Nicolet, San Jose, CA, USA) UV：HPLCDAD analysis (Waters, Milford, MA, USA) MS：an APEX III Fouriertransform ion cyclotron resonance mass spectrometry (Bruker Daltonics Inc., Billerica, MA, USA) 1HNMR和13CNMR：DMX500 (500 MHz) NMR spectrometer (Bruker Biospin GmbH, Rheinstetten, Germany)3. 結(jié)果和討論 樹脂柱層析先前的研究討論了使用HSCCC或硅膠柱層析法從植物藥草中分離出C糖苷黃酮。Zhou, Peng, Fan, amp。 Wu (2005)使用HSCCC技術(shù)同時分離純化葒草苷和牡荊苷。Afifi, Khalil, amp。 Abdalla (1999)使用硅膠柱層析從海芋屬植物palaestinum中分離出異葒草苷，且進一步使用重結(jié)晶純化它。目前，AB8樹脂柱層析主要被用于從AOB中分離出總C糖苷黃酮，而不是分離某個C糖苷黃酮單體。聚苯乙烯（AB8）樹脂，是一種交聯(lián)聚合物，在它的骨架結(jié)構(gòu)中有著大量的親水基團，對于分離許多生物學(xué)物質(zhì)，例如苯酚和糖類，具有強大的能力，且回收率較高。這歸功于它的巨大特效表面區(qū)域和
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