葡萄酒中蘋果酸的測定(編輯修改稿)
2025-07-21 22:02 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 下開關(guān)直到屏幕上顯示‘’（大約2秒鐘）。5. 當屏幕上出現(xiàn)“”松開開關(guān)（表示A1）6. 取下試管，加入20uL瓶3溶液（L蘋果酸脫氫酶），充分混勻確保全部全部溶解，同時記錄時間。7. 再次將試管插入MegaQuantTM測定儀，5分鐘后按下開關(guān)直到屏幕上顯示‘1 second’,記錄下數(shù)值A2。8. 為了確保試劑完全反應完全，在5分鐘內(nèi)每間隔1分鐘讀取一下數(shù)值，直到每間隔1分鐘數(shù)值不再變化。（參考圖1和圖2）注意:1. 如果數(shù)值A2 ，10倍以上稀釋樣品，并再次測定，如果數(shù)值A2 ，樣品不要進行過分稀釋（將100倍稀釋改為10倍稀釋）。2. 由于INT對光有敏感性（顯色劑在藥片中），長時間的反應將導致溶液顏色加深，因此必須按照推薦的操作方法進行測定。3. 在進行試驗前，瓶1提前從冰箱中取出，并恢復到室溫，如果溫度 23176。C，反應過程將很快結(jié)束。4. mL蒸餾水中，確保藥片全部溶解后測定的 0 吸光度值作為空白對照，然后加入20uL 的L蘋果酸脫氫酶（瓶3），5分鐘后測定增加的吸光度值(A2)，微小的吸光度變化(A2)是沒有意義的（）。計算:ΔAL蘋果酸 = 增加的吸光度值 (A2)按照常規(guī)ΔAL蘋果酸 ，才能獲得滿意的試驗結(jié)果。L蘋果酸的含量可以依照下列公式計算（參照圖3中的標準曲線）:未經(jīng)PVPP處理過的樣品中的L蘋果酸濃度20uL未經(jīng)稀釋的樣品c = x DΔAL蘋果酸 [g/L]20uL經(jīng)稀釋的樣品c = x 稀釋系數(shù) x ΔAL蘋果酸 [g/L]經(jīng)PVPP處理過的樣品中的L蘋果酸濃度20uL未經(jīng)稀釋的樣品c = x ΔAL蘋果酸 x 102/100 [g/L]= x DΔAL蘋果酸 [g/L]20uL經(jīng)稀釋的樣品c = x 稀釋系數(shù) x DΔAL蘋果酸 [g/L]注釋:102/100 = 經(jīng)PVPP處理的葡萄酒的容差圖 1. 用分光光度儀測定(25176。C, 1 cm管徑)的MegaQuantTM L蘋果酸隨時間的變化。注意: 用此方法測定的L蘋果酸濃度比圖3中測定的濃度要低，是由于此方法中使用的測試管管徑為1 cm， cm.測試方法 B (對 “緩慢反應”的處理)1. mL 溶液1( ~ 23176。C或更高) mL蒸餾水加入到測試管中， mL用等體積蒸餾水稀釋的溶液1（參照試劑配置方法第1點）。2. 用提供的鑷子夾取1片藥片（瓶2），充分混合12分鐘至完全溶解。3. 加入20uL葡萄酒樣品經(jīng)PVPP處理的紅葡萄酒，充分振蕩混合。4. 大約1分鐘后，將試管插入到MegaQuantTM測定儀，按下開關(guān)直到屏幕上顯示‘’（大約2秒鐘）。5. 當屏幕上出現(xiàn)“”松開開關(guān)（表示A0），同時記錄時間。6. 取下試管5分鐘，再次插入試管按下開關(guān)直到屏幕上顯示‘1 second’，插入試管前不要按壓按鈕，否則將導致測定儀讀取錯誤 ,記錄下數(shù)值A1（經(jīng)過5分鐘由于存在緩慢反應將導致顏色增深）。7. 取下試管，立即加入20
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