銅脅迫下麻瘋樹的生理響應(yīng)研究畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2025-07-21 04:19 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 （C14H10O）；無(wú)水乙醇（C2H6O）；丙酮（C3H6O）。 培養(yǎng)液及培養(yǎng)基質(zhì)完全培養(yǎng)液采用霍格蘭培養(yǎng)液。配制方法如下：硝酸鉀（KNO3）506mg/L，四水硝酸鈣（Ca(NO3)24H2O）945mg/L，硝酸銨(NH4NO3)80mg/L，磷酸二氫鉀（KH2PO4）136mg/L ，硫酸鎂（MgSO47H2O），493mg/L，微量元素液5ml，pH=。鐵鹽溶液：七水硫酸亞鐵（FeSO47H2O），乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2Na2O82H2O） ，蒸餾水500ml，pH=。微量元素液：碘化鉀（KI） ，硼酸（H3BO3），硫酸錳（MnSO4），硫酸鋅（ZnSO47H2O），鉬酸鈉（Na2MoO4），硫酸銅（CuSO4），氯化鈷（CoCl26H2O）。銅離子溶液用硫酸銅來(lái)配置。種子培養(yǎng)基質(zhì)為（草炭：珍珠巖=3:2），種子萌發(fā)后移植到培養(yǎng)袋，基質(zhì)為經(jīng)過(guò)粗篩的黃土。 方法 種子的萌發(fā)實(shí)驗(yàn)挑選外觀飽滿、沒有發(fā)霉的種子，種植到基質(zhì)為（草炭：珍珠巖=3:2）的育苗盤中待萌發(fā)，澆足水。一星期之后每天澆水，四天后第一株種子萌芽，兩周后左右全部萌芽[8]。 幼苗的前期培養(yǎng)挑選生長(zhǎng)良好的麻瘋樹幼苗，移植到培養(yǎng)袋中。培養(yǎng)基質(zhì)為黃土。對(duì)所有幼苗進(jìn)行完全培養(yǎng)液澆灌，四天后再次進(jìn)行澆灌培養(yǎng)。對(duì)幼苗進(jìn)行潑澆多菌靈，滅除菌害，液體為1:1000。 銅離子脅迫培養(yǎng)待麻瘋樹幼苗生長(zhǎng)穩(wěn)定后，挑選長(zhǎng)勢(shì)相似的幼苗分組進(jìn)行重金屬銅脅迫培養(yǎng)。將挑選出來(lái)的麻瘋樹幼苗分為六組，每組十株，以后進(jìn)行銅離子的脅迫培養(yǎng)，重復(fù)3次試驗(yàn)。銅脅迫梯度設(shè)置：0、50、100、150（mg/L）。 指標(biāo)測(cè)定 外部形態(tài)指標(biāo)的測(cè)定各外部形態(tài)指標(biāo)（莖圍，株高，葉片長(zhǎng)寬）在進(jìn)行銅脅迫培養(yǎng)的60天內(nèi)，每隔20天對(duì)麻瘋樹幼苗進(jìn)行外部形態(tài)指標(biāo)（莖圍、株高、葉片長(zhǎng)寬）的測(cè)量。莖圍的測(cè)量部位為土壤以上2厘米處，株高的測(cè)量部位為土壤以上部分到頂芽的高度，葉片則測(cè)量各植株的同側(cè)上部葉。 生理生化指標(biāo)的測(cè)定各生理生化指標(biāo)測(cè)定分為春、秋兩季兩次采樣，秋季采樣：分組脅迫的60天之后；春季采樣：停止脅迫120天再次脅迫30天后。丙二醛的測(cè)定分別稱取各個(gè)脅迫組的麻瘋樹葉片1g，加入少許石英砂和2mL10%TCA（10%三氯乙酸），研磨成勻漿再加3mL10%三氯乙酸進(jìn)一步研磨，勻漿在4000r離心10min，上清液為MDA提取液，采用硫代巴比妥酸法進(jìn)行顯色反應(yīng)，之后進(jìn)行分光光度測(cè)定在532nm和450nm下的OD值，重復(fù)三次測(cè)定。并根據(jù)公式計(jì)算幼苗植株中MDA含量[9]。葉綠素的測(cè)定采用浸提法，剪碎放到25ml的容量瓶中，加入丙酮乙醇混合液（體積比1:1）定容，之后放入恒溫箱中在40℃下浸提24小時(shí)，之后取出進(jìn)行分光光度測(cè)定在645nm和663nm下的OD值，重復(fù)三次測(cè)定。并根據(jù)公式計(jì)算出幼苗葉片中的葉綠素的含量[10]?？扇苄蕴呛繙y(cè)定 取各脅迫組的麻瘋樹葉片，洗凈晾干，之后在110℃烘箱烘15min，然后調(diào)至70℃過(guò)夜。干葉片磨碎后稱取50mg樣品倒入10ml刻度離心管內(nèi)，加入4ml80%酒精，置于80℃水浴中不斷攪拌40min，離心，收集上清液，其殘?jiān)?ml80%酒精重復(fù)提取2次，合并上清液。在上清液中加10mg活性炭，80℃脫色30min，定容至10ml，過(guò)濾后，取提取液1ml，加入5ml蒽酮試劑混合，沸水浴煮10min，取出冷卻。在625nm處測(cè)其OD，重復(fù)三次測(cè)定。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上得到提取液中糖的含量[9]。15紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文 (設(shè)計(jì)) 銅離子脅迫對(duì)麻瘋樹幼苗外部形態(tài)的影響 銅離子脅迫對(duì)麻瘋樹幼苗莖圍生長(zhǎng)的影響從表1中可看出，在銅脅迫麻瘋樹幼苗后的0天到20天、40天到60天，處理組的莖圍變化量均低于對(duì)照組。在20 天到40天左右處理組增長(zhǎng)又高于對(duì)照組。總體上是隨著銅離子含量的增加莖圍生長(zhǎng)變慢。而在同一脅迫濃度下，增長(zhǎng)逐漸緩慢，脅迫組較之對(duì)照組增長(zhǎng)趨勢(shì)變慢更明顯。說(shuō)明，經(jīng)銅離子脅迫培養(yǎng)后，對(duì)麻瘋樹幼苗的莖圍生長(zhǎng)有抑制，時(shí)間越長(zhǎng)，影響越明顯，隨著銅離子濃度的增加，麻瘋樹幼苗莖圍生長(zhǎng)趨勢(shì)相對(duì)變慢。表1 銅離子對(duì)麻瘋樹幼苗莖圍的影響Cu2+濃度（mg/L）每20天莖圍的生長(zhǎng)變化情況（cm）0—20天20—40天40—60天0102050100150 銅離子脅迫對(duì)麻瘋樹幼苗株高生長(zhǎng)的影響由表2可以看出，經(jīng)銅離子脅迫培養(yǎng)后的麻瘋樹幼苗，在5 種不同銅濃度處理下，處理組與對(duì)照相比都受到了明顯的抑制，株高都有不同程度的下降，且隨著脅迫時(shí)間的增加，麻瘋樹幼苗的株高處理組較之對(duì)照組增長(zhǎng)逐漸變慢。而隨著銅離子濃度的增加，株高的生長(zhǎng)變化沒有明顯變化規(guī)律。表2 Cu2+脅迫對(duì)麻瘋樹幼苗株高的影響
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