蘆丁與牛血清白蛋白的相互作用研究畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2025-07-21 01:33 本頁面
【文章內容簡介】 1920]已成為研究生物大分子與小分子、離子相互作用的重要手段， 熒光測試中的發(fā)射峰特征、熒光偏振、能量轉移及熒光壽命等指標可以對蛋白質分子中熒光生色集團的結構及其所處的微環(huán)境提供有用信息。其中中藥有效成分與蛋白質相互作用的研究陸續(xù)有報道，大多是從電化學、熒光、紫外方面進行的研究。本文用熒光光譜法研究在模擬機體生理pH值條件下蘆丁與牛血清白蛋白(BSA)之間的相互作用；討論蘆丁與BSA之間發(fā)生的有效的猝滅過程，討論其在不同溫度下的結合常數、熱力學因素等重要信息，確定其分子間的結合力，試圖從分子水平了解蛋白質分子與小分子間相互作用機制，了解其在體內的運輸和分布情況，為生命科學研究提供有用的信息和數據。2 實驗部分 儀器RF4500PC熒光光譜儀（Hitachi，Japan）儀器需注明型號及廠家微量可調移液器（Gilson，F(xiàn)rench）PHS2C型數字式pH計（Ridao instruments）SYC15超級恒溫水?。暇┥Ａ㈦娮釉O備廠）SWQIc數字控溫儀AUW220D十萬分之一天平(SHIMADZU，Japan） cm比色皿25 mL比色管50 mL容量瓶 試劑牛血清白蛋白（BSA，上海伯奧生物科技有限公司），貯備液于277 K冰箱中保存蘆?。╯igma公司）104 molL1Tris試劑（三羥甲基氨基甲烷，成都科龍化工試劑廠）鹽酸（.，成都科龍化工試劑廠）試劑需注明純度及廠家，或者經銷商乙醇（.，成都科龍化工試劑廠）NaCl（.，成都科龍化工試劑廠）所用試劑均為分析純實驗用水為蒸餾水 標準溶液配制 1 molL1NaCl水溶液 g NaCl固體，用蒸餾水稀釋至50 m L，搖勻；作用：以維持生理條件下的離子強度。 104 molL1的牛血清白蛋白溶液 g牛血清白蛋白固體，用蒸餾水溶解稀釋至50 m L； 運行的TrisHCl緩沖溶液配制移取Tris溶液（ molL1） mL和鹽酸溶液（ molL1） mL， mL，混合均勻，調節(jié)pH=。 牛血清白蛋白溶液體系的配制在10 104 molL1 mL；1 molL1NaCl水溶液1 mL，使緩沖溶液的離子強度保持一致；pH= mL。 熒光測量 室溫（290 K）下的測量RF4500PC熒光光譜儀操作如下：(1) 開機準備打開樣品室蓋，檢查樣品室內沒有樣品后關上樣品室蓋。(2) 開機打開電源開關（POWERON）待風扇正常運轉后按（）鈕，黃色指示燈亮。在氙燈點亮后，等待510 min，打開（MAINON）。打開計算機及外設，點擊桌面上的Flsoluflonc軟件，等待光譜儀的自檢。(3) 編輯分析方法。點擊右邊菜單的Methed按鈕等到出現(xiàn)一個Analysmethed對話框再點擊Genera按鈕。在Measurement中選擇波長掃描Wavelength scan。 nm，選擇熒光發(fā)射光為熒光， nm，掃描速度為1200 nmmin1，掃描電壓為700 V， nm。一切準備就緒后點擊OK，方法生成。(4) 測試樣品(a)用移液管移取3 mL牛血清白蛋白溶液，放入比色皿中，再將比色皿放入樣品室，關上樣品室蓋，點擊Measure按鈕，開始測量。檢測完成后點擊Report按鈕，保存文件，設置文件名0，保存。(b)打開樣品室蓋，用微量可調移液器移取20 μL蘆丁溶液于比色皿中，關上樣品室蓋，打開攪拌器攪拌3分鐘后關掉攪拌器，點擊Measure按鈕，開始測量。檢測完成后點擊Report按鈕，保存文件，設置文件名1，保存。(c)重復(2)的操作，分別設置文件名為9，保存。(d)測試完后，將數據導出，保存在盤中。(5) 關機(a)將樣品拿出樣品池。(b)退出所有窗口，關掉電腦。(c)關閉（MAIN→OFF）。(d)關閉電源。(e)在記錄本上記錄使用情況。 298 K下的測量操作步驟和290 K基本一致，只是在樣品測試過程中，需要連接恒溫槽，攪拌時間延長到5分鐘。3 數據處理與結果討論 猝滅機理及猝滅常數的確定 基礎理論動態(tài)猝滅是猝滅劑和熒光物質的激發(fā)態(tài)分子之間的相互作用過程，其作用過程遵循斯特恩沃爾默(SternVolmer)方程：F0/F=1+Kaτ0[Q]=1+KSV[Q] (31)公式標號一章內保持連貫，31，32，…等等式中F0和F分別是不存在和存在猝滅體時熒光體的熒光強度；Ka是生物大分子的猝滅常數；τ0是不
外語相關推薦
鄂ICP備17016276號-1