fda藥物相互作用研究指南(編輯修改稿)
2025-01-19 07:36 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 抑制劑濃度。當(dāng)使用基于作用機制的抑制劑時 ,最好將抑制劑與酶預(yù)先孵育15 ～ 30 min。 ? (2)應(yīng)用不同的人重組 CYP酶 ,這種技術(shù)對研究單個 CYP酶在整個藥物代謝中的相對貢獻的大小具有很高的價值 ,但不能代表人肝微粒體酶中的絕對的代謝比率。 ? (3)根據(jù)不同供體來源的 CYP酶不同活性建立人肝微粒體庫。 ? 指南建議至少采用上述兩種方法來確認(rèn)藥物代謝酶 5. CYP酶抑制作用的體外評價 Review: ?Ki：抑制率常數(shù)，抑制作用越強，此值越小 ?IC50 ：反應(yīng)被抑制一半時抑制劑的濃度，越低表明抑制劑的抑制能力越強。 5. CYP酶抑制作用的體外評價 ? CYP酶抑制劑體外實驗設(shè)計 注意事項 : ? (1) IC50測定時 ,在底物代謝率允許的情況下 ,盡量使底物的濃度低于其 Km 值 ,使 IC50與其 Ki 值更具相關(guān)性 。 ? (2)肝微粒體蛋白濃度通常 1 gL 1 。 ? (3)緩沖液的性質(zhì)、 pH對 Vmax和 Km 的影響顯著 ,盡可能采用標(biāo)準(zhǔn)化的分析條件 。 ? (4)反應(yīng)系統(tǒng)中最好控制底物或抑制劑的消耗不超過 10%～30%,但是對于 Km 值很低的藥物來說 ,控制反應(yīng)體系底物消耗 10%很困難 。 ? (5)建議建立時間 產(chǎn)物形成量的線性關(guān)系 。 ? (6)建議建立酶量 產(chǎn)物形成量的線性關(guān)系 。 ? (7)因為某些有機溶劑具有酶誘導(dǎo)或抑制作用 ,溶劑的濃度都要 1% ( v/v) ,最好 0. 1%,實驗應(yīng)包括無溶劑對照和溶劑對照 。 ? (8)實驗應(yīng)該有一個已知抑制劑的陽性對照。 ? 相互作用程度的模擬： ? R = 1 + [ I] /Ki （ [ I]代表作用部位抑制劑的濃度 , Ki 是抑制常數(shù)） ? 指南推薦體內(nèi)相互作用的可能性通過 [ I] /Ki 來推斷 , [ I]代表服用臨床最大用藥量后平均穩(wěn)態(tài)的藥物濃度 (游離或結(jié)合的全部藥物 ) ,比值升高 ,產(chǎn)生相互作用的可能性增大。 ? 盡管通過體外數(shù)據(jù)定量預(yù)測體內(nèi)相互作用發(fā)生的可能性存在困難 ,但可以通過 同一個藥物 對不同 CYP 酶 ( CYP1A2, CYP2C8, CYP2C9,CYP2C1 CYP2D6和 CYP3A)的 Ki 值進行篩選排序 ,體內(nèi)實驗從 [ I] /Ki 最大者 (或者 Ki 最小者 )的 CYP酶開始 ,如果實驗顯示體內(nèi) 不存在 藥物相互作用 ,其他的 [ I] /Ki 相對較小的 CYP酶的體內(nèi)實驗就可以 不做 。 6. CYP酶誘導(dǎo)作用的體外評價 ? 實驗設(shè)計中應(yīng)包括一個公認(rèn)的酶誘導(dǎo)劑作為陽性對照 ,來減小不同供體酶催化活性差異引起的誤差。 ? 表 7:誘導(dǎo)劑選擇列表 實驗中應(yīng)注意： ? (1)受試藥物的濃度應(yīng)該參考臨床治療劑量的血藥濃度 ,至少包括 3個涵蓋治療窗的篩選濃度 ,其中至少 1個濃度要超過平均預(yù)期治療濃度 1個數(shù)量級 。 ? ( 2)與肝細(xì)胞共孵育 2～ 3 d后 ,通過 CYP特異的探針?biāo)幬?(參考指南推薦 )測定酶活性 。
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