牛乳中抗生素殘留的檢測本科生畢業(yè)論文設計(編輯修改稿)
2025-07-19 18:30 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 stSP，Delvotest Cow Test，DelvotestMCS檢測系列[14]。DelvotestP成型于20世紀70年代，主要用于檢測內(nèi)酰胺類抗生素，裝在小型安碚瓶或者微孔板微孔中的瓊脂里，含有用微膠囊包裹的標志微生物嗜熱硬脂酸芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)的芽孢和pH指示劑(溴甲酚紫)，同時包裝內(nèi)附有一瓶營養(yǎng)藥片，檢驗時將營養(yǎng)藥片與乳樣同時放在培養(yǎng)基上，在64e溫度下培養(yǎng)3h，培養(yǎng)基顏色由紫變黃表明抗生素殘留陰性，顏色不變表示陽性。瓊脂裝在小型安碚瓶里的格式適用于小規(guī)模和單個試驗，微孔板格式一次可以同時檢測96個乳樣，適用于大批量乳樣檢驗。DelvotestP已經(jīng)在全世界通用。DelvotestSP則可以檢測包含B內(nèi)酰胺類抗生素在內(nèi)的更多抗生素(如磺胺類、泰樂霉素、紅霉素、鏈霉素、慶大霉素、三甲氧卞二氨嘧啶等)。DelvotestSP的用法基本與DelvotestP相同，只是培養(yǎng)時間縮短為2h，~。Delvotest Cow Test與DelvotestP小型安碚瓶格式除外裝不同外，內(nèi)容物和用法基本相同，還配有加熱池，更適合牛奶場使用。Delvotest MCS是DelvotestSP的微孔板格式，但營養(yǎng)試劑已直接加入瓊脂內(nèi)，使用時無需再添加營養(yǎng)藥片，操作更方便，但保質(zhì)期短，適合于大型檢測中心使用。Snap法是美國IDEXX Laboratories Inc公司采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)原理，將酶化學反應的敏感性和抗原抗體免疫反應的特異性相結合的方法，其敏感性和特異性較好。在需要檢測其他種類的抗生素時，可以選用對應的試劑盒進行檢測。在檢測結果方面，不僅可以知道結果的陰性陽性，而且也可了解所檢測的結果是哪一類抗生素。Snap快速檢測法耗時9min，結果重現(xiàn)性好，操作簡便，但實驗成本較高。 基于受體分析法比利時UCB Byproducts公司開發(fā)的BetaSTAR檢測法是將特定的B內(nèi)酰胺受體蛋白固定在試紙上，用膠體金有色微粒作為標記物，5min內(nèi)可以檢測到青霉素和頭孢菌素殘留。美國Charm Science公司Charm MRL檢測法與BetaSTAR檢測法形式十分相似，在8min內(nèi)可以檢測到青霉素和頭孢菌素殘留。比利時UCB Byproducts公司開發(fā)的Penzym檢測法有兩種形式:Penzy和PenzymS，它們的區(qū)別是培養(yǎng)時間和靈敏度不同，此方法適用于檢測B內(nèi)酰胺類和頭孢菌素類抗生素。 本實驗研究的目的與意義牛奶是營養(yǎng)最全面的營養(yǎng)品 。但飲用含有抗生素殘留的牛奶可引起細菌耐藥性， 導致人體過敏反應等癥狀。 經(jīng)常飲用抗生素超標的牛奶還會破壞人體道菌群平衡?？股氐挠绊懯顾崮?、奶酪等一些高質(zhì)量的牛乳產(chǎn)品無法加工生產(chǎn)，造成大量的原料奶浪費，致使企業(yè)遭受很大的經(jīng)濟損失。牛奶中抗生素殘留問題日益受到社會各界的重視?？股貦z測的方法、 檢測技術也隨之迅速發(fā)展，只有簡便 、快速 、準確 、靈敏性高的檢測方法才能滿足日趨嚴格的檢測要求。 保障人們飲用牛奶的衛(wèi)生和安全。 抗生素的檢測方法很多， 主要可以分為微生物測定法、理化測定法和免疫學測定法[15] 等。本實驗通過國標TTC法和試劑盒法、紙片法檢測結果的比較為抗生素殘留快速檢測方法的補充提供理論依據(jù)。第二章 實驗材料和方法 實驗材料 從哈市食品商場隨即采取六個主要品牌不同品種的袋裝消毒純牛奶及其相關品牌的花色奶作為檢樣，將采集的樣品編號，送實驗室檢測，乳樣共計13份，見表21。表21 原材料表品種編號規(guī)格（ml）來源純牛奶1220市售2220市售3220市售4220市售5220市售6220市售花色奶7280市售8250市售9220市售10280市售11240市售12250市售13220市售 對照試驗樣品的采樣，見表22。表22 對照樣品表對照樣品編號來源脫脂乳+青霉素14脫脂乳: 東北農(nóng)大食品實驗室提供青霉素: 天林藥業(yè)有限公司提供滅菌生理鹽水+青霉素15NaCL: 天林藥業(yè)有限公司提供青霉素: 天林藥業(yè)有限公司提供無抗脫脂乳16市售滅菌生理鹽水17市售嗜熱乳酸鏈球菌，由東北農(nóng)業(yè)大學乳品研究中心提供；枯草芽孢桿菌，由黑龍江東方學院微生物實驗室提供。（1）脫脂乳：經(jīng)113℃、20min滅菌（2）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：a 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方：牛肉膏 蛋白胨 NaCL 水 1000mlpH ～ b 溶液或試劑：牛肉膏，蛋白胨，Nacl，瓊脂，1mol／L NaOH，1mol／LHCL。c 儀器或其他用具：試管，三角瓶，燒杯，量筒，培養(yǎng)基分裝器，天平，牛角匙，高壓滅菌鍋，PH試紙（～），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。（3）試劑TTC指試劑：4% 2,3,5氯化三苯基四氮唑（TTC）批號830222。TTC水溶液：稱取1gTTC，溶于5ml滅菌蒸餾水中，裝入褐色瓶內(nèi)與7℃冰箱保存，臨用時用滅菌蒸餾水以1:5稀釋。如遇溶液變?yōu)榫G色或淡褐色，則不能再用。 主要儀器和設備表23 主要實驗儀器與設備儀器與設備生產(chǎn)廠家Hws24型電熱恒溫水浴鍋 上海一恒科技有限公司DHG9140A型電熱恒溫鼓風干燥箱上海一恒科技有限公司LRH50生化培養(yǎng)箱上海一恒科技有限公司京制00000249號電子天平北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司科拓抗生素檢測試劑盒北京科拓恒通生物技術開發(fā)郵箱公司容聲冰箱廣東科龍電器股份有限公司JJ200型精密電子天平美國雙杰兄弟有限公司常熟雙杰測試儀器廠高壓滅菌鍋上海一恒科技有限公司檢測試劑盒由反應管、營養(yǎng)藥片、取樣注射器、取樣吸頭、鑷子和使用說明書等組成。其中：檢測反應管 502營養(yǎng)藥片 100 片取樣注射器 1支取樣吸頭 100支鑷子 1支使用說明書 1份 試驗方法 原料預處理 TTC法: 依據(jù)GB4789 2794方法檢測抗生素殘留。陰性對照管為無抗生素10%還原脫脂乳粉溶液，陽性對照管為10%還原脫脂乳粉加青霉素鉀鹽[16]。紙片法: 青霉素標準液，準確稱取青霉素G鉀標準品20mg，用磷酸鹽緩沖液溶解，制備為1 000g/mL的標準儲備液，置4℃冰箱中保存。試劑盒法：試劑盒中的反應管和營養(yǎng)藥片，保存于0~15℃，避光、干燥陰涼處，防止凝結成塊或凍結。 TTC法 按照國家標準中規(guī)定的TTC實驗法并參考有關文獻進行。 滅菌脫脂乳培養(yǎng)基制備，置4℃冰箱過夜，然后棄去上層乳脂，將脫脂乳分裝大試管，10磅20min滅菌備用。 菌
公司管理相關推薦
鄂ICP備17016276號-1