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正文內(nèi)容

氨基酸的分離鑒定—紙層析法(編輯修改稿)

2025-07-16 18:44 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 亮氨酸溶液及它們的混合液(各組份濃度均為0.5%)各配置5mL 。 3)、顯色劑 50~100mL 0.1%水合茚三酮正丁醇溶液?!緦?shí)驗(yàn)步驟】(1)檢查培養(yǎng)皿是否干燥、潔凈;若否,將其洗凈并置于干燥箱內(nèi)120℃烘干。(2)平衡:剪一大塊塑料薄膜鋪在桌面上,將層析缸或大燒杯到置于塑料薄膜上,再把盛有約5mL展層溶液的小燒杯置于倒置的層析缸或大燒杯中,用塑料薄膜密封起來(lái),平衡20min。(3)規(guī)劃:帶上手套,取寬約10cm、高約15cm的層析濾紙一張。在紙的下端距邊緣2~3 cm 處輕輕用鉛筆劃一條平行于底邊的直線A,在直線上做4個(gè)記號(hào),記號(hào)之間間隔2cm,這就是原點(diǎn)的位置。另在距左邊緣1cm處畫(huà)一條平行于左邊緣的直線B,在B線上以A、B兩線的交點(diǎn)為原點(diǎn)標(biāo)明刻度(以厘米為單位),參見(jiàn)下圖。 圖2 實(shí)驗(yàn)裝置示意圖 (4) 點(diǎn)樣:用毛細(xì)管分別取10mL左右的氨基酸樣品點(diǎn)在四個(gè)位置上。干后重復(fù)點(diǎn)樣,同一位置上需點(diǎn)2~3次,2~3mL/次,保證每點(diǎn)在紙上擴(kuò)散的直徑最大不超過(guò)3mm。其中3個(gè)是已知樣,1個(gè)是待測(cè)樣品。(5) 層析:用針、線將濾紙縫成筒狀,紙的兩側(cè)邊緣不能接觸且要保持平行,參見(jiàn)圖11。向培養(yǎng)皿中加入擴(kuò)展劑,使其液面高度達(dá)到1cm左右,將點(diǎn)好樣的濾紙筒直立于培養(yǎng)皿中(點(diǎn)樣的一端在下,擴(kuò)展劑的液
點(diǎn)擊復(fù)制文檔內(nèi)容
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