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正文內(nèi)容

限制性酶切方式及連接(編輯修改稿)

2025-06-22 22:03 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 能催化 dsDNA片段緊靠在一起的 3‘羥基末端與 5’磷酸基團末端之間形成磷酸二酯鍵,使兩末端連接的一種核酸酶。 目的基因 載體 限制性內(nèi)切酶 限制性內(nèi)切酶 T4 DNA ligase 重組體 載體自連 目的基因 自連 DNA片段之間的連接 具互補黏性末端之間的連接 具平末端之間的連接 具互補黏性末端片段之間的連接 5‘GGACTG0H PAATTCTGCAA3’ 3’CCTGACTTAAP 0HGACGTT5’ I 切割 I切割 DNA ligase 5‘GGACTGAATTCTGCAA3’ 3’CCTGACTTAAGACGTT5’ I 識別序列 結(jié)論: 待連接的兩個 DNA片段的末端如果是用同一個酶切割的,連接后仍保留原限制酶的識別序列。 Bam HⅠ 切割反應(yīng) GGATCC CCTAGG T4 DNA ligase
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