微生物生長(zhǎng)繁殖五ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-08 08:26 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 微生物的營(yíng)養(yǎng)類型（ Ⅱ ） 營(yíng)養(yǎng)類型 光能無機(jī) 自養(yǎng)型 光能有機(jī) 異養(yǎng)型 化能無機(jī) 自養(yǎng)型 化能有機(jī) 異養(yǎng)型 能源 光能 光能 化學(xué)能 化學(xué)能 主要碳源 CO2 CO2 CO2 有機(jī)物 ? 大多數(shù)微生物屬于 化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型 ：絕大多數(shù)的細(xì)菌、全部真菌、原生動(dòng)物以及病毒。 ? 如果化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型微生物利用的有機(jī)物不具有生命活性，則 是 腐生型 ；若是生活在生活細(xì)胞內(nèi)從寄生體內(nèi)獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，則是 寄生型 。 第三節(jié) 培養(yǎng)基 一、什么是培養(yǎng)基 培養(yǎng)基 (culture medium)： 是人工配制的，適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。 ? 培養(yǎng)基中應(yīng)含滿足微生物生長(zhǎng)發(fā)育的： 水分、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子以及無機(jī)鹽。 配制培養(yǎng)基的原則 一、選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) ? 所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水及能源， ? 培養(yǎng)細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌所需的培養(yǎng)基各不相同。 ? ：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 (或簡(jiǎn)稱普通肉湯培養(yǎng)基 ) ， ? ：用高氏 I號(hào)合成培養(yǎng)基， ? ：一般用麥芽汁培養(yǎng)基， ? ：一般用查氏合成培養(yǎng)基。 二、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 濃度 過低 時(shí)不能滿足微生物正常生長(zhǎng)所需， 濃度過高 時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用， 例如 高濃度 糖類物質(zhì)、無機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)，反而起到抑菌或殺菌作用。 ?培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的 濃度配比 也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或 )代謝產(chǎn)物的形成和積累，其中碳氮比 (C/N)的影響較大。 三、控制 pH條件 ? 各類微生物 生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的最適pH條件各不相同 。 ? 細(xì)菌與放線菌適于在 pH7～ ，酵母菌和霉菌通常在 ～ 6范圍內(nèi)生長(zhǎng)。 ? （如何控制生長(zhǎng)過程中的 PH值？） pH緩沖劑 ? 維持培養(yǎng)基 pH的相對(duì)恒定，通常在培養(yǎng)基中加入 pH緩沖劑， ? 常用的緩沖劑 是 一氫和二氫磷酸鹽 (如KH2PO4和 K2HPO4)組成的混合物 。 ? K2HPO4溶液呈堿性， KH2PO4溶液呈酸性，兩種物質(zhì)的等量混合溶液的 pH為 。 KH2PO4和 K2HPO4緩沖劑的原理 ? 當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致 H+濃度增加時(shí)，H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物，培養(yǎng)基 pH不會(huì)過度降低；如果培養(yǎng)基中 OH濃度增加， OH則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物，培養(yǎng)基 pH也不會(huì)過度升高。 ? 但 KH2PO4和 K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍 (～ )內(nèi)起調(diào)節(jié)作用 。 ? 有些微生物，如乳酸菌能大量產(chǎn)酸，磷酸緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用，此時(shí)可在培養(yǎng)基中 添加難溶的碳酸鹽 (如 CaCO3)來進(jìn)行調(diào)節(jié) ， CaCO3難溶于水，不會(huì)使培養(yǎng)基 pH過度升高，但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸，同時(shí)釋放出 CO2， 將培養(yǎng)基 pH控制在一定范圍內(nèi)。 四、原料來源的選擇 盡量利用 廉價(jià)且易于獲得的原料 作為培養(yǎng)基成分，在發(fā)酵工業(yè)中，培養(yǎng)基用量很大，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 五、滅菌處理 要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，對(duì)培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用 ， ℃ 條件下維持 15～ 30min可達(dá)到滅菌目的。 滅菌 ：采用物理或化學(xué)的方法殺死一定環(huán)境中的全部微生物。 消毒 ：采用物理或化學(xué)的方法殺死一定環(huán)境中部份的部微生物。主要是病原微生物。 在高壓蒸汽滅菌過程中，長(zhǎng)時(shí)間高溫會(huì)使某些 不耐熱物質(zhì)遭到破壞 ，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖， 長(zhǎng)時(shí)間高溫還會(huì) 引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽(yáng)離子 (特別是鈣、鎂、鐵離子 )結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀， 高壓蒸汽滅菌后， 培養(yǎng)基 pH會(huì)發(fā)生改變(一般使 pH降低 )， 滅菌的方法 ? (1) 物理法 ? ① 加熱法 ： ? ⅰ . 干熱滅菌 ? 灼燒滅菌 ：利用火焰直接把微生物燒滅。如：接種工具，玻璃瓶口等。 ? 干燥熱空氣滅菌 (常稱 干熱滅菌 )：把待滅菌的物品均勻地放在電熱恒溫干燥箱內(nèi)，加熱至 160170℃ ，持續(xù) 2hr。 如：玻璃器皿 (吸管、平板等 )、金屬用具等；但培養(yǎng)基、塑料制品、橡膠制品等不能用此法。 ⅱ 濕熱滅菌 ： ★ 高壓蒸汽滅菌 ： 121℃ ， 30min。 滅菌器主要有臥式、立式、手提式 (實(shí)驗(yàn)室最為常用 )。是一種最有效、使用最廣泛的滅菌方法。 ★ 常壓蒸汽滅菌：間歇 (分段 )滅菌 ： 100℃ ，30min， 殺死一切細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)體，但不能殺死芽孢， 每天進(jìn)行 1次，連續(xù) 3天； 在兩次滅菌間隙，滅菌物應(yīng)放在室溫 (2030℃ )條件下恒溫培養(yǎng)，使芽孢萌發(fā)為營(yíng)養(yǎng)體，第二次滅菌即可殺死；經(jīng)過兩次培養(yǎng) 3次反復(fù)滅菌，即可達(dá)完全滅菌。 ? 持續(xù)滅菌 ：常壓蒸汽持續(xù)滅菌中，從蒸汽大量產(chǎn)生開始，繼續(xù)加大火力保持充足蒸汽，持續(xù)加熱 36hr， 殺死絕大部分芽孢和全部營(yíng)養(yǎng)體，達(dá)到滅菌目的。 ? 比較： 在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大。 因?yàn)?： ? ①濕熱 情況下，菌體吸水，使蛋白質(zhì)易于凝固； ? ②濕熱的穿透力更強(qiáng)； ? ③蒸汽與被滅菌物接觸冷凝成水時(shí)，放出熱量，使其溫度迅速升高，從而增強(qiáng)了殺菌能力。 ⅲ 煮沸消毒法 ? 物品在清水中煮沸 5min以上，可殺死附在物品上的微生物細(xì)胞及部份芽孢。如果延長(zhǎng)煮沸時(shí)間，或在水中加入 1%碳酸鈉或 25%石碳酸，則效果會(huì)更好。本法適于毛巾衣物、注射器、解剖用具等的消毒。 ?ⅳ 巴斯德消毒法 ： 63℃ ， 30min； 或70℃ ， 15min。 一般用于牛奶、啤酒等的消毒，可保持物品原有的營(yíng)養(yǎng)風(fēng)味。 ? ② 過濾除菌： 含菌液體或氣體通過細(xì)菌過濾器，使雜菌留在濾器或?yàn)V板上，而支除雜菌。 ? ③ 射線除菌 ： 紫外線穿透力弱，一薄層普通玻璃或水，均能濾除大量紫外線。一般適用于表面滅菌或空氣滅菌，如：實(shí)驗(yàn)室、接種室、接種箱等。 ? (2) 化學(xué)法： 主要是利用有機(jī)或無機(jī)的化學(xué)藥品以實(shí)驗(yàn)室用具和其它物體表面進(jìn)行滅菌與消毒 (不能殺死芽孢，起消毒作用 )。 ? 機(jī)理：能破壞細(xì)菌代謝機(jī)能并有致死作用的化學(xué)藥劑。實(shí)驗(yàn)室常用有： 升汞、甲醛、高錳酸鉀、乙醇、碘酒、石碳酸、漂白粉 等。 ? 在配制培養(yǎng)基過程中， 泡沫 的存在對(duì)滅菌處理有何影響？ 三、培養(yǎng)基的類型以及應(yīng)用 (一 ) 按成分不同劃分 ? 天然培養(yǎng)基 (plex medium)： 。 ? 合成培養(yǎng)基 (synthet
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