【文章內(nèi)容簡介】 DNA C. 雙鏈RNA D. 正鏈RNA E. 負鏈RNA 1. HBV基因組是（ ）2. 流感病毒基因組是（ ）3. 人類免疫缺陷病毒的基因組（ ）十二、 X型題：1. 述一個病毒基因組，應(yīng)涉及到（ ）（DNA或RNA）的性質(zhì)2. 病毒基因組末端重復序列結(jié)構(gòu)有（ ）A. 粘性末端B. 末端插入序列C. 末端反向重復序列D. 末端正向重復序列E. 長末端重復序列3. 甲型流感病毒亞型的分型依據(jù)（ ） A. 核衣殼蛋白（nucleocapsid protein，NP）B. 基質(zhì)蛋白（matrix protein，M）C. 血凝素（hemagglutinin，HA）的抗原性D. 神經(jīng)酰胺酶（neuraminidase，NA）的抗原性E. 宿主種屬4. 逆轉(zhuǎn)錄病毒編碼的基本結(jié)構(gòu)基因（ ） A. gag（編碼核心蛋白）。 B. pol（編碼逆轉(zhuǎn)錄酶等）C. rex（編碼rex調(diào)節(jié)蛋白）D. tax（編碼tax調(diào)節(jié)蛋白）E. env基因（編碼包膜蛋白）5. HIV基因組編碼的附加基因和調(diào)節(jié)基因（ ） A. vif B. vpr C. nef D. tat E. rev6. HIV1（ ）A. 引起AIDSB. 主要攻擊輔助性T淋巴細胞 C. 導致免疫系統(tǒng)紊亂和免疫缺陷 D. 屬逆轉(zhuǎn)錄病毒 E. 使被感染的細胞喪失功能但不會死亡十三、 名詞解釋：1. 重疊基因2. 分段基因組3. 抗原漂移4. 前病毒DNA十四、 問答題：1. 病毒的基本結(jié)構(gòu)成份主要有哪些？2. 國際病毒分類委員會（ICTV）將病毒分成哪幾類？3. 簡述長病毒末端重復序列的特點和作用。參考答案一、A型題： 二、B型題： 三、X型題： 四、名詞解釋：5. 許多病毒基因組的一段DNA序列有兩個或兩個以上的開放讀碼框架，可以編碼兩種或兩種以上的多肽鏈，稱為重疊基因（overlapping gene）6. 分段基因組（segmented genome）是指病毒基因組由數(shù)條不同的核酸分子組成。分段基因組多見于正鏈RNA病毒、負鏈RNA病毒及雙鏈RNA病毒。7. 當宿主細胞同時感染兩種不同亞型的病毒時，毒株之間會發(fā)生基因重配現(xiàn)象，子代病毒可獲得兩個親代病毒的基因片段，導致子代病毒表面抗原發(fā)生變化，從而逃避機體免疫系統(tǒng)的攻擊，這種現(xiàn)象又稱為抗原漂移（antigen shift）。8. 當逆轉(zhuǎn)錄病毒感染敏感細胞后，首先以其自身的RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成DNA中間體，這種DNA分子稱原病毒或前病毒DNA（provirus DNA）。五、問答題：2. 毒沒有完整的細胞結(jié)構(gòu)，由四種基本結(jié)構(gòu)成份組成：①由一種核酸(DNA或RNA)組成的病毒基因組。②由病毒基因組編碼的衣殼蛋白組成的衣殼。③來源于宿主細胞質(zhì)膜系統(tǒng)（細胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜或高爾基體膜）的包膜。④病毒顆粒中的其它內(nèi)容物，包括酶、核酸結(jié)合蛋白及金屬離子等。2. 國際病毒分類委員會（ICTV）制定了《國際病毒分類與命名原則》。根據(jù)病毒的基因組組成及復制方式，可將病毒分為如下幾類：DNA病毒（DNA Viruses） 第一組：雙鏈DNA病毒（Group I: dsDNA Viruses）第二組：單鏈DNA病毒（Group II: ssDNA Viruses）RNA病毒（RNA viruses）第三組：雙鏈RNA病毒（Group III: dsRNA Viruses）第四組：正鏈RNA病毒（Group IV: (+)ssRNA Viruses）第五組：負鏈RNA病毒（Group V: ()ssRNA Viruses）DNA與RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（DNA and RNA Reverse Transcribing Viruses） 第六組：RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group VI: RNA Reverse Transcribing Viruses）第七組：DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group VII: DNA Reverse Transcribing Viruses）亞病毒因子（Subviral Agents） 衛(wèi)星（Satellites）類病毒（Viroids）朊病毒（Prions）3. 逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組RNA在逆轉(zhuǎn)錄后生成的雙鏈DNA中，兩端有長末端重復序列（long terminal repeat，LTR）結(jié)構(gòu)。LTR在結(jié)構(gòu)與功能上與上述重復序列不同。LTR中的重復序列只占一部分，另外還包括單一序列。5＇端的LTR包含許多特定的基因表達調(diào)控區(qū)域，是一組真核生物增強子和啟動子單位，而3＇端的LTR具有轉(zhuǎn)錄終止的作用。另外，逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組利用LTR中的重復序列形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，在整合酶作用下整合入宿主細胞基因組內(nèi)。蛋白質(zhì)組學選擇題1． 目前研究蛋白質(zhì)間相互作用最常采用的方法是_______。A 質(zhì)譜分析 B 二維凝膠電泳 C 酵母雙雜交技術(shù) D DNase I 足紋分析2． 目前進行蛋白質(zhì)分離最有效的方法是_______。A 質(zhì)譜分析 B 二維凝膠電泳 C 酵母雙雜交技術(shù) D DNase I 足紋分析3．二維凝膠電泳是根據(jù)蛋白質(zhì)的_______來進行分離的。A 分子量和分子構(gòu)像 B 分子量和電荷 C 電荷和分子構(gòu)像 D 分子量4．質(zhì)譜分析技術(shù)主要是用來檢測蛋白質(zhì)的_______。A 分子量 B 分子組成 C 分子構(gòu)像 D 分子大小5．下列技術(shù)中，不能用來檢測溶液中蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)是_______。A 核磁共振 B 圓二色譜法 C 氫同位素交換法 D 小角中子衍射法6．DNase Ⅰ 足紋分析技術(shù)中，DNase Ⅰ 水解的是DNA分子中的_______。A 氫鍵 B 磷酸二酯鍵 C 疏水鍵 D 肽鍵7．蛋白質(zhì)之間相互作用的形式主要包括_______。A 分子和亞基的聚合 B 分子識別 C 分子自我裝配 D 多酶復合體 E 分子雜交名詞解釋1． 蛋白質(zhì)組2． 蛋白質(zhì)組學3． 二維凝膠電泳4． 質(zhì)譜技術(shù)5． 凝膠滯后實驗問答題1．蛋白質(zhì)組學的研究特點有哪些？2．蛋白質(zhì)組學的研究內(nèi)容有哪些？3．目前在蛋白質(zhì)組學的研究中主要采用了哪些技術(shù)？4．等電聚焦凝膠電泳的原理是什么？5．簡述酵母雙雜交系統(tǒng)的優(yōu)缺點。答案：選擇題：C、B、B、A、D、B、ABCDE名詞解釋：1. 蛋白質(zhì)組是指特定細胞、組織乃至機體作為一個生命單元中所擁有蛋白質(zhì)的集合，即生命體中攜帶的基因信息在某一時段所表達的全部蛋白質(zhì)。2. 蛋白質(zhì)組學是指對在特定的時間和環(huán)境下所表達的群體蛋白質(zhì)研究的一門學問。主要在蛋白質(zhì)水平上探索蛋白質(zhì)的表達模式、作用模式、功能機制、調(diào)節(jié)控制以及蛋白質(zhì)群體內(nèi)的相互作用。是在生物體或其細胞的整體蛋白質(zhì)水平上進行的，并從一個機體或一個細胞的蛋白質(zhì)整體活動來揭示生命的規(guī)律。 3. 二維凝膠電泳是目前蛋白質(zhì)組研究中最有效的分離技術(shù)。它由兩向電泳組成，第一向以蛋白質(zhì)電荷差異為基礎(chǔ)進行分離的等電聚焦凝膠電泳，第二向是以蛋白質(zhì)分子量差異為基礎(chǔ)的SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。4. 質(zhì)譜技術(shù)是樣品分子離子化后，根據(jù)不同離子間的質(zhì)量、電荷比值(質(zhì)荷比，m/z)差異來確定分子量的技術(shù)。 5. 凝膠滯后實驗是近年來發(fā)展起來的用聚丙烯酰胺凝膠電泳直接分析核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合的簡單、快速、敏感方法。通過蛋白質(zhì)與末端標記的核酸探針特異性結(jié)合，電泳時這種復合物較無蛋白結(jié)合的探針在凝膠中的泳動速度要慢，即表現(xiàn)為相對滯后。問答題：1．① 整體性 ② 揭示生命的動態(tài)性過程 ③ 體現(xiàn)生命現(xiàn)象的復雜性2．蛋白質(zhì)組學的研究包括兩個方面：一是針對蛋白質(zhì)表達模式的研究，一是在蛋白質(zhì)功能模式方面的深入分析。3．① 蛋白質(zhì)的分離技術(shù)：二維凝膠電泳② 蛋白質(zhì)的鑒定技術(shù)主要包括：質(zhì)譜技術(shù)、Edman降解分析技術(shù)、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分析技術(shù)③ 蛋白質(zhì)與核酸間相互作用的研究技術(shù)：凝膠滯后實驗、DNase Ⅰ 足紋分析、核酸一蛋白質(zhì)雜交實驗 ④蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間相互作用的研究技術(shù)：酵母雙雜交技術(shù)4．依據(jù)蛋白質(zhì)分子的凈電荷或等電點進行分離的技術(shù)。在等電聚焦過程中，電場所采用的載體兩性電解質(zhì)含有脂肪族多氨基多羧酸，可在電場中形成正極為酸性，負極為堿性的連續(xù)pH梯度，蛋白質(zhì)分子在一個載體兩性電解質(zhì)(ampholyte)形成的連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中電泳，當?shù)鞍踪|(zhì)遷移到其等電點位置時，凈電荷為零，在電場中不再移動，因此可將各種不同等電點性質(zhì)的蛋白質(zhì)分離開來5．酵母雙雜交系統(tǒng)所具有的優(yōu)點：①蛋白質(zhì)作為被研究的對象不用被純化；②檢測在活細胞內(nèi)進行，可以在一定程度上反映體內(nèi)（細胞內(nèi)）的真實情況；③由于這一系統(tǒng)可以反映基因表達產(chǎn)物的累積效應(yīng)，因而可檢測存在于蛋白質(zhì)之間微弱或短暫的相互作用；④采用不同組織、器官、細胞類型和分化時期材料構(gòu)建cDNA文庫，可用于分析多種不同功能的蛋白。局限性：①雙雜交系統(tǒng)分析蛋白間的相互作用定位于細胞核內(nèi)，而許多蛋白間的相互作用依賴于翻譯后加工如糖基化、二硫鍵形成等，這些反應(yīng)在核內(nèi)無法進行。②由于某些蛋白本身具有激活轉(zhuǎn)錄功能或在酵母中表達時發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活作用，從而引起報告基因的表達，產(chǎn)生“假陽性”結(jié)果。③雙雜交只是反映蛋白質(zhì)間能發(fā)生作用的可能性，這種可能還必須經(jīng)過其他實驗驗證，尤其要與生理功能研究相結(jié)合，否則可能會誤入歧途。核酸的分離與純化一、選擇題1. 真核生物染色體DNA主要以下列哪種形式存在 A 環(huán)狀單鏈分子B 線性單鏈分子C 環(huán)狀雙鏈分子D 線性雙鏈分子E 線性或環(huán)狀雙鏈分子[本題答案] C2. DNA在細胞核內(nèi)通常與下列哪種物質(zhì)結(jié)合A 蛋白質(zhì)B 糖類 C 脂類 D 無機鹽 E 水[本題答案] A3. RNA主要存在于A 細胞質(zhì)B 線粒體C 細胞核D 溶酶體E 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)[本題答案] A4. 人的二倍體細胞DNA大約由多少堿基對（bp）組成109bp109bp109bp109bp109bp[本題答案] C A 200nmB 230nmC 260nmD 280nmE 320nm[本題答案] C6. 在純化核酸時往往含有少量共沉淀的鹽，常用下列哪種濃度的乙醇洗滌去除 A 100% B 95%C 70~75%D 50~60%E 30~40%[本題答案] C7. 在核酸的分離與純化過程中，不需去除的污染物是 A 蛋白質(zhì)B 脂類C 對后續(xù)實驗有影響的溶液和試劑D 不需要的核酸分子E 水[本題答案] E8. 紫外分光光度法對DNA進行測定中，下列哪項是正確的A DNA的最大吸收波長為280nmB A260為1的光密度大約相當于50181。g/ml雙鏈DNAC A260為1的光密度大約相當于40181。g/ml雙鏈DNAD A260為1的光密度大約相當于33181。g/ml雙鏈DNAE A260 / [本題答案] B，將整個操作過程的pH盡可能控制在 A 2～3 B 4～10C 10～11D 11～12E 12～14[本題答案] B，下列說法是正確的A 純DNA的A270/B 純DNA的A260/C 純DNA的A260/D 純DNA的A270/E 純DNA的A230/ [本題答案] B，提示無RNA的降解時應(yīng)A 28S RNA的熒光強度約為18S的2倍B 18S RNA的熒光強度約為28S的2倍C 5S RNA的熒光強度約為18S的2倍D 5S RNA的熒光強度約為28S的2倍E 28S RNA的熒光強度約為5S的2倍[本題答案] AA mRNAB 28SrRNAC 18SrRNAD 5SrRNAE [本題答案] A13. 以下哪項有利于DNA的保存 A 溶于TE中DNA在室溫可儲存數(shù)年B 加入少量DNase C 溶于pH D 加入少量DNase和RNase E 在DNA樣品中加入少量氯仿，可有效避免細菌污染[本題答案] E14. 酚抽提法可用于高分子量DNA的分離純化，所用試劑分別有不同的功能，下列正確的是 A SDS為 陽離子去污劑，主要引起細胞膜的降解并能乳化脂質(zhì)和蛋白質(zhì)B EDTA為二價金屬離子螯合劑，可促進DNase的活性 C 蛋白酶K只可消化K類蛋白質(zhì) D 酚可使蛋白質(zhì)變性沉淀 E 無RNase的DNase可有效地水解RNA [本題答案] C15. 下列哪種不是對核酸分子完整性進行鑒定的方法 A 凝膠電泳法 B Northern雜交C ELISAD Western blottingE 生物芯片技術(shù)[本題答案] D16. 下列哪種方法不是分離純化高分子量DNA的 A 酚抽提法B 煮沸裂解法C 甲酰胺解聚法D 玻棒纏繞法E 異丙醇沉淀法[本題答案] B17. 下列哪種不是從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的方法 A DEAE纖維素膜插片電泳法B 電泳洗脫法C 冷凍擠壓法D 低熔點瓊脂糖挖塊回收法E 漂洗法 [本題答案] E A DEAE纖維素膜插片電泳法B 非透析袋電泳洗脫法C透