【文章內容簡介】 ） 植物體細胞雜交 （ 2）體細胞中含有三個或三個以上染色體組的個體 在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會異常，而后者染色體聯(lián)會正常 （ 3）胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽 【解析】：本題考查植物體細胞雜交。（ 1）為了培養(yǎng)新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用纖維素酶和果膠酶處理，獲得具有活力的原生質體 A、 B，再用化學誘導劑聚乙二醇誘導融合形成雜種細胞，進一步培養(yǎng)形成愈傷組織，經過再分化形成根、芽，長成完整植株，以上獲得雜種植株的方法叫植物體細胞 雜交，能克服遠緣雜交不親和的障礙。（ 2）植物 A、B 體細胞雜交形成的雜種植株是四倍體，且該雜種植株減數(shù)分裂能形成正常配子，理論上是可育的；但如果將甲和乙有性雜交形成的二倍體，減數(shù)分裂由于不存在同源染色體無法聯(lián)會，無法形成正常配子，不可育。（ 3）在植物組織培養(yǎng)至胚狀體階段，可包裹上人工種皮制備人工種子。 （ 2020天津卷） 9.（ 15 分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與 完整的花椰菜原生質體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。 據(jù)圖回答下列問題： （ 1）過程 ① 所需的酶是 。 （ 2）過程 ② 后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的 存在，這一特征 可作為初步篩選雜種細胞的標志。 （ 3）原生質體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是 。原生質體經過 再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織。 （ 4）若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取 再生植株和 植株的根尖，通過 、 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。 （ 5）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組 DNA 進行 PCR 擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株 1—4 進行 PCR 擴增的結果。據(jù)圖判斷，再生植株 1—4 中一定是雜種植株的有 。 （ 6）對雜種植株進行 接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。 【答案】（ 1）纖維素酶和果膠酶 （ 2）葉綠體 （ 3）保持原生質體完整性細胞壁 （ 4）雙親（或花椰菜和黑芥） 解離漂洗 （ 5） 4 （ 6）黑腐病菌 【解析】 （ 1）過程 ① 表示原生質體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁 （ 2）用于融合的兩個細胞，一個是黑芥苗的葉肉細胞，一個是花椰菜的根部細胞，其中供體細胞特有的結構是葉綠體，可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志。 （ 3）原生質體沒有細胞壁的保護，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓 的穩(wěn)定，以避免原生質體吸水或失水破壞原生質體的完整性；原生質體通過細胞壁雜聲形成雜種細胞，進而形成愈傷組織。 （ 4）分析再生植株染色體變異類型，需要將再生植株細胞染色體和黑芥苗與花椰菜細胞中的染色體制片觀察進行比較，制片的基本程序是解離、漂洗、染色、制片。 （ 5）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為 300 和 600 的 DNA 片段，黑芥還有堿基對為 1000、1300 和 1500 的片段，再生植株 3,只含有長度為 300 和 600 的片段，與花椰菜一致， 4 既含有花椰菜 DNA 片段，又含有黑芥 DNA 片段，為雜 種植株。 （ 6）對雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株。 【試題評價】本題以抗黑腐病花椰菜的培育為信息載體，綜合考查了植物細胞工程、細胞分裂裝片的制作觀察、 PCR 圖譜的識別等相關內容，同時也考查了考生識圖獲取信息的能力，具有一定難度。 （ 2020 山東 卷） 3（ 8 分）【生物 ——現(xiàn)代生物科技專題】 科學家通過誘導黑鼠體細胞去分化獲得誘導性多能干細胞（ iPS），繼而利用 iPS 細胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如下： （ 1）從黑鼠體內獲得體細胞后，對其進行的初次培養(yǎng)稱為 ，培養(yǎng)的細胞在貼壁成長至充鏈滿培養(yǎng)皿底時停止分裂，這種現(xiàn)象稱為 （ 2 ） 圖 中 2— 細 胞 胚 胎 可 用 人 工 方 法 從 灰 鼠 輸 卵 管 內 獲 得 ， 該 過 程 稱為 ，也可從灰鼠體內取出卵子，通過 后進行早期胚胎培養(yǎng)獲得。 （ 3）圖中重組囊胚通過 技術移入白鼠子宮內繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用 方法保存。 （ 4）小鼠胚胎干細胞（ ES）可由囊胚的 分離培養(yǎng)獲得， iPS 與 ES 細胞同樣具有發(fā)育全能性，有望在對人類 iPS 細胞進行定向 后用于疾病的細胞治療。 【答案】（ 1）原代培養(yǎng) 接觸抑制 （ 2）沖卵 體外受精 （ 3）胚胎移植 冷凍（或低溫） （ 4）內細胞團細胞 誘導分化 【解析】（ 1）原代培養(yǎng)指將動物組織用酶處理成單個細胞后進行的初次培養(yǎng)。接觸抑制指貼壁的細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止裂增殖的現(xiàn)象。 （ 2）將早期胚胎從母牛子宮中沖洗出來的方法叫沖卵。 （ 3）暫不進行胚胎移植的胚胎可放入 —196℃ 的液氮中冷凍 保存。 （ 4）胚胎干細胞簡稱 ES 或 EK 細胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細胞。 iPS與 ES 細胞一樣，可通過誘導定向分化修補某些功能異常的細胞來治療疾病。 （ 2020 海南卷） 31.【生物 ——選修 3：現(xiàn)代生物科技專題】（ 15 分） 單純皰疹病毒 Ⅰ 型（ HSVⅠ ）可引起水皰性口唇炎。利用雜交瘤技術制備出抗 HSVⅠ的單克隆抗體可快速檢測 HSVⅠ 。 回答下列問題： （ 1）在制備抗 HSVⅠ 的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的 HSVⅠ 蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗 的抗體檢測呈陽性，說明小 鼠體內產生了 反應，再從小鼠的 中獲取 B 淋巴細胞。將該 B 淋巴細胞與小鼠的 細胞融合，再經過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是 。 （ 2）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的 中使其增殖，再從 中提取、純化獲得。 （ 3）通過上述方法得到的單克隆抗體可準確地識別這種 HSVⅠ 蛋白，其原因是該抗體具有 和 等特性。 【解析】（ 1）由題意可知，單純皰疹病毒 Ⅰ 型可引起水泡性 口炎，病毒蛋白 HSVⅠ可以作為一種抗原刺激機體通過免疫反應產生特異性抗體。在單克隆抗體的制備過程中，首先應注射純化的 HSVⅠ 蛋白作為抗原，一段時間后對小鼠血清進行檢測，如果抗 HSVⅠ蛋白的抗體檢測為陽性，說明小鼠體內通過體液免疫產生了特異性抗體。此時可以從小鼠的免疫器官中，如脾臟、骨髓、淋巴結等部位獲取已免疫的 B 淋巴細胞，與小鼠的骨髓瘤細胞融合，經過篩選檢測獲得能穩(wěn)定的產生特異性抗體的雜交瘤細胞。已免疫的 B 淋巴細胞具有產生特異性抗體的特點，而骨髓瘤細胞能無限增殖，因此獲得的雜交瘤細胞具有既能無限增殖又 能產生特異性抗體（抗 HSVⅠ 蛋白的抗體）的特點。 （ 2）獲得大量單克隆抗體途徑有兩種：體外培養(yǎng)和體內培養(yǎng)。體外培養(yǎng)即通過動物細胞培養(yǎng)技術獲得大量的雜交瘤細胞，進而產生大量的單克隆抗體；體內培養(yǎng)即將雜交瘤細胞注射到小鼠的腹腔中增殖，最后從小鼠的腹水中提取、純化單克隆抗體。 （ 3）單克隆抗體是通過細胞融合技術單一的 B 淋巴細胞核雜交瘤細胞融合而獲得的，因此融合后的細胞只能產生一種特異性抗體，所制備的單克隆抗體具有特異性強，靈敏度高的特點。 【試題點評】本題以皰疹病毒為素材切入，綜合考查了學生對單克隆抗體的制備原 理、過程及其特點的理解。旨在考查學生的理解和應用能力。 專題 3 胚胎工程 （ 2020天津卷） ，只有在促性腺激素和精子的誘導下才能完成。下面為某哺乳動物卵子及早期胚胎的形成過程示意圖（ N 表示染色體組） 據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是（ ） III 只有在精子的作用下才能形成 成熟卵子 、 III 和 IV 細胞分裂后期染色體數(shù)目相同 IV 作為受體細胞 【答案】 C 【解析】據(jù)圖可知，初級卵母細胞形成次級精母細胞的過程需要促性腺激素的調節(jié)， A項正確；細胞 III 為次級卵母細胞，減數(shù)第二次分裂是在輸卵管中伴隨著受精作用完成的，B 項正確； II、 III 和 IV 分別為初級卵母細胞、次級卵母細胞和受精卵，它們在細胞分裂后期的染色體組數(shù)依次為 :2N、 2N、 4N，染色體數(shù)不同， C 項錯誤；動物細胞的受精卵全能性高，因此培育轉基因動物常用受精卵作為受體細胞， D 項正確。 【試題評價