補(bǔ)體參與的反應(yīng)ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-30 06:01 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 分層液 粒細(xì)胞 紅細(xì)胞 離心后 ⑵ 洗滌細(xì)胞： 另取一支滴管， 仔細(xì) 吸出位于血漿和分離液之間的 乳白色的單個(gè)核細(xì)胞 ，放入盛有5mlHank’s液的試管 →→→ 2022rpm離心 5mins。棄上清（ 傾倒時(shí)液體不要回流 ），將沉淀的淋巴細(xì)胞輕彈混勻后加入 Hank’s液 5ml，重復(fù)離心一次。 2. 棄去上清，留經(jīng)過(guò)洗滌的 淋巴細(xì)胞懸液 綿羊紅細(xì)胞 、 1640營(yíng)養(yǎng)液 →→→ 輕彈混勻后放于 37℃ 溫箱 15mins。 3. 取出試管， 500rpm離心 5mins。（注意此步非常關(guān)鍵， 轉(zhuǎn)速一定要慢 ）室溫靜置 35分鐘。 4. 取出試管，吸去半量上清液，輕輕 旋轉(zhuǎn)混勻 ，沿管壁 滴加 1滴戊二醛，輕輕混勻靜置 5mins。 5. 取 25ul液體滴片，加一滴燦爛甲酚蘭染液，加蓋玻片。 6. 顯微鏡下觀察。 E花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)（燦爛甲酚蘭染色， 400） 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 高倍鏡下觀察，計(jì)數(shù) 100個(gè)淋巴細(xì)胞，計(jì)算花環(huán)形成率。淋巴細(xì)胞上結(jié)合 ≥3個(gè) SRBC者為 E花環(huán)陽(yáng)性。 1 0 0 %未形成花環(huán)細(xì)胞數(shù)形成花環(huán)細(xì)胞數(shù) 形成花環(huán)細(xì)胞數(shù)E 花環(huán)形成率( % ) ???正常參考值： EtRFC： 177。 ％； EaRFC： 177。 ％； EsRFC： 177。 ％ ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2. 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn) 原理 ? T細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，受到非特異性有絲分裂原(如 PHA、 ConA)或特異性抗原刺激后，可出現(xiàn)代謝旺盛、蛋白質(zhì)和核酸合成增加、細(xì)胞體積增大并能進(jìn)行分裂的淋巴母細(xì)胞，稱(chēng) 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化現(xiàn)象 。 ? 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的高低，可反映機(jī)體的細(xì)胞免疫水平，故可作為測(cè)定機(jī)體免疫功能的指標(biāo)。 ? 常用方法 形態(tài)學(xué)方法 3HTDR摻入法 MTT比色法 胞核的大小 、 與胞漿的比例 、 胞漿染色性 、 核的構(gòu)造與核仁的有無(wú) ? 成熟小淋巴細(xì)胞： 核染色深 、
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