ch14transcription本科白(編輯修改稿)
2025-05-28 22:23 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 NA聚合酶沿 DNA鏈的 3’→ 5’ 方向迅速向前移行。 ? 每移行一步都與一分子三磷酸核苷生成一個新的磷酸二酯鍵，使合成的 RNA鏈按照 5’ → 3’ 方向不斷延伸。形成 酶 DNARNA轉(zhuǎn)錄復合物 。 36 ? 轉(zhuǎn)錄空泡 (transcription bubble)：也稱轉(zhuǎn)錄復合物，是由 RNApol核心酶、 DNA模板和轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA三者結(jié)合在一起的復合體。 37 （三）轉(zhuǎn)錄的終止 原核生物的轉(zhuǎn)錄終止 ? 大腸桿菌 (1)非依賴 rho(?)的終止子 (2)依賴 rho(?)的終止子 ? 終止因子：協(xié)助 RNA聚合酶識別終止信號的輔助因子為蛋白質(zhì)。 38 39 40 二、真核生物的轉(zhuǎn)錄過程 ? 真核生物的轉(zhuǎn)錄過程與原核生物的轉(zhuǎn)錄過程的主要區(qū)別。 ? 1） RNA聚合酶和產(chǎn)物 ? 2） RNA聚合酶不直接結(jié)合模板 ? 3）轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)段比原核生物多樣化 ? 4）轉(zhuǎn)錄終止與轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān) 41 （一）轉(zhuǎn)錄的起始 ? 典型的真核生物基因上游序列示意圖 42 反式作用因子 ? 反式作用因子 (transacting factor)：能直接或間接辨認、結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段 DNA的蛋白質(zhì)。因子之間又需相互辨認、結(jié)合以準確控制基因是否轉(zhuǎn)錄。 ? 反式作用因子中，直接或間接結(jié)合 RNA聚合酶的稱為轉(zhuǎn)錄因子 (transcriptional factor, TF)： TFI、 II、 III 43 ? 真核生物 RNA聚合酶不與 DNA分子直接結(jié)合。在眾多 TFII中 TFIID(TFIIDz)是目前已知唯一能結(jié)合 TATA盒的蛋白質(zhì)。 ? TF有多個結(jié)構(gòu)域 (domain)：結(jié)合 DNA、結(jié)合其他 TF，激活其他 TF，激活其他酶。 44 形成 PIC的順序如下 PIC RNApol II/TF II F TF II E、 H TF II B TF II A TF II D TATA ?拼板理論 。 45 PIC的形成 ? 原核生物的 ?因子和真核生物的眾多 TFII在進化上有親緣關(guān)系。 46 （二）轉(zhuǎn)錄的延長 ? 真核生物的轉(zhuǎn)錄延長與原核生物相似。 ? 核小體移位和解聚現(xiàn)象。 47 （三）轉(zhuǎn)錄的終止 ? 真核生物的轉(zhuǎn)錄終止是和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)的。 ? 模板鏈讀碼框架的 3’端之后常有一組共有序列 AATAAA，其下游還有較多 GT序列，這些稱為轉(zhuǎn)錄終止的修飾點。 48 49 50 第三節(jié) RNA的轉(zhuǎn)錄后加工 ? mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工 ? tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工 ? rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工 ? RNA加工修飾的主要類型：剪切、剪接、添加核苷酸、化學修飾、 RNA編輯等 51 一、原核生物中 RNA的加工 ? rRNA基因與某些 tRNA的基因組成混合操縱子。 ? 其余 tRNA基因也成簇存在，并與編碼蛋白質(zhì)的基因組成操縱子。 ? 它們在形成多順反子轉(zhuǎn)錄物后，經(jīng)斷裂成為 rRNA和 tRNA的前體，進一步加工成熟。 52 （一）原核生物 rRNA前體的加工 ? 大腸桿菌共有 7個 rRNA的轉(zhuǎn)錄單位 ? 每個單位由 16SrRNA、 23SrRNA、 5SrRNA以及一個或幾個 tRNA的基因所組成。 ? 基因原初轉(zhuǎn)錄物的沉降系數(shù)為 30S，分子質(zhì)量為 103kD，約 6500個核苷酸。 ? 含有多個甲基化修飾成分，包括甲基化堿基和甲基化核糖，尤其常見為 2’甲基核糖。 53 54 （二）原核生物 tRNA前體的加工 ? 大腸桿菌染色體基因組共有 tRNA的基因約60個，大多成簇存在。 ? tRNA前體的加工包括： 1)核酸內(nèi)切酶在tRNA兩端切斷； 2)核酸外切酶從 3’端逐個切去附加順序，進行修剪； 2)在 tRNA3’端加上 CCAOH； 4)核苷酸的修飾和異構(gòu)化。 ? 成熟的 tRNA中存在眾多的修飾成分。 55 56 （三）原核生物 mRNA前體的加工 ? 細菌中用于指導蛋白質(zhì)合成的 mRNA大多不需加工，一經(jīng)轉(zhuǎn)錄即可直接進行轉(zhuǎn)譯。 ? 也有少數(shù)多順反子 mRNA需通過核酸內(nèi)切酶切成較小單位，再進行轉(zhuǎn)譯。 ? 常形成操縱子。 57 二、真核生物中 RNA的加工 ? 真核生物 rRNA和 tRNA前體的加工過程與原核生物有些類似 ? 真核生物 mRNA前體必須經(jīng)過復雜的加工過程，這與原核生物大不相同。 58 （一）真核生物 rRNA前體的加工 ? 真核細胞的 rRNA基因 (rDNA)屬于豐富基因單位的
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