植物組織培養(yǎng)學(xué)ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-28 02:17 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 培養(yǎng)體的支持材料等五大類。 ? 水 是植物原生質(zhì)體的組成成分，也是一切代謝過程的介質(zhì)和溶媒。它是生命活動過程中不可缺少的物質(zhì)。配制培養(yǎng)基母液時要用蒸餾水，以保持母液及培養(yǎng)基成分的精確性，防止貯藏過程發(fā)霉變質(zhì)。大規(guī)模生產(chǎn)時可用自來水。但在少量研究上盡量用蒸餾水，以防成分的變化引起不良效果。 無機(jī)元素 (inanic element) 大量元素 ， 指濃度大于 ／ L的元素等 。 其作用是： ? (1)N 是蛋白質(zhì) 、 酶 、 葉綠素 、 維生素 、 核酸 、 磷脂 、 生物堿等的組成成分 ，是生命不可缺少的物質(zhì) 。 在制備培養(yǎng)基時以 NO3— N和 NH4— N兩種形式供應(yīng) 。大多數(shù)培養(yǎng)基既含有 N03— N又含 NH4— N。 NH4— N對植物生長較為有利 。 供應(yīng)的物質(zhì)有 KNO NH4NO3等 。 有時 ， 也添加氨基酸來補(bǔ)充氮素 。 ? (2)P 是磷脂的主要成分 。 而磷脂又是原生質(zhì) 、 細(xì)胞核的重要組成部分 。 磷也是 ATP、 ADP等的組成成分 。 在植物組織培養(yǎng)過程中 ， 向培養(yǎng)基內(nèi)添加磷 ， 不僅增加養(yǎng)分 、 提供能量 ， 而且也促進(jìn)對 N的吸收 ， 增加蛋白質(zhì)在植物體中的積累 。 常用的物質(zhì)有 KH2P04或 NaH2P04等 。 ? (3)K 對碳水化合物合成 、 轉(zhuǎn)移 、 以及氮素代謝等有密切關(guān)系 。 K增加時 ， 蛋白質(zhì)合成增加 ， 維管束 、 纖維組織發(fā)達(dá) ， 對胚的分化有促進(jìn)作用 。 但濃度不易過大 ， 一般為 1— 3mg／ L為好 。 制備培養(yǎng)基時 ， 常以 KCI、 KN03等鹽類提供 。 ? (4)Mg、 S和 Ca、 Mg 是葉綠素的組成成分，又是激酶的活化劑； S是含 S氨基酸和蛋白質(zhì)的組成成分。它們常以 MgSO47H20提供。用量為 1— 3mg／ l較為適宜； Ca是構(gòu)成細(xì)胞壁的一種成分， Ca對細(xì)胞分裂、保護(hù)質(zhì)膜不受破壞有顯著作用，常以 CaCl22H2O提供。 微量元素 指小于 ／ L的元素 ， Fe， B，Mn， Cu， Mo， Co等 。 ? 鐵是一些氧化酶、細(xì)胞色素氧化酶、過氧化氫酶等的組成成分。同時，它又是葉綠素形成的必要條件。培養(yǎng)基中的鐵對胚的形成、芽的分化和幼苗轉(zhuǎn)綠有促進(jìn)作用。在制做培養(yǎng)基時不用 Fe2SO4，和 FeCl3(因其在 pH值 5． 2以上，易形成 Fe(OH)3的不溶性沉淀 )，而用 FeSO47H20和 Na2— EDTA結(jié)合成合物使用。 B， Mn， Zn，Cu， Mo， Co等，也是植物組織培養(yǎng)中不可缺少的元素，缺少這些物質(zhì)會導(dǎo)致生長、發(fā)育異常現(xiàn)象。 有機(jī)化合物 (anic pound) ? 培養(yǎng)基中若只含有大量元素與微量元素，常稱為 基本培養(yǎng)基（ basic medium)。為不同的培養(yǎng)目的往往要加入一些有機(jī)物以利于快速生長。常加入的有機(jī)成分主要有以下幾類： 碳水化合物 最常用的碳源是蔗糖 ， 葡萄糖和果糖也是較好的碳源 ， 可支持許多組織很好的生長 。 麥芽糖 、 半乳糖 、 甘露糖和乳糖在組織培養(yǎng)中也有應(yīng)用 。 蔗糖使用濃度在 2%— 3%， 常用 3%， 即配制一升培養(yǎng)基稱取 30g蔗糖 ， 有時可用 %， 但在胚培養(yǎng)時采用 4%15%的高濃度 ， 因蔗糖對胚狀體的發(fā)育起重要作用 。 不同糖類對生長的影響不同。從各種糖對水稻根培養(yǎng)的影響來看，以葡萄糖效果最好，果糖和蔗糖相當(dāng)，麥芽糖差一些。不同植物不同組織的糖類需要量也不同，實(shí)驗(yàn)時要根據(jù)配方規(guī)定按量稱取，不能任意取量。高壓滅菌時，一部分糖會發(fā)生分解，制定配方時要給予考慮。在大規(guī)模生產(chǎn)時，可用食用的綿白糖代替。 ? 維生素 (vitamin) 這類化合物在植物細(xì)胞里主要是以各種輔酶的形式參與多種代謝活動，對生長、分化等有很好的促進(jìn)作用。雖然大多數(shù)的植物細(xì)胞在培養(yǎng)中都能合成所必需的維生素，但在數(shù)量上，還明顯不足，通常需加入一至數(shù)種維生素，以便獲得最良好的生長。主要有VBl(鹽酸硫胺素 )、 VB6(鹽酸吡哆醇 )、 Vpp(煙酸 )、 Vc（抗壞血酸）、有時還使用生物素、葉酸、 VB12等。一般用量為 0． 1— 1． 0mg／ L。有時用量較高。 VB1對愈傷組織的產(chǎn)生和生活力有重要作用， VB6能促進(jìn)根的生長， Vpp與植物代謝和胚的發(fā)育有一定關(guān)系。 Vc有防止組織變褐的作用。 ? 肌醇 (myo— inosltol)又叫環(huán)己六醇，在糖類的相互轉(zhuǎn)化中起重要作用。通?？捎闪姿崞咸烟寝D(zhuǎn)化而成，還可進(jìn)一步生成果膠物質(zhì)，用于構(gòu)建細(xì)胞壁。肌醇與 6分子磷酸殘基相結(jié)合形成植酸，植酸與鈣、鎂等陽離子結(jié)合成植酸鈣鎂，植酸可進(jìn)一步形成磷脂，參與細(xì)胞膜的構(gòu)建。使用濃度一般為 lOOmg／ L，適當(dāng)使用肌醇，能促進(jìn)愈傷組織的生長以及胚狀體和芽的形成。對組織和細(xì)胞的繁殖、分化有促進(jìn)作用，對細(xì)胞壁的形成也有作用。 ? 氨基酸 (almino acide) 是很好的有機(jī)氮源，可直接被細(xì)胞吸收利用。培養(yǎng)基中最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸，谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。有時應(yīng)用水解乳蛋白或水解酪蛋白，它們是牛乳用酶法等加工的水解產(chǎn)物，是含有約 20種氨基酸的混合物，用量在 101000mg／ L之間。由于它們營養(yǎng)豐富，極易引起污染。如在培養(yǎng)中無特別需要，以不用為宜。 天然復(fù)合物 ? 其成分比較復(fù)雜，大多含氨基酸、激素、酶等一些復(fù)雜化合物。它對細(xì)胞和組織的增殖與分化有明顯的促進(jìn)作用，但對器官的分化作用不明顯。它的成分大多不清楚，所以一般應(yīng)盡量避免使用。 ? 1)椰乳 是椰子的液體胚乳 。 它是使用最多 、 效果最大的一種天然復(fù)合物 。 一般使用濃度在 10%— 20%， 與其果實(shí)成熟度及產(chǎn)地關(guān)系也很大 。 它在愈傷組織和細(xì)胞培養(yǎng)中有促進(jìn)作用 。 在馬鈴薯莖尖分生組織和草莓微莖尖培養(yǎng)中起明顯的促進(jìn)作用 ， 但莖尖組織的大小若超過 1nun時 ， 椰乳就不發(fā)生作用 。 ? 2)香蕉 用量為 150200ml／ L。 用黃熟的小香蕉 ， 加入培養(yǎng)基后變?yōu)樽仙?。 對 pH值的緩沖作用大 。 主要在蘭花的組織培養(yǎng)中應(yīng)用 ，對發(fā)育有促進(jìn)作用 。 ? 3)馬鈴薯 (potato) 去掉皮和芽后 ， 加水煮 30min， 再經(jīng)過過濾 ， 取其濾液使用 。 用量為 150— 200g／ L。 對 pH值緩沖作用也大 。 添加后可得到健壯的植株 。 ? 4)水解酪蛋白 為蛋白質(zhì)的水解物 ， 主要成分為氨基酸 ， 使用濃度為 100— 200mg／ L。 受酸和酶的作用易分解 ， 使用時要注意 。 ? 5)其他 酵母提取液 (YE)(%%)，主要成分為氨基酸和維生素類；麥芽提取液 (%～ %)、蘋果和番茄的果汁、黃瓜的果實(shí)、未熟玉米的胚乳等。遇
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1