實(shí)驗(yàn)細(xì)菌轉(zhuǎn)化ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-26 00:14 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 液。9. 將 500 μl的 Rinse A加入 Spin Column中， 12,000 rpm離心 30秒鐘，棄濾液。 10. 將 700 μl的 Rinse B加入 Spin Column中， 12,000 rpm離心 30秒鐘，棄濾液。 11. 重復(fù)操作步驟 10。12. 將 Spin Column安置于 Collection Tube上， 12,000 rpm離心 1分鐘。 13. 將 Spin Column安置于新的 ml的離心管上，在 Spin Column膜的中央處加入 60 μl的滅菌蒸餾水或 Elution Buffer，室溫靜置 1分鐘。 注）把滅菌蒸餾水或 Elution Buffer加熱至 60℃ 使用時(shí)有利于提高洗脫效率14. 12,000 rpm離心 1分鐘洗脫 DNA。 六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)? 按上述實(shí)驗(yàn)步驟提取質(zhì)粒 DNA。? 思考本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟是什么？答：本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是溶液 Ⅰ 重懸須充分，溶液 Ⅲ 混合須溫和。實(shí)驗(yàn)二 大腸桿菌的遺傳轉(zhuǎn)化一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)實(shí)驗(yàn)了解原核生物實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移的途徑，掌握質(zhì)粒 DNA遺傳轉(zhuǎn)化的基本原理和操作方法。 二、實(shí)驗(yàn)原理? 轉(zhuǎn)化（ transformation） 是指一種生物由于接受了另一種生物（或同種生物）的遺傳物質(zhì)，從而獲得了后者的某些遺傳性狀或發(fā)生遺傳性狀改變的現(xiàn)象。? 細(xì)菌處于容易吸收外源 DNA的狀態(tài)叫 感受態(tài) 。? 用理化方法人工誘導(dǎo)細(xì)菌進(jìn)入感受態(tài)的操作叫致敏過(guò)程。? 目前應(yīng)該較廣的轉(zhuǎn)化方法有兩種： CaCl2轉(zhuǎn)化法（化學(xué)轉(zhuǎn)化法）和電轉(zhuǎn)化法。? CaCl2轉(zhuǎn)化法的原理是在低溫（ 0℃ ）和低滲的 CaCl
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