【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ） 核酸 Tm 的高低與 DNA 分子中 G+C 的含量有關(guān)，堿基數(shù)相同的情況下，其含量越高，則 Tm 越高。 （√） 農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和基因槍法是植物轉(zhuǎn)化的主要方法（√） 1（√）有一些來(lái)源不同的限制性內(nèi)切酶識(shí)別的是同樣的核苷酸序列，這類酶稱為同裂酶。 1檢測(cè)外源基因的導(dǎo)入時(shí)， PCR 的準(zhǔn)確性要高于 Southern 雜交的準(zhǔn)確性。（ ） 1轉(zhuǎn)基因食品目前存在的最大問(wèn)題是我們無(wú)法檢測(cè)某種食品到底是不是轉(zhuǎn)基因食品。（ ） 1 轉(zhuǎn)基因生物直接食用的，稱為“轉(zhuǎn)基因食品”，而作為加工原料生產(chǎn)的食品，則不能被稱為“轉(zhuǎn)基因食品”。 （ ） 1質(zhì)粒 DNA 進(jìn)行電泳時(shí)，其三種構(gòu)型中，開(kāi)環(huán) DNA 跑的最快，共價(jià)閉環(huán)形 DNA跑得最慢。（ ） 1在生物技術(shù)的五大工程中，生化工程是核心技術(shù)，它能帶動(dòng)其他技術(shù)的發(fā)展。（ ） 1 cDNA 是以 DNA 為起始材料，經(jīng)過(guò)復(fù)制得到的互補(bǔ) DNA。（ ） 1 DNA 的復(fù)制是全保留不連續(xù)復(fù)制。（ ） 1基因是一個(gè)功能單位，但不是一個(gè)不可分割的最小的重組單位和突變單位。（√） Western 雜交可以檢 測(cè)外源 DNA 的導(dǎo)入與否。（ ） 2 生物技術(shù)是由多學(xué)科綜合而成的一門新學(xué)科。（ √ ） 2 1977 年，美國(guó)首先采用大腸桿菌生產(chǎn)了人類第一個(gè)基因工程藥物 —— 人生長(zhǎng)激素釋放抑制劑激素。（ √ ） 2 生物技術(shù)是一門新興學(xué)科，它包括當(dāng)代生物技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)兩部分 .（ √ ） 2 生物技術(shù)主要包括五項(xiàng)技術(shù)（工程）。（ √ ） 2 現(xiàn)代生物技術(shù)是所有自然科學(xué)領(lǐng)域中涵蓋范圍最廣的學(xué)科之一。（ √ ） 2本世紀(jì)初，遺傳學(xué)的建立及其應(yīng)用，產(chǎn)生了遺傳育種學(xué)，并于 60 年代取得了輝煌的成就，被譽(yù)為“第一次綠色革命”。（ √ ） 2無(wú)論用哪種轉(zhuǎn)化方法均可用 PBR322 作載體（ ） 2進(jìn)入細(xì)菌的外來(lái) DNA 之所以被降解，是因?yàn)榧?xì)菌只修飾自身 DNA，不修飾外來(lái) DNA（ ） 2只有粘粒端才可以被連接起來(lái)（ ） 用自身作引物合成的 cDNA 鏈，往往 cDNA 并不完整（ ） 3 所謂半保留復(fù)制就是以 DNA 親本鏈作為合成新子鏈 DNA 的模板，這樣產(chǎn)生的雙鏈 DNA 分子由一條舊鏈和一條新鏈組成。（ √ ） 3 任何細(xì)胞都可用作受體細(xì)胞。（ ） 3克隆子就是重組子。（ ） 3原核生物細(xì)胞是最理想的受體細(xì)胞。（ √） 3目的基因來(lái)源于各 種生物，其中真核生物染色體基因組是獲得目的基因的主要來(lái)源。（ √） 3 DNA 連接酶只能催化雙鏈 DNA 片斷互補(bǔ)黏性末端之間的連接。（ √） 3酶是具有生物催化特性的特殊蛋白質(zhì)。 （ ╳ ） 3酶的分類與命名的基礎(chǔ)是酶的專一性。 （ √ ） 3酶活力指在一定條件下酶所催化的反應(yīng)速度，反應(yīng)速度越大，意味著酶活力越高。 （ √ ） 液體深層發(fā)酵是目前酶發(fā)酵生產(chǎn)的主要方式。 （ √ ） 4培養(yǎng)基中的碳源，其唯一作用是能夠向細(xì)胞提供碳素化合物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 （ ╳ ） 4膜分離過(guò)程中，膜的作用是選 擇性地讓小于其孔徑的物質(zhì)顆粒成分或分子通過(guò)，而把大于其孔徑的顆粒截留。 （ √ ） 4在酶與底物、酶與競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑、酶與輔酶之間都是互配的分子對(duì)，在酶的親和層析分離中，可把分子對(duì)中的任何一方作為固定相。 （ √ ） 4 角叉菜膠也是一種凝膠，在酶工程中常用于凝膠層析分離純化酶。 （ ╳ ） 4 α －淀粉酶在一定條件下可使淀粉液化，但不稱為糊精化酶。 （ ╳ ） 4酶法產(chǎn)生飴糖使用 α －淀粉酶和葡萄糖異構(gòu)酶協(xié)同作用。 （ ╳ ） 4重組質(zhì)粒載體可以通過(guò)細(xì)胞轉(zhuǎn)化方法將重組 DNA 轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞 (√ ) 4通過(guò) DNA 重拍技術(shù)進(jìn)行酶基因的體外隨機(jī)突變，可以獲得大量的正突變基因。（ ╳ ） 50、基因家族重排技術(shù)需要經(jīng)過(guò)不加引物的多次 PCR 循環(huán)，使 DNA 的堿基序列重新排布而引起基因突變。 (√ ) 5 包埋法可以用于酶、細(xì)胞和原生質(zhì)體的固定化。 （ √ ） 5固定化原生質(zhì)體由于細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)完整，可以保持細(xì)胞原有的生命活動(dòng)能力。（ ╳ ） 5采用共價(jià)結(jié)合法制備得到的固定化細(xì)胞具有很好的穩(wěn)定性。 （ √ ） 四、填空題 1. 基因工程技術(shù) 是生物技術(shù)的核心技術(shù)。 2. PCR 包括三個(gè)步驟 _變性 ， 退火 ， 延伸 。 3. 基因工程的實(shí)施包括四個(gè)必要條件： 工具酶 、 基因 、 載體 和 受體細(xì)胞 。 4. 限制性內(nèi)切酶酶切 DNA 片斷后通常有兩類末端： 平末端 、 黏性末端 。 5. 基因組 文庫(kù)中包括有內(nèi)含子和外顯子，而 cDNA 文庫(kù)中則不含內(nèi)含子 6. 生物技術(shù)主要是指 基因工程 、 細(xì)胞工程 、 酶工程 、 發(fā)酵工程 、 蛋白質(zhì)工程 。 7. 現(xiàn)代生物技術(shù)是以 20 世紀(jì) 70 年代 DNA 重組 技術(shù)的建立為標(biāo)志。 8. 細(xì)胞工程包括 植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù) 、 細(xì)胞融合技術(shù) 、 細(xì)胞器移植技術(shù) 、克隆技術(shù) 、 干細(xì)胞技術(shù) 。 9. 酶工程包括 酶的固定化技術(shù) 、 細(xì)胞的固定化技術(shù) 、 酶的修飾改造技術(shù) 、 酶反應(yīng)器的設(shè)計(jì) 等技術(shù)。 10. 基因工程操作流程主要包括 目的基因分離 、 與克隆載體重組 、 轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞 、 篩選和鑒定克隆子 。 11. 基因工程操作流程主要包括 目的基因分離 、 與克隆載體重組 、 轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞 、篩選和鑒定克隆子 。 12. 重組 DNA 導(dǎo)入植物細(xì)胞常采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的 Ti 質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化法 、 電穿孔法 、微彈轟擊法 、 花粉管通道法 。導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用的方法有 病毒顆粒 介導(dǎo)的 病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)法 、 磷酸鈣轉(zhuǎn)染法 、 顯微注射法 等。 13. 酶的生產(chǎn)方法有 提取法 ， 發(fā)酵法 和 化學(xué)合成法 。 14. 酶分子修飾的主要目的是改進(jìn)酶的性能 ，即提高酶的 活力 、減少 抗原性 ，增加 穩(wěn)定性 。 15. 根據(jù)分子中起催化作用的主要組分的不同，酶可以分為 蛋白酶 和 核酶 兩大類。 16. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法主要有懸浮培養(yǎng)， 貼壁培養(yǎng) 、 固定化細(xì)胞培養(yǎng) 。 17. 定點(diǎn)突變是在 DNA 序列的 某一特定位點(diǎn)上 ， 進(jìn)行堿基的改變，從而獲得 突變基因 的操作技術(shù)。 18. 細(xì)胞工程包括 植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù) 、 細(xì)胞融合技術(shù) 、 細(xì)胞器移植技術(shù) 、克隆技術(shù) 、 干細(xì)胞技術(shù) 。 19. 酶工程包括 酶的固定化技術(shù) 、 細(xì)胞的固定化技術(shù) 、 酶的修飾改造技術(shù) 、 酶反應(yīng)器的設(shè)計(jì) 等技術(shù)。 20. 基因 工程從研究?jī)?nèi)容上主要包括 （ 在供體細(xì)胞中用限制性內(nèi)切酶切割 基因 ）、（ 把獲得的目的基因與制備好的運(yùn)載體用 DNA 連接 ） 、（ 把重組體進(jìn)入宿主細(xì)胞 ） 和（ 篩選出能表達(dá)目的基因的受體細(xì)胞 ） 等 4 方面。 21. cosmid vector 的特點(diǎn) 主要包括（ 具有 ? 噬菌體的特性 ）、（ 具有質(zhì)粒載體的特性 ）、（ 方便的選擇 ）、（ 高容量的克隆能力 ）。 22. 細(xì)胞融合技術(shù)的主要過(guò)程主要包括（ 制備原生質(zhì)體 ）、（ 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 ）、（ 篩選雜合細(xì)胞 ）三個(gè)步驟。 23. 植物組織培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素對(duì)細(xì)胞分裂素的比值（ 低 ）高 /低有利于促進(jìn)胚芽及胚根的誘導(dǎo)分化。 24. 細(xì)胞融合技術(shù)中雜合體的鑒別與篩選技術(shù)主要包括（ 顯微鏡鑒別 ）、（互 補(bǔ)法 ） 、（ 細(xì)胞與分子生物學(xué)的方法 ）、（ 再生體植株表型 ）等手段。 25. 按分化潛能的大小，干細(xì)胞基本上可以分為（ 全能干細(xì)胞 ）、（ 多能性干細(xì)胞 ）、（ 專一性干細(xì)胞 ）三種類型。 26. 液體深層發(fā)酵是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的先進(jìn)發(fā)酵技術(shù)，與其它發(fā)酵方法相比，它的優(yōu)點(diǎn)主要包括（ 液體懸浮狀態(tài)有利微生物生長(zhǎng) ）、（ 在液體中菌體及營(yíng)養(yǎng)物、產(chǎn)物易于擴(kuò)散，使發(fā)酵可在均質(zhì)條件下進(jìn)行，便于控制易進(jìn)行自動(dòng)化控制 ）、（ 液體輸送方便，易于機(jī)械化操作 ）、（ 占地小，易進(jìn)行自動(dòng)化控制 ）、（ 產(chǎn)品易于提取、精制 ）等 5 個(gè)方面。 27. 溫度對(duì)發(fā)酵過(guò)程的影響主要體現(xiàn)在（ 影響酶促反應(yīng)速率 ） 、（ 改變菌體代謝物的合成方向 ）、（ 影響代謝調(diào)控機(jī)制 ）、（ 影響發(fā)酵液理化性質(zhì) ）等 4 個(gè)方面。 28. 優(yōu)良產(chǎn)酶菌株的篩選條件主要包括（ 繁殖快，產(chǎn)酶高 ）、（ 能在較經(jīng)濟(jì)的底物上生長(zhǎng)良好 ）、（ 產(chǎn)酶性能穩(wěn)定、菌株不易退化，不易受污染 ）、（ 產(chǎn)的酶易分離純化，不是致病菌 ） 4 個(gè)方面。 29. 酶分子修飾主要有（ 金屬離子置換 ）、（ 大分子結(jié)合修飾 ）、（ 側(cè)鏈基團(tuán)修飾 ）、（ 主鏈的有限水解修飾 ）、（ 氨基酸置換修飾 ）、（ 物理修飾 ）等 6 種方法。 30. 固定化酶的主要缺點(diǎn)是（ 酶易失活 ）。 31. 植物細(xì)胞融合技術(shù)的主要過(guò)程主要包括（ 制備原生質(zhì)體 ）、（ 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 ）、（ 篩 選雜合細(xì)胞 ）三個(gè)步驟。 32. 作為基因操作的載體，應(yīng)具備的基本條件主要有 （ 具有對(duì)受體細(xì)胞的可轉(zhuǎn)移性，并在宿主細(xì)胞 內(nèi)能獨(dú)立復(fù)制 ） 、（ 有選擇性標(biāo)記，便于重組 DNA 分子的檢測(cè) ）